缪小兵,何 松,陈卓琳,张邢松,徐小红,周 颖
弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma, DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤中最常见的亚型,也是一组异质性疾病,在组织病理学、分子学特征及临床表现方面差异较大[1-3]。SAMD9L位于人类基因组染色体7q21,与其旁系同源SAMD9相邻。现已证实,SAMD9L在调控细胞增殖、肿瘤表型、炎症反应等过程中发挥重要作用[4]。但SAMD9L在淋巴瘤中的表达和作用尚未见报道。本实验采用免疫组化EnVision法检测SAMD9L在DLBCL中的表达及意义,为进一步探索DLBCL的预后提供实验依据。
1.1 材料收集2013~2018年江苏省南通市肿瘤医院确诊的135例初治非特指型DLBCL患者。135例患者中男性60例,女性75例。年龄11~93岁,中位年龄66岁。结外累及≥2处37例,0~1处98例。Ann Arbor分期:Ⅰ+Ⅱ期49例,Ⅲ+Ⅳ期86例。按Hans分型,生发中心B细胞样(germinal center B-cell-like, GCB)29例,非生发中心B细胞样(non germinal center B-cell-like, non-GCB)106例。有B症状17例,无B症状118例。美国东部肿瘤协作组(Eastern Cooperative Oncology Group, ECOG)体能状态(performances status, PS)评分﹤2分18例,≥2分117例。国际预后指数(international prognostic index, IPI)评分≤2分38例,>2分97例。乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)正常30例,升高105例。白蛋白(albumin, ALB)正常105例,降低30例。无骨髓浸润88例,有骨髓浸润9例,另有38例无法评估。完全缓解(complete response, CR)或部分缓解(partial response, PR)75例,疾病稳定(stable disease, SD)或进展(progressive disease, PD)35例,另有25例无法评估。
1.2 免疫组化石蜡切片常规脱蜡后,使用EDTA进行抗原修复,冷却至室温后PBS洗涤,一抗4 ℃孵育过夜,PBS冲洗3次,滴加二抗室温孵育1 h,DAB显色,苏木精复染,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。所用一抗为兔抗人SAMD9L多克隆抗体,购自Proteintech公司,稀释比1 ∶100。二抗为Dako REAL EnVision,购自Dako公司。以PBS代替一抗作为阴性对照。
1.3 结果判定SAMD9L定位于细胞质/细胞核,根据阳性细胞着色强度和所占百分比进行评分。按着色强度评分:未着色为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分;按……