普鲁卡因通过ERK/MAPK/FAK通路抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭

秦文英陈丽华高方方

(河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)麻醉与围术期医学科,河南 洛阳 471002)

骨肉瘤是常见的原发性骨恶性肿瘤,好发于儿童和青少年,易引起严重并发症,导致残疾,严重威胁人类的生命健康[1]。骨肉瘤发病率较高,仅次于脑肿瘤和淋巴瘤,具有恶性程度高、易发生转移的特点,其复发或发生转移会影响预后,降低患者5年生存率[2-3]。目前,甲氨蝶呤、多柔比星、顺铂等常用临床化疗药物在骨肉瘤化疗中出现的耐药性及毒副作用逐渐成为制约其发展的主要问题,而靶向治疗等治疗骨肉瘤的新方法尚处于起步阶段,其有效性及安全性还需大量临床资料证实[4]。因此,寻找一种安全、有效的药物来延缓骨肉瘤进展具有重要价值。普鲁卡因是一种脂溶性局部麻醉药物,已广泛应用于临床麻醉中,近年研究发现,普鲁卡因在肿瘤治疗领域也有一定作用,目前在肺癌、肝癌、胃癌等癌症中已有初步研究[5]。细胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶/黏着斑激酶(extracellular signal regulated kinase/mitogen activated protein kinase/focal adhesion kinase,ERK/MAPK/FAK)通路与多种癌细胞迁移及侵袭密切相关[6-8]。本研究通过研究普鲁卡因对骨肉瘤细胞增殖、迁移及侵袭行为的影响,并探讨可能存在的作用机制。

1 材料和方法

1.1 细胞

人骨肉瘤细胞Saos-2(货号:QY-x646)购自美国ATCC细胞库。

1.2 主要试剂与仪器

普鲁卡因、蛋白提取试剂盒(货号:IP0390-1、BC3640)购自Solarbio;Y15(货号:T7119)购自美国TargetMol;DMEM培养基(货号:KL-P0032)购自德国sigma;CCK-8(货号:CK-04)购自日本同仁;AnnexinV-FITC/PI试剂盒(货号:S0185)购于哈尔滨新海基因检测有限公司;Matrigel基质胶(货……