橙汁饮料中橙与橘成分双重实时荧光定量PCR检测技术

陈茵茵 李 娟 周 露 陈丹霞 韩志杰 丁清龙

(1. 广东省食品检验所，广东 广州 510000；2. 广东食品药品职业技术学院，广东 广州 510000)

随着人们生活水平的提高，果汁的需求量和消费量逐年增加，果汁掺假事件也频繁发生。据统计[1]，世界上约有60%～80%的果汁饮料存在不同程度的掺假现象。消费者很难通过外观、口感识别这些虚假标识、高价果汁掺杂低价果汁等的掺假果汁饮料。橙汁是国际上消费最广的果汁之一，其销量占全球果汁销量的50%以上[2]。但由于市面上橙类的价格要普遍高于橘类，存在部分不法商贩向橙汁中掺杂橘汁的行为。

目前中国对橙汁的鉴别标准有NY/T 290—1995 《绿色食品橙汁和浓缩橙汁》、GB/T 12143—2008《饮料通用分析方法》、GB/T 21731—2008 《橙汁及橙汁饮料》、GB/T 21730—2008《浓缩橙汁》，但均是通过感官和一些常规的理化指标来鉴别橙汁。为此，国内外学者研究了多种橙汁品质鉴别的方法，如：① 理化鉴别(测定糖[3-4]、有机酸[5]、氨基酸[6]等)；② 特定有机物鉴别(测定果胶、黄酮类物质[7]等)；③ 无机物鉴别(测定稳定同位素[8-9]等)；④ 利用先进的设备测定特定成分鉴别(如液相色谱[10-11]、电感耦合等离子体质谱[12]、电子舌[13]等)。但由于水果成分易受品种、产地、季节、环境等因素的影响，以及果汁中掺杂的其他化学成分，给化学成分鉴定造成了困难[14]。

随着分子生物技术的发展，常规PCR、实时荧光PCR、DNA条形码等分子生物学方法已经被应用到果汁真伪鉴别中，如：Ng等[15]利用分子生物学方法鉴定鲜榨和还原橙汁；梁宇斌等[16]建立了果汁中柑橘属植物成分的SYB Green实时荧光PCR检测方法；……