TM4SF1对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭转移及EMT的影响

梁 冰，邓 萌，裴新红

1)郑州大学第二附属医院乳腺外科 郑州450014 2)郑州大学第一附属医院乳腺外科 郑州 450052

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁女性健康。癌症统计数据[1-2]显示，乳腺癌占女性新发肿瘤的30%，高居首位，且患者趋于年轻化。术后复发和转移是乳腺癌死亡的主要原因，因此探讨乳腺癌侵袭转移的发生机制对改善患者预后具有重要意义。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)是上皮细胞获得迁移能力的方式之一[3]。研究[4]表明，EMT在乳腺癌、肺癌、食管癌、肝癌等多种恶性肿瘤的侵袭转移中发挥重要作用。四次跨膜蛋白1(transmembrane-4-L-six-family-1，TM4SF1)，又称肿瘤相关抗原L6，在正常组织中不表达或低表达，但在多种上皮性来源的癌组织(如乳腺癌、卵巢癌、结直肠癌等)中表达异常增高，并参与肿瘤细胞的黏附、侵袭、转移等过程[5-8]。有报道[7]指出TM4SF1可通过调节EMT参与结直肠癌的侵袭转移过程。本研究拟使用siRNA技术抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞中TM4SF1的表达，观察细胞侵袭转移能力及EMT相关因子表达的变化，从而分析TM4SF1在乳腺癌侵袭转移及EMT中的作用和可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料MDA-MB-231细胞购自上海中科院，于含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中培养备用。RPMI 1640培养基购自Gibco公司，胎牛血清购自Invitrogen公司，BCA试剂盒、Lipofectamine 3000购自上海碧云天生物技术有限公司，Transwell小室、Matrigel胶购自BD公司，TM4SF1多克隆抗体、Vimentin多克隆抗体和N-cadherin单克隆抗体购自Invitrogen公司，CCK-8试剂盒、E-cadherin、α-SMA、β-catenin、β-actin单克隆抗体购自Abcam公司，Snail、Slug多克隆抗体购自上海碧云天生物技术有限公司，ZEB、TWIST单克隆抗体购自Santa Cruz公司。

1.2 TM4SF1 siRNA的设计合成上海吉玛制药技术有限公司设计并合成靶向TM4SF1的siRNA。……