miR-107在TGF-β诱导的NIH-3T3细胞转分化中的作用

裴阳晴，丁明翠，王 迪，郝长付，姚 武

1)郑州大学第一附属医院检验科 郑州 450052 2)郑州大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室 郑州 450001 3)上海市宝山区疾病预防控制中心 上海 201901

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)是一种常见的慢性进行性纤维化间质性肺疾病。在IPF过程中，肌成纤维细胞是主要的效应细胞，可以介导纤维的生成、细胞外基质(extracellular matrix，ECM)沉积以及组织重塑[1]。肌成纤维细胞特征性表达α-SMA，并且具有较高的收缩能力和纤维生成能力；其最常见的来源为肺间质的成纤维细胞[2]。有学者[3-4]报道，成纤维细胞表型转分化的诱导因素主要为细胞因子(IL-10、IL-4)、生长因子(TGF-β)、机械张力等机械因素以及纤连蛋白等细胞外基质蛋白。近年来，随着学者们对基因组研究的深入，越来越多的证据[5]表明miRNA也参与并调节成纤维细胞的转分化过程，主要包括上皮修复、上皮间质转化、成纤维细胞活化、肌成纤维细胞分化等。目前已知的参与调控成纤维细胞转分化的miRNA大多是通过靶向调节TGF-β信号通路实现的[6]；但关于miR-107在肺纤维化疾病中的研究较少，且其在肺纤维化进程中的作用尚不清楚。因此，本研究利用TGF-β诱导小鼠胚胎成纤维细胞NIH-3T3转分化，检测细胞中转分化标志α-SMA、Collagen Ⅰ、Fibronectin蛋白表达水平及miR-107表达水平，探讨miR-107在NIH-3T3转分化中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料NIH-3T3细胞购自中国科学院细胞库。胎牛血清(Hyclone公司)，DMEM 培养基、胰蛋白酶、丙酮酸钠、非必需氨基酸(北京索莱宝科技有限公司)，抗GAPDH兔多克隆抗体(杭州贤至生物科技有限公司)，抗……