金丝桃素介导的光动力学疗法强化CIK对人乳腺癌细胞的抑制作用*

陈小梅，李慧玉，曲涛，高萌，徐向红

(1.甘肃省人民医院生物治疗中心，兰州 730000；2.华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞中心，武汉 430022)

乳腺癌是全球女性发病率占据第一位的恶性肿瘤[1]。近年来开发出更有效的治疗乳腺癌的疗法，如光动力疗法(photodynamic therapy，PDT)，它通过光敏剂引发的氧化应激对目标细胞造成损伤，对一些失去手术机会或难治性的肿瘤具有良好疗效[2-4]。金丝桃素(Hypericum perforatum L，Hyp)是由金丝桃属植物分离得到的一种天然光敏剂，易被肿瘤细胞摄取，具有强大的光敏特性、低暗毒性和高单线态氧量子产量[5]，可对多种实体肿瘤实施PDT[5-9]。金丝桃素介导的PDT可诱导肿瘤细胞免疫原性细胞死亡(immunogenic cell death，ICD)[10-12]，其特点是分泌或暴露损伤相关分子模式(damaged associated molecular patterns，DAMPs)[5-6]。DAMPs是正常情况下存在于细胞内的具有免疫激活作用的分子，在损伤或应激的刺激下，表达在细胞表面或从细胞中释放出来[13-16]。高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1，HMGB-1)、热休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)和钙网蛋白(calreticulin，CRT)是3个主要的DAMPs[5-6，12]。虽然PDT并不能有效治疗播散性肿瘤[2]，但可提高肿瘤细胞的免疫原性[17]，因此，有必要与其他治疗模式结合，如PDT联合过继免疫细胞治疗[18-19]，后者可治疗播散性肿瘤。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer，CIK)是抗肿瘤过继免疫细胞治疗的首选方案，是将外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子培养诱导获得的免疫效应细胞，在培养过程中获得非特异性、自然杀伤类的抗肿瘤细胞毒性[20]。本研究在体外模拟PDT作用，用金丝桃素作为光敏剂诱导MCF7细胞ICD；同时，用所得上清液与CIK细胞共培养以模拟体内DAMPs对免疫细胞的作用，探讨Hyp-PDT诱导MCF7细胞ICD对CIK抗肿瘤活性的影响，并初步探讨其可能的分子机制。……