血浆低密度脂蛋白与老年冠心病病情严重程度的相关性分析

赵 洁，吕艳萍，张皓然，单伟超，张 英，丁振江，李淑英

(1.承德医学院附属医院，河北 承 德 067000 2.河北省承德县疾病预防控制中心，河北 承德县 067400)

冠状动脉粥样硬化性心脏病简称冠心病(coronary heart disease，CHD)，是冠状动脉血管发生病变造成心肌损伤进而引发的心脏疾病，是导致中老年人群死亡率升高的主要原因之一[1]。研究报道，SCHD相比于年轻CHD患者在发病后出现并发症及不良预后的风险明显升高[2]。而在SCHD进展中存在多种危险因素，其中低密度脂蛋白(low-density lipoprotein，LDL)升高等血脂异常是影响CHD发生发展的最重要的危险因素之一，当体内LDL水平降至标准以下时，机体发生心血管事件的风险仍高达50%[3]。LDL不同亚型诱导动脉粥样硬化发生发展中作用不同。有研究发现，小而密LDL作为LDL中颗粒较小且密度较大的组分，其水平升高更易导致冠状动脉粥样硬化发生[4]。但目前关于LDL不同亚型与CHD进展及患者预后的关系研究较少，且临床尚缺乏对CHD患者病情及预后针对性的评估手段。因此本研究旨在分析LDL不同亚型在CHD患者血浆中表达水平变化与病情进展及预后关系，为临床诊治CHD提供帮助。

1 资料与方法

1.1一般资料：选取2018年12月至2019年10月在本院心内科住院治疗的SCHD患者192例作为研究对象(观察组)，其中男性患者110例、女性患者82例，患者年龄(65～82)岁，平均(73.42±5.35)岁。纳入标准：①经冠脉造影诊断为CHD(冠状动脉主干或主要分支管腔狭窄≥50%)[5]；②年龄≥65岁；③血脂指标等临床资料完整。排除标准：①肝功能异常患者(谷丙转氨酶和谷草转氨酶升高超过正常参考值5倍及以上)；②心力衰竭患者(心功能分级Ⅲ～Ⅳ级)；③恶性肿瘤患者；④慢性肾脏病3期及以上。根据病变支数将入组患者分为单支病变组72例，双支病变组69例，三支病变组51例；根据Gensini评分将入组患者分为低分组(GS评分<41分)70例，中分组(41分≤GS<64分)65例，高分组(GS评分≥64分)57例。另选取经冠状动脉检查正常者189例作为对照组，其中男性患者106例、女性患者83例，患者年龄(65～82)岁，平均(73.69±5.82)岁。收集入组受试者年龄、性别、身体质量指数(Body mass index，BMI)、血肌酐(creatinine，Cr)、吸烟史、饮酒史等一般资料。本研究经本院伦理委员会批准同意。如表1所示，观察组与对照组年龄、BMI、空腹血糖、Cr及性别比例、吸烟史比例、饮酒史比例比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 观察组与对照组一般资料比较

1.2方 法

1.2.1样本采集:分别收集入组CHD患者入院时及健康体检者体检时外周血5mL，加入EDTA抗凝后离心，取血浆保存于-80℃冰箱备用。通过采用线性聚丙烯酰胺凝胶对LDL各亚型进行电泳分离，通过高精度扫描完成LDL亚型定量分析。取0.2mL离心管，标记样本编号，加入对应血清样本50μL和染色液10μL，旋涡震荡30s，将染色液及血浆充分混匀，将混合液置于35℃水浴中温浴15min；然后将凝胶柱空口端朝上逐一插入到电泳槽中，分别在电泳槽下方和上方加入合适电泳缓冲液，而后用移液枪吸取电泳缓冲液加入到凝胶柱中以排出气泡；温浴结束后涡旋震荡30s，移取30uL混合液加入凝胶柱中，盖好电泳槽的盖子，打开电泳仪开关，设置电流大小和电泳时间，然后启动电泳；等待凝胶柱最下端的蓝色泳带电泳至凝胶柱底部约2cm时即可停止电泳；将电泳结果判读。

