基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱快速检测产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的研究

王 刚，宋国滨，黄 颖，徐元宏

肺炎克雷伯菌是一种临床常见的机会性致病菌，能够引起全身各个系统如尿道、呼吸道、皮肤和软组织、胃肠、血液和神经系统等的严重感染。在肠杆菌科中的检出率仅次于大肠埃希菌。其中产超广谱β内酰胺酶的肺炎克雷伯菌检出率较高，容易造成细菌对多种抗生素产生耐药性，给临床抗生素的治疗带来挑战。因此尽早为临床医师提供细菌耐药性报告对抗生素的选择运用以及对耐药菌株院内感染的管理具有重要意义。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)近年来成功运用于临床微生物的鉴定，具有准确、快速、成本低、操作简单、高通量等优点。此外，越来越多的研究表明MALDI-TOF MS在检测细菌耐药机制方面具有广泛的应用前景。该研究主要是通过MALDI-TOF MS水解头孢菌素试验来快速鉴定产超广谱β内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases，ESBLs)肺炎克雷伯菌，并评价该试验的敏感性与特异性。

1 材料与方法

1.1 菌株来源与鉴定

收集来自安徽医科大学第一附属医院2018年9月—2019年4月的肺炎克雷伯菌株的药敏结果信息，筛选并随机收集24株敏感(除了对氨苄西林天然耐药外，对其他β内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、喹诺酮类抗生素均敏感)和54株产ESBLs的肺炎克雷伯菌作为实验菌株，采用MALDI-TOF MS进行菌株的再鉴定，大肠埃希菌ATCC8739为质谱鉴定质控菌株。

1.2 细菌药物敏感性试验

采用纸片扩散法和Vitek2-Compact自动化微量肉汤稀释法(法国梅里埃生物公司)进行药敏试验， 参照美国临床实验室标准(CLSI)对结果进行耐药(R)、中介(I)、敏感(S)的解释。……