血浆纤维蛋白原水平与非小细胞肺癌患者烟草暴露、临床疗效及其预后的相关性分析

胡旭钢 唐夏莉 刘细帮 陈清勇

肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，大多数患者确诊时已处于局部晚期或转移期［1］，临床十分需要一种能够评价肺癌患者治疗效果及预后的指标。肿瘤的发生、发展与凝血功能存在密切联系，癌症患者的血液多呈高凝状态，且与预后不良相关［2］。纤维蛋白原是最重要的凝血因子之一，能够反映机体的凝血状态，并可促进肿瘤细胞的增殖和转移［3］。多项研究表明，血浆纤维蛋白原水平可以预测多种肿瘤的不良预后［4-9］。烟草暴露中烟雾的有害成分可导致机体内皮细胞功能障碍，改变血栓止血机制，促进血栓形成与传播［10］。本研究旨在分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者的血浆纤维蛋白原水平与烟草暴露、临床疗效及其预后的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2016年1月至2019年4月中国人民解放军联勤保障部队第九〇三医院收治的NSCLC患者100例作为观察组。（1）纳入标准：①经细胞或组织病理学确诊为NSCLC；②处于肺癌晚期，包括ⅢB期、Ⅳ期；③接受化疗或分子靶向治疗，生存期>3个月。（2）排除标准：①临床资料不完整者；②患有脑梗死、心肌梗死、活动期感染性疾病、静脉血栓栓塞性疾病，以及有严重骨折或创伤者。其中，男56例，女44例；年龄52～87岁，平均（69.77±6.80）岁。另选取同期于本院进行健康体检者100例作为对照组，其中男73例、女27例，年龄51～83岁，平均（66.08±5.13）岁。本研究经医院医学伦理委员会批准，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 研究方法 从TCGA数据库（http：//portal.gdc.cancer.gov/）下载NSCLC组织和正常组织RNASeq3级数据及其相关的临床数据，排除未检测纤维蛋白原、随访时间<3个月、临床数据不完整的病例，最终检索到483例NSCLC组织和59例正常组织的纤维蛋白原表达数据，原始数据经log2标准化处理，根据纤维蛋白原表达量的均数分为纤维蛋白原高表达组和纤维蛋白原低表达组。

1.3 观察指标 （1）两组的血浆纤维蛋白原表达水平：观察组于抗肿瘤治疗前、治疗2个疗程后抽血检测，对照组于体检时抽血检测，采用凝固法测定血浆纤维蛋白原表达量。（2）NSCLC患者的纤维蛋白原beta（FGB）mRNA表达水平和年龄、烟草暴露史及暴露程度、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、预后等信息。

1.4 疗效判定 于患者完成一线化疗或分子靶向治疗2个疗程后进行疗效评估。根据RECIST1.1标准分为完全缓解、部分缓解、病情稳定和疾病进展等4个等级，其中完全缓解+部分缓解+病情稳定为治疗有效，病情进展定义为治疗无效。根据治疗是否有效分为有效组、无效组。

1.5 统计学方法 采用SPSS 22.0统计软件。计量资料以（±s）表示，采用t检验；计数资料以（n）表示，采用χ2检验；采用Kaplan-Meier法进行生存分析，生存率的组间比较采用log rank法。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组纤维蛋白原表达量比较 观察组的纤维蛋白原平均含量为（4.75±1.34）g/L，对照组的纤维蛋白原平均含量为（2.98±0.76）g/L，组间比较差异有统计学意义（P<0.001），见图1A。观察组中烟草暴露的NSCLC患者纤维蛋白原平均含量为（5.19±1.44）g/L，非烟草暴露患者为（4.30±1.06）g/L，差异有统计学意义（P<0.001），见图1B。分析TCGA数据库发现，肺腺癌的纤维蛋白原mRNA表达量为（6.63±5.00），显著高于正常上皮组织（2.94±2.04），差异有统计学意义（P<0.001），见图1C。烟草暴露肺腺癌患者的纤维蛋白原mRNA表达量为（7.16±4.93），显著高于非烟草暴露患者（5.48±4.95），差异有统计学意义（P<0.001），见图1D。

