黄芩苷调节PI3K/AKT通路对LPS诱导大鼠流产子宫巨噬细胞的影响

鲁小红

(咸宁市中心医院 产科，湖北 咸宁 437100)

流产发生率为1%～3%，给孕妇和家庭带来极大的痛苦。大量研究显示免疫细胞异常浸润与流产有关联[1]。巨噬细胞占植入部位所有蜕膜组织中白细胞的20%～25%[2]。巨噬细胞可能会极化为M1或者M2亚型，子宫蜕膜组织巨噬细胞在正常妊娠中会极化为M2亚型，而在妊娠并发症如子痫等中，子宫蜕膜组织巨噬细胞则极化为M1亚型，这会介导炎症反应并诱导滋养层细胞凋亡，进而诱发流产[3]。PI3K/AKT在调控巨噬细胞的活化和极化中具有关键作用，地塞米松通过激活PI3K/AKT通路抑制巨噬细胞向M1极化，从而抑制炎症反应缓解肺缺血/再灌注损伤[4]。黄芩苷为一种多酚类物质，是黄芩的主要活性单体。黄芩苷具有抗肿瘤、抗氧化应激、抗炎和调控免疫的作用。黄芩苷可通过促进巨噬细胞极化为M2表型改善实验性炎症性肠病[5],抑制滋养层细胞凋亡从而缓解子痫[6]，并且具有调控PI3K/AKT通路的作用[7]，但是其在流产中的作用和机制仍不清楚。本研究主要分析黄芩苷调节PI3K/AKT通路对流产动物模型巨噬细胞的影响及作用机制。

1 材料与方法

1.1 主要实验材料

SD大鼠(SPF级，雌性+雄性，210～240 g，北京维通利华动物公司)。脂多糖(lipopolysaccharid，LPS)和黄芩苷(Sigma公司，美国)，PI3K/AKT通路抑制剂LY294002(Selleck公司，美国)，ELISA试剂盒和TUNEL染色试剂盒(碧云天公司)，酶标仪(Model 680，Bio-Rad公司，美国)，免疫磁珠(Invitrogen公司，美国)，流式细胞仪以及巨噬细胞表型抗体试剂(Becton Dickinson公司，美国)，TRIzol(Sigma公司，美国)，PrimeScript-RT和SYBR Premix Ex Taq试剂盒(TaKaRa公司，日本)，RIPA裂解缓冲液(Beyotime公司)，BCA试剂盒(武汉博斯特生物技术有限公司)，抗体购自美国Abcam公司，PVDF膜(Bio-Rad公司，美国)。……