固本化瘀法对2型糖尿病大鼠足细胞损伤及信号通路的影响

陆 军，李 红

(1.山西省中西医结合医院药剂科，太原 030013；2.山西省中西医结合医院肾病二科，太原 030013)

糖尿病肾病是常见的糖尿病微血管并发症，也是终末期肾脏病常见的病因之一[1]，发病机制复杂且缺乏有效的防治手段。足细胞损伤是贯穿糖尿病肾病的病理环节，高糖及糖基化终末产物刺激、炎症及氧化应激反应激活等可造成肾病蛋白(nephrin)、足细胞蛋白(podocin)和CD2相关蛋白(CD2AP)等足细胞标志分子表达下调，进而造成足细胞损伤、肾小球滤过膜通透性增加并产生蛋白尿[2-4]。中医认为糖尿病肾病属于“消渴”、“尿浊”、“虚劳”范畴，病机总属本虚标实，本虚指脾肾亏虚，标实指痰湿血瘀，根据病机主张给予固本化瘀方进行治疗。相关细胞实验发现，固本化瘀法含药血清对高糖引起的足细胞损伤具有保护作用[5]；另有多囊卵巢综合征及胰岛素抵抗相关的研究证实，固本化瘀法能够促进大鼠体内磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)通路激活[6]。基于此，本研究将以2型糖尿病大鼠作为实验对象，观察固本化瘀法对大鼠足细胞损伤及PI3K/Akt通路的影响，旨在探究固本化瘀法在糖尿病肾病防治中的作用及机制。

1 仪器与材料

1.1仪器 全自动生化分析仪(GE公司)；正置显微镜(Nikon公司)；荧光定量PCR仪(Bio-rad公司)；凝胶成像系统(上海天能公司)。

1.2试药 HE染色试剂盒(上海碧云天公司);RNA提取、cDNA第一链合成、荧光定量PCR试剂盒，均购自北京天根生化公司;p-PI3K和p-Akt一抗，均购自Abcam公司。固本化瘀方的药材包括鹿角胶、龟甲胶、枸杞、党参、淫羊 董、巴戟天、川断、当归、丹参、莪术、三棱、苍术、香附、胆 南星、茯苓、陈皮和半夏，由本院药剂科采购，按每毫升生药含量25、15、5 g制备浓煎药汁，待使用时进行稀释。……