图1 各组纤维蛋白原表达量比较

2.2 TCGA数据库纤维蛋白原高/低表达组的临床病理特征比较 纤维蛋白原表达水平与烟草暴露（P=0.002）、淋巴结转移（P=0.031）、TNM分期（P=0.006）等因素密切相关，有烟草暴露史、肺门或对侧纵膈淋巴结转移以及III-IV期的患者更易出现纤维蛋白原高表达。见表1。

表1 TCGA数据库纤维蛋白原高/低表达组的临床病理特征比较（n=483）

2.3 治疗有效组与无效组的纤维蛋白原表达量比较 治疗有效组的纤维蛋白原平均含量为（4.41±1.32）g/L，无效组的纤维蛋白原平均含量为（4.98±1.30）g/L，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 治疗有效组与无效组的纤维蛋白原表达量比较

2.4 纤维蛋白原表达水平与患者预后的相关性分析 分析TCGA数据库发现，纤维蛋白原高表达患者的预后显著差于低表达组（P=0.0054），见图2A。亚组分析提示，纤维蛋白原的表达水平仅与烟草暴露患者的预后相关（P=0.0053），与非烟草暴露患者的预后无明显相关（P=0.7545），见图2B-2C。提示纤维蛋白原的表达水平与烟草暴露的NSCLC患者预后呈负相关。

图2 纤维蛋白原表达水平与患者预后的相关性分析

3 讨论

肺癌死亡率与烟草暴露存在相关，烟草暴露患者的纤维蛋白原水平明显高于非烟草暴露者，且随暴露程度的增加而增加，而戒烟者的纤维蛋白原水平与非烟草暴露者相一致［11］，与本研究的结果基本相似，观察组治疗有效患者的纤维蛋白原水平显著下降，而治疗无效组的纤维蛋白原水平无明显变化，表明纤维蛋白原水平可能与肺癌的临床治疗效果存在相关。

癌细胞能够通过内源性合成、分泌纤维蛋白原来控制微环境，故而纤维蛋白原在肿瘤生长和远处转移过程中起重要作用［12］。ZHENG等［13］研究发现，血小板和纤维蛋白原对癌细胞具有保护作用，癌细胞粘附于纤维蛋白原，在凝血酶存在的情况下，纤维蛋白原可在癌细胞周围形成致密层，从而阻断NK细胞对癌细胞的毒性作用。本研究发现，烟草暴露且纤维蛋白原水平高的患者其临床疗效和预后更差。既往研究表明，纤维蛋白原水平可以预测NSCLC、SCLC等多种恶性肿瘤的不良预后。LI等［14］研究发现，临床病理分期、淋巴结转移、M分期越晚，血浆纤维蛋白原水平越高。CHEN等［15］将纤维蛋白原和血清白蛋白（FA评分）结合作为一个评分系统，发现FA评分与烟草暴露、肿瘤分化程度、T期、淋巴结转移、TNM期等具有显著相关性，且烟草暴露与非烟草暴露者的FA评分与生存率相关，纤维蛋白原水平是晚期NSCLC患者独立的预后因素，与本研究结果基本一致。纤维蛋白原在NSCLC中的表达显著升高，烟草暴露可促进纤维蛋白原表达。治疗有效的患者治疗前的纤维蛋白原水平明显低于治疗无效者，且治疗后的纤维蛋白原水平与治疗前比较显著下降。纤维蛋白原水平与淋巴结转移、TNM分期呈正相关，与患者预后呈负相关。所以，纤维蛋白原可能在NSCLC中促进肿瘤浸润和转移起重要作用，可作为NSCLC患者临床疗效监测和预后预测的一种指标。