CP-25调控GRK2/p38MAPK信号在血管紧张素Ⅱ诱导小鼠系膜细胞增殖中的作用

王 祥，袁晓阳，徐 靓，江 丽，王盛付，黄李娜，魏 伟，严尚学

系膜细胞(mesangial cells, MCs)是肾小球主要的三大实质细胞之一，对于维持肾小球形态及功能稳态发挥着不可替代的作用。血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)是肾素-血管紧张素系统的主要活性物质，高水平的Ang Ⅱ可以促进肾小球系膜扩张、肾小球肥大及足细胞丢失，诱发高血压、蛋白尿以及肾小球滤过率减少，其体内水平与糖尿病型肾病、狼疮性肾炎等疾病的肾脏损伤呈正相关。

芍药苷-6-氧-苯磺酸酯(paeoniflorin-6′-O-benzene sulfonate,代号：CP-25)是一种来源于芍药苷(paeoniflorin, Pae)结构修饰的新型活性单体。课题组前期研究表明，CP-25可调节多种免疫细胞功能，对小鼠胶原性关节炎、大鼠佐剂性关节炎以及小鼠干燥综合征均具有治疗作用。该研究以小鼠肾小球系膜细胞系SV40 MES 13为对象，研究CP-25对AngⅡ诱导MCs增殖的作用及其对GRK2/p38信号通路的影响，为CP-25治疗与MCs相关的肾脏疾病提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

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细胞株 小鼠肾小球系膜细胞系SV40 MES 13(以下简称MCs)购于中国武汉普诺赛生命科技有限公司。

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试剂与仪器 Ang Ⅱ为美国Sigma公司产品；p38MAPKXP®Rabbit mAb、p-p38 MAPK(Thr180/Tyr182)XP®Rabbit mAb、G蛋白偶联受体激酶-2(G protein coupled receptor kinase-2, GRK2)抗体为美国Cell Signaling Technology公司产品；CP-25由安徽医科大学临床药理研究所实验室合成，纯度大于98.8%。ImageStreamX MarkⅡ成像流式细胞仪为德国密理博公司产品；高内涵细胞成像系统为美国赛默飞公司产品；共聚焦显微镜(SP8)为德国徕卡公司产品；488通道荧光二抗(Rabbit)、594通道荧光二抗(Mouse)为Elab science公司产品。

1.2 方法

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细胞培养 MCs置于5% CO、37 ℃恒温培养箱中培养，并用含有10%胎牛血清和1%青-链霉素的DMEM高糖培养基、DMEM-F12培养基进行换液、传代。……