YAP、TAZ在人喉癌组织中的表达及其临床意义

朱丽明 那学武 李海洲

喉癌是一种常见的头颈部恶性肿瘤，好发于40岁以上男性，以声门上型和声门型多见，又以鳞癌为常见组织学类型[1]。目前喉癌的主要治疗手段仍为手术切除，早期喉癌术后患者预后通常较好，5年生存率远高于晚期患者[2]，且早期喉癌可行喉显微激光手术切除，与传统开放手术相比具有创伤小、恢复快、并发症少等优点，患者无病生存率显著上升[3]。而晚期患者通常只能行开放手术或无法手术，患者生存质量明显下降。若能在喉癌早期对其进行诊断和治疗，可以大大提升患者生存质量。近年来研究发现Hippo通路在肿瘤疾病的发生发展中扮演重要角色。Hippo通路最早发现于果蝇体内，具有高度保守的特点，在调控细胞增殖、促进组织再生等生命活动中发挥作用[4]。YAP蛋白是Hippo通路的重要效应器，和其旁系同源TAZ蛋白共同构成Hippo通路的关键转录共刺激分子[5]。YAP、TAZ在肿瘤中过表达促进肿瘤生长、浸润，被认为是多种肿瘤的促癌基因[6]。研究表明多种肿瘤疾病中存在Hippo通路失活及YAP、TAZ高表达[7]，但其在喉癌中作用尚不明确。本研究旨在探讨喉癌中YAP、TAZ的表达水平及临床意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集2012年3月至2015年3月于我院耳鼻咽喉头颈外科就诊的77例喉癌患者手术切除的肿瘤组织和正常癌旁组织。患者中男性66例、女性11例；年龄33岁～76岁，其中≥60岁43例，<60岁34例；声门型57例，声门上型20例；高分化13例，中分化38例，低分化26例；肿瘤直径<2 cm者21例，≥2 cm者56例；有淋巴结转移者24例，无淋巴结转移者53例；根据国际抗癌联合会UICCTNM分期标准(2002)进行分期，Ⅰ、Ⅱ期41例，Ⅲ、Ⅳ期36例。所有肿瘤组织经病理科验证均为鳞癌，患者均为首次发病，未接受化疗、放疗、靶向治疗和生物免疫治疗。本研究所有研究对象均签署对研究的知情同意书并经医院医学伦理委员会审核通过。

1.2 免疫组化法检测组织中蛋白表达

组织蜡块脱蜡水化，修复抗原，磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗3次后滴加H2O2浸泡15 min，PBS冲洗后滴加山羊血清封闭，滴加一抗(YAP、TAZ一抗均购自美国BD生物公司，1∶200稀释)，置于湿盒内4 ℃孵育过夜。……