1.2.2血脂指标水平检测:采用全自动生化仪检测受试者血脂水平，包括LDL胆固醇(LDL cholesterol，LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、甘油三酯(triglyceride，TG)、总胆固醇(total cholesterol，TC)。采用线性聚丙烯酰胺凝胶对LDL各亚型进行电泳分离，通过高精度扫描完成LDL亚型定量分析。大而轻LDL为LDL1+LDL2，小而密LDL(Small dense low-density lipoprotein，sdLDL)为LDL3～LDL7。

1.3随访:入组患者经治疗后分别于30d、3个月、6个月及1年时进行随访，随访截止时间为2020年10月。根据患者随访1年内主要心血管不良事件(major adverse cardiac events，MACE)发生情况分为预后良好组154例和预后不良组38例[6]。

2 结 果

2.1观察组与对照组血脂指标及Gensini评分比较:观察组血浆TG、TC、LDL-C水平及Gensini评分明显高于对照组，血浆HDL-C明显低于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 观察组与对照组血脂指标及Gensini评分比较

2.2观察组与对照组血浆LDL各亚型水平比较：观察组血浆LDL3、LDL4、LDL5、LDL6、LDL7、sdLDL水平明显高于对照组(P<0.05)，而LDL1、LDL2与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 观察组与对照组血浆LDL各亚型水平比较

2.3单支病变、双支病变与三支病变组血浆LDL各亚型水平比较：单支病变、双支病变、三支病变组血浆LDL1、LDL2、LDL4、LDL5、LDL6、LDL7水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。单支病变、双支病变、三支病变组血浆LDL3、sdLDL水平依次显著升高(P<0.05)。见表4。

表4 单支病变双支病变与三支病变组各亚型水平比较

2.4Gensini评分低分组、中分组及高分组血浆LDL各亚型水平比较：Gensini评分低分组、中分组及高分组血浆LDL1、LDL2、LDL4、LDL5、LDL6、LDL7水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。Gensini评分高分组血浆LDL3、sdLDL水平明显高于低分组和中分组，Gensini评分中分组血浆LDL3、sdLDL水平明显高于低分组(P<0.05)。见表5。

表5 Gensini评分低分组中分组及高分组LDL各亚型水平比较

2.5SCHD患者血浆LDL3、sdLDL水平与Gensini评分相关性：SCHD患者血浆LDL3、sdLDL水平均与Gensini评分呈正相关(r/P=0.536/0.000，0.521/0.000)。见图1。

图1 血浆LDL3、sdLDL水平与Gensini评分相关性

2.6预后良好组与预后不良组LDL各亚型水平比较：预后良好组与预后不良组血浆LDL1、LDL2、LDL4、LDL5、LDL6、LDL7水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。预后不良组血浆LDL3、sdLDL水平明显高于预后良好组(P<0.05)。见表6。

表6 预后良好组与预后不良组LDL各亚型水平比较

2.7影响因素分析

2.7.1影响SCHD患者严重程度的因素分析：以Gensini评分分组情况为因变量，其中低分组和中分组赋值为0，高分组赋值为1；以SCHD患者一般资料、血脂指标以及血浆LDL各亚型水平为自变量，采用二元logistic回归分析，结果显示，LDL3、sdLDL以及Cr是影响SCHD患者严重程度的独立危险因素，详见表7。

表7 影响老年CHD患者严重程度的因素分析

2.7.2影响SCHD患者预后的因素分析：以SCHD患者预后情况为因变量，其中预后良好赋值为0，预后不良赋值为1；以SCHD患者一般资料、血脂指标以及血浆LDL各亚型水平为自变量，采用二元logistic回归分析，结果显示，年龄、sdLDL和Gensini评分是影响SCHD患者预后的独立危险因素(P<0.05)，详见表8。

