高效液相直接进样法测定葡萄酒中的苋菜红和胭脂红

◎ 王丽君

（常州市武进区疾病预防控制中心，江苏 常州 213164）

葡萄酒具有良好的保健作用，深受广大消费者喜爱。普通葡萄酒不含人工色素，红葡萄酒的顔色主要来源于葡萄皮中的一种“花青苷”。为增加葡萄酒的色泽，部分商家会添加一些色素来达到效果，尤其是一些市售葡萄酒中常添加胭脂红、苋菜红等合成色素，这些合成色素具有一定的毒性（包括毒性、致泻性和致癌性），其毒性来自合成色素中的砷、铅、铜、苯酚、苯胺、乙醚、氯化物和硫酸盐，对人体均可造成不同程度的危害[1]。目前对合成色素的检测方法有薄层色谱法、示波极谱法、多波长分光光度法和高效液相色谱法等[2-8]。本文在参考国家标准的基础上对高效液相法进行改进，以提高实验准确度。

1 材料和方法

1.1 仪器和试剂

高效液相色谱仪（日本岛津LC-10ATvp、SPD10Avp紫外检测器）；色谱柱（CTO-10Asvp），填充物（C18）；超声波振荡器。

甲醇（优级纯），0.02 mol·L-1的乙酸铵（分析纯）。色素标准品：胭脂红GBW（E）100004a（批号：14001）；苋菜红GBW（E）100002a（批号：14001）；除另有说明外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

1.2 方法

1.2.1 标准系列的配置

标准品浓度为0.5 mg·mL-1，加纯水将其稀释至5.0 ng·μL-1作为使用液，用10 μL微量进样针分别于样品中加入标准量为0 ng、12.5 ng、37.5 ng、50.0 ng和75.0 ng，测定，作标准曲线，Y轴截距即为样品中被测物质含量。

1.2.2 样品前处理

样品经0.45 μm滤膜过滤后直接进25 μL样液测定。

1.2.3 色谱条件

色谱柱（CTO-10Asvp），填充物（C18）；柱温40 ℃；流动相为 1.0 mL·min-1，A 为甲醇，B 为0.02 mol·L-1乙酸溶液；进样量为25 μL；检测过程中波长变换见表1，梯度洗脱设置见表2。

表1 波长程序表

表2 梯度洗脱程序……