LncRNA PCAT1靶向miR-329-3p调控舌鳞状细胞癌细胞增殖、迁移侵袭和谷氨酰胺分解的机制研究

刘 玮宗佩君许婷婷*

(1.潍坊护理职业学院病理教研室,山东 潍坊 262500;2.山东省潍坊市益都中心医院病理科,山东 潍坊 262500)

舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)是口腔最常见的恶性肿瘤之一,占口腔肿瘤的90%以上。它对人类的生命和健康构成了严重的威胁。尽管在治疗方面取得了许多进展,包括根治性手术、放疗和新辅助化疗,但TSCC仍与不良预后相关。由于局部侵袭性强、淋巴结转移率高,患者5年生存率仅为50%左右[1]。因此,探讨肿瘤的作用机制、寻找更有效的治疗策略非常重要。长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)是一种近期发现的在肿瘤中具有重要调控作用因子[2]。前列腺癌相关转录物1(prostate cancer-associated transcript 1,PCAT1)是其中之一,这是近2年新发现的一种LncRNA。顾名思义,PCAT1是首先在前列腺癌中发现的,其在喉癌、子宫内膜癌中均发挥促进癌症恶化作用[3-5]。但PCAT1在舌鳞状细胞癌中的表达及其可能作用机制尚未可知,本研究旨在探究PCAT1在TSCC中的功能机制。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 细胞

人正常口腔角质细胞NHOK、人舌鳞状细胞癌细胞UM1、CAL-27、SCC25均购自美国模式培养物保存所。

1.1.2 材料

35例TSCC组织及匹配的癌旁组织来自本医院2018年2月～2020年6月期间接受TSCC手术切除的患者。患者或其家属均签署知情同意书。

1.2 主要试剂与仪器

人谷氨酸盐(glutamate)ELISA检测试剂盒购自上海卡努生物科技有限公司;α-酮戊二酸(αketoglutarate,α-KG)检测试剂盒购自Abcam;细胞计数试剂盒(cell counting kit,CCK-8)购自日本同仁化学研究中心;实时荧光定量反转录聚合酶链反应试剂盒(Real-time fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)购自日本TaKaRa;双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自上海碧云天生物研究所;实验中的质粒、DNA和引物均由深圳默赛尔生物医学发展公司设计合成。……