表8 影响SCHD患者预后的因素分析

3 讨 论

随着我国社会总体生活水平的提高以及老龄化进程的加速，CHD患病人数日趋增多，且有早发、多发倾向，提高CHD患者的生存率和改善预后是临床治疗首要任务[7]。研究表明，年龄增大与血脂异常发生率升高有关，而血脂异常更易引发CHD[8]。因此探究SCHD患者血脂指标总体水平及LDL各亚型水平对探明CHD患者病情进展及预后不良发生机制均有重要意义。

血脂指标主要包括甘油三酯、胆固醇及脂蛋白等，其水平异常升高时容易引发高血脂症及CHD等心血管疾病[9]。研究发现，CHD患者血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均出现异常变化[10]。本研究结果显示，与健康者相比，CHD患者血浆中TC、TG、LDL-C表达水平均明显升高，而HDL-C水平明显降低，与高颖等[10]研究结果一致，提示血脂指标异常与CHD发生密切相关。机体血脂水平异常升高时血脂产物聚集在动脉壁的平滑肌细胞及弹性纤维之间，刺激纤维组织增生和粥样斑块形成，并导致微血管功能发生障碍，最终引发CHD[11]。

LDL由一组异质性胆固醇颗粒组成，不同大小的颗粒间存在相互作用，构成LDL1～7等不同亚型，其中LDL3～7为sdLDL[12]。研究报道，LDL-C异质性与CHD患者治疗后MACE发生风险增加相关[13]。有研究表明，血浆LDL3、sdLDL水平升高与Gensini评分升高、病变支数增加有明显相关性[15]。本研究中SCHD患者血浆TG、TC、LDL-C水平及Gensini评分明显高于对照组，血浆HDL-C明显低于健康人群，而SCHD患者单支病变、双支病变、三支病变CHD患者血浆LDL3、sdLDL水平依次显著升高，且随Gensini评分升高血浆LDL3、sdLDL水平明显升高，与刘广彬等[14]研究结果相似，表明LDL各亚型中LDL3亚型可能在CHD发生时浓度升高最明显，且与患者病情进展密切相关。血浆sdLDL整体及LDL3水平升高可能通过反映冠状动脉病变程度增加，预示CHD患者病情加重。由于LDL亚型的颗粒较小，较易通过动脉膜诱导炎症反应增加，进而促进血管内皮细胞增殖。此外，LDL与动脉壁蛋白多糖结合产物也可能促进纤维组织产生和斑块形成。上述过程均可能促进动脉粥样硬化进展。本研究结果中SCHD患者血浆LDL3、sdLDL水平均与Gensini评分呈正相关，也进一步提示血浆LDL3、sdLDL水平升高与CHD进展密切相关。但是有研究结果显示，不同Gensini评分的CHD患者血浆LDL4水平比较，差异也有统计学意义，但本研究结果中LDL4水平差异无统计学意义，可能原因为研究纳入样本数量和地区的差异，因此该结果尚待进一步探究。

本研究还发现，预后不良组血浆LDL3、sdLDL水平明显高于预后良好组，提示血浆LDL3、sdLDL水平升高可能与CHD患者发生MACE等不良预后有一定关系，进一步通过logistic回归分析显示，LDL3、sdLDL以及Cr是影响SCHD患者严重程度的独立危险因素；年龄、sdLDL和Gensini评分是影响SCHD患者预后的独立危险因素，此结果说明LDL3、sdLDL水平上调可能参与CHD患者病情加重，进而影响预后，通过密切关注血浆LDL3、sdLDL水平变化，及时评估CHD患者病情。同时上述结果也提示年龄越大，Gensini评分越高对患者预后影响越大，因此在临床诊治中应密切关注此类病人，及时给予最佳的诊疗方案，也可考虑将血浆LDL3、sdLDL水平变化作为辅助评估指标，以改善患者预后情况。

综上所述，SCHD患者血浆LDL各亚型中LDL3、sdLDL水平明显升高，与病变支数增加、Gensini评分升高及预后MACE发生相关。但由于本研究纳入样本所属地区单一且样本量相对较小，LDL各亚型变化水平及临床价值还需进一步验证。