干扰lncRNA HOXA-AS3负调控miR-340-5p对小细胞肺癌细胞DMS114/DDP顺铂耐药性的影响

张 昆孙 洋翟所锴杨 光

(淄博市第一医院呼吸内科,山东 淄博 255200)

肺癌是临床常见的一种恶性肿瘤,我国肺癌发病率逐年上升,其主要类型包括小细胞肺癌与非小细胞肺癌,其中小细胞肺癌具有高度侵袭性及转移能力,进而导致治疗效果降低,针对小细胞肺癌晚期患者,临床主要采用化疗方式进行治疗,但化疗耐药性是降低治疗效果的重要原因,然而目前关于化疗耐药性发生机制尚未阐明[1-4]。长链非编码RNA HOXA-AS3(lncRNA HOXA-AS3)在非小细胞肺癌细胞中表达水平升高,并可调控HOXA3表达从而增强细胞顺铂耐药性[5]。生物信息学分析显示微小RNA-340-5p(miR-340-5p)在结肠癌细胞中表达水平降低,lncRNA LINC00662通过竞争性结合miR-340-5p而降低其表达水平从而促进结肠癌细胞增殖及转移[6]。因此,本研究采用顺铂浓度递增法建立小细胞肺癌顺铂耐药细胞株,探究HOXAAS3对DMS114/DDP细胞增殖、凋亡的影响及其对miR-340-5p的调控作用。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 细胞

人小细胞肺癌细胞DMS114购自南京科佰生物科技有限公司。

1.1.2 组织材料

肺癌组织及癌旁组织:选取2017年1月至2019年1月本院收治的30例肺癌患者为研究对象,所有患者均经手术、穿刺活检或支气管镜活检证实为小细胞肺癌,术前均未接受放化疗,其中男16例,女14例,年龄40～70岁,平均年龄(55.63±6.35)岁,术中切除肺癌组织及癌旁组织,置于-80℃超低温冰箱内保存。本研究经本院伦理委员会批准(院字(2016)12号),所有患者知情且签署同意书。

1.2 主要试剂与仪器

顺铂购自上海华联制药公司;DMEM培养基与胎牛血清购自美国Gibco公司……