基于低糖低血清营养胁迫构建内质网应激和自噬模型及其评价

化 维，朱嫚嫚，刘加涛

肿瘤细胞增殖异常活跃，常处于缺血、低氧等营养缺乏的应激状态。肿瘤细胞可通过内质网应激和自噬过程应对恶劣的微环境，来维持自身存活。多项研究表明，内质网应激和自噬共同参与多种肿瘤的发生发展、侵袭转移、凋亡抵抗等生物学过程。目前，大部分研究者都采用化学药物体外构建内质网应激或自噬模型，如通过衣霉素阻止蛋白质合成过程中N-糖基化的形成构建内质网应激模型，通过雷帕霉素特异性的抑制mTOR通路激活自噬。这些方法诱导内质网应激或自噬虽然操作简单，但也存在诸多的问题。此外，为了克服药物诱导模型的缺陷，部分研究者分别采用无血清基础培养基饥饿或者Hanks液等平衡液使肿瘤细胞处于完全没有生长因子、葡萄糖等极端的状态诱导内质网应激或自噬模型。为尽可能规避化学药物和极端营养胁迫诱导应激模型造成的实验误差，该研究采用含1%胎牛血清的低糖DMEM培养基体外构建营养胁迫模型，检测该模型条件下肝癌细胞内质网应激和自噬水平，以期为体外研究内质网应激和自噬在肿瘤发生发展等过程中的作用和机制提供模型。

1 材料与方法

1.1 细胞

1.2 主要试剂