冬凌草甲素抗食管鳞癌转录的组学研究

王 伟，丁 爽，龚美源，李娜娜，燕迪迪，倪凯园，郭建成, 张 旗

1)郑州大学第一附属医院肿瘤科 郑州 450052 2)郑州大学药学院 郑州 450001 3)省部共建食管癌防治国家重点实验室 郑州 450052 4)郑州大学精准医学中心 郑州 450052

食管癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，居我国癌症死因的第4位[1]。食管癌发病具有明显的地区特异性，高发区域为我国太行山南部的河南、山西和河北三省交界地区及广东的潮汕地区。尽管食管癌综合治疗不断发展，但其5 a生存率仍不足20%[2]。因此，开发新型食管癌治疗药物是临床研究的迫切需要和重要方向之一。冬凌草是我国传统中药，临床实践显示其对多种恶性肿瘤治疗有效，尤其对肺癌等多种常见肿瘤的抑瘤率高达41%。冬凌草对我国北方发病率较高的食管癌和胃癌尤为敏感[3]，冬凌草甲素是冬凌草抗癌的主要活性成分[4]。

为进一步阐明冬凌草甲素抗食管癌作用可能的分子机制，我们运用了全转录组分析技术(RNA-seq)分析冬凌草甲素处理4 h后的食管癌细胞中转录组的变化，探讨冬凌草甲素抗食管癌的潜在分子靶点。

1 材料与方法

1.1 药品和主要试剂冬凌草甲素(批号T12D7F26645)分析标准品，HPLC≥98%，购于上海源叶生物科技有限公司。DMSO购自Solarbio公司，MTT购自Amresco公司，FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒购自江苏凯基生物技术股份有限公司。TruSeq Stranded mRNA LT Sample Prep Kit购于美国Illumina公司，反转录试剂盒(RR036A)由日本TaKaRa公司提供，SYBR qPCR Master Mix购自南京诺唯赞生物科技有限公司，RNA提取试剂盒购自北京天根生物科技有限公司。

1.2 冬凌草甲素对……