内源性miR103A通过抑制RGS2的表达从而影响乳腺癌的转移

陈欣欣，章乐虹

miRNAs在肿瘤的发生和发展过程中发挥了非 常重要的作用［1-3］。到目前为止大部分的研究证实了miRNA主要通过作用于目的mRNA的3′⁃UTR从而抑制其转录［2］，在近些年也有研究证实了miRNA能够作用于mRNA的CDS区域或者5′UTR区域［4］，miRNA作用于目的基因启动子的报道较少。miR103A⁃3p（以下称miR103A）参与调节多个细胞过程，如细胞分裂、细胞代谢和应激、血管生成等［5，6］。然而对miRNA的研究越深入，我们发现各种信号通路可以通过不同的microRNA调控肿瘤的发生发展，相同的microRNA也可以作用不同的基因或者信号通路影响肿瘤的发生发展，因此多个调控通路及调控网络的研究已成为microRNA在肿瘤研究中的主导方向。本研究旨在探索miR103A通过下调抑癌基因RGS2的表达进而影响乳腺癌的进展，以及miR103A与乳腺癌预后的关系。

RGS2（regulator of G⁃protein signaling 2）属于RGS蛋白家族，是GPCR的效应因子，主要对细胞生长起到负向调控作用［7，8］，RGS2功能失调往往导致肿瘤的发生发展，以下研究探讨了RGS2作为内源性miR103A靶基因，其功能受到抑制可能导致乳腺癌的进展和转移。

1 材料和方法

1.1 荧光双报告系统检测miR103A对RGS2启动子活性的影响

设置质粒组（RGS2启动子片段的⁃Luc/Rluc的重组质粒），质粒+miRNA NC组以及质粒+miRNA mimics（带有Luc/Rluc标记的报告基因和miR103A mimics）组，共转染293 T细胞。按照每孔50 ng质粒，同时每孔20μL无血清培养基计算需用量，标记为A。配置miRNA NC/mimics的终浓度为20 nmol/L，同时每孔20μL无血清培养基计算需用量，分别标记为B、C。

1.2 标本及试剂

选取2019年1月至10月广州医科大学附属第二医院，收集的乳腺癌组织及癌旁组织样本27对，年龄34~68岁，平均（49.6±1.56）岁，收集新鲜癌组织样本69例，年龄28~74（51.33±1.25）。……