芍药苷-6-O′-苯磺酸酯对摄取性转运蛋白表达的影响

孙 伟，王 斌，汤 浩，王 勇，Asenso James，高锦张，肖 宁，王 春，魏 伟

转运蛋白是负责药物及其代谢产物跨细胞膜转运的膜蛋白，它们通过影响药物的吸收、分布、代谢和排泄，进而通过控制作用部位的药物浓度来影响药物的药动学和药效学。摄取性转运蛋白充当细胞的“代谢门”，主要利用电化学势差或活性转运蛋白产生的离子梯度将其底物转运通过生物膜参与药物的吸收。摄取性转运蛋白主要包括：有机阴离子转运蛋白(organic anion transporter，OAT)、有机阳离子转运蛋白(organic cation transporter，OCT)、葡萄糖转运蛋白(glucose transporter, GLUT)、单羧酸盐转运蛋白(monocarboxylate transporter，MCT)和寡肽转运蛋白(oligopeptide transporter，PEPT)。芍药苷-6-O′-苯磺酸酯(paeoniflorin-6′-O-benzenesulfonate，CP-25)是通过修饰芍药苷(paeoniflorin，Pae)得到的活性单体，具有良好的抗炎免疫调节活性。前期研究显示CP-25能通过下调P-糖蛋白表达，抑制其转运活性。然而CP-25对摄取性转运蛋白的调控作用尚不清楚，因此进行了CP-25对摄取性转运蛋白调控作用的初步研究，为进一步考察CP-25药物相互作用提供一定实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

SD大鼠，雄性，SPF 级，体质量(180±20)g，购自安徽医科大学实验动物中心；CP-25(白色粉末、纯度>98%)获自安徽医科大学临床药理研究所药物化学实验室；胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)和DMEM培养基购自加拿大Wisent公司；青霉素和链霉素溶液、磷酸盐缓冲溶液(PBS)购自北京Solarbio公司；CD68和vimentin流式抗体分别购自美国Biosciences和Cell Signaling Technology公司；BCA蛋白含量检测试剂盒购自上海碧云天生物科技有限公司；OAT1/3、OCT1/3、MCT1/2、GLUT1/4和PEPT1抗体购自美国Affinity Biosciences公司；CCK-8、qPCR试剂盒购自南京诺唯赞生物科技股份有限公司；qRT-PCR引物购自上海生工生物股份有限公司。

1.2 仪器

Olympus显微成像系统(日本Olympus公司)；B……