浅绿色气球菌噬菌体vB_AviM_AVP编码蛋白的表达纯化和功能分析

张 昊，袭恒豫，毕斓婷，赵日虹，冀亚路，王心舞，王子晶，顾敬敏，韩文瑜

(吉林大学 动物医学学院，吉林 长春 130062)

浅绿色气球菌 (Aeroeoccusviridans)是过氧化氢酶和氧化酶阴性、微需氧性和非运动性细菌，一种革兰阳性球菌[1]，广泛分布在环境中，由于其形态与链球菌很相似且常引起混合感染，故二者常混淆[2]。浅绿色气球菌虽然不是一种常见的病原菌，但却是潜在的机会病原菌，当机体免疫力下降或免疫功能不健全时，可以引起人类心内膜炎、败血症、菌血症以及关节炎等[3]；在兽医临床上，可引起猪的脑膜炎、肺炎、尿路感染和关节炎，牛临床和亚临床乳腺炎等。目前，治疗由浅绿色气球菌引起的感染仍以抗生素为主。但近期研究表明，新分离的浅绿色气球菌具有多重耐药性[4]，寻找新的治疗方法已经迫在眉睫。

噬菌体是一种能够特异性识别、感染和复制宿主细菌的细菌病毒[5-6]，由于其具有特定的杀菌能力，在20世纪20年代早期，噬菌体一直被认为是治疗性的药物[7]。然而，由于抗生素的广泛应用，这种治疗方法被搁浅[8]。近年来，由于多重耐药细菌在全球多地广泛出现，以噬菌体为治疗的方法得到了广泛关注，裂解酶的应用也得到了推广。本研究根据已经报道的浅绿色气球菌噬菌体vB_AviM_AVP的基因组[9]，对LysORF86、LysORF94、LysORF90和LysORF98进行原核表达与纯化，并对其活性进行初步研究。

1 材料与方法

1.1 菌株和质粒浅绿色气球菌AV-X1、N14-1，金黄色葡萄球菌R196、链球菌SS42、 Pet-15b由吉林大学动物医学学院微生物学与免疫学实验室保存；……