张美珍 李登云 胡丹兰
肺癌是临床最为常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率高居所有肿瘤首位[1]。目前,肺癌的治疗手段主要有手术切除、化学治疗、免疫治疗、放射治疗等,但治疗效果仍未达到理想状态,且患者术后生存率较低[2]。紫杉醇是肺癌治疗常见的有效药,但易发生耐药,且不良反应多[3]。因而开展相关研究以寻求治疗肺癌的有效药或增强抗癌药的抗肿瘤作用具有重要的意义。近年来,研究发现大黄素能够有效抑制多种肿瘤疾病的发生发展[4-6]。本文旨在观察大黄素能否增强紫杉醇对肺癌细胞的抗肿瘤作用,为今后肺癌诊疗提供新思路。
1.1 实验材料 小细胞肺癌H466 细胞株购自武汉普诺赛生命科技有限公司;大黄素购自东明格鲁斯生物科技有限公司,紫杉醇购自哈尔滨三联药业股份有限公司;青霉素、链霉素和胎牛血清均购自上海Sigma公司;二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量试剂盒(批号:P0009)购自上海碧云天生物技术有限公司,CCK-8 试剂盒购自上海MedChem Express 公司;B 淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)(批号:ab224077)、BCL2-Associated X 的蛋白质(Bax)(批号:ab193573),及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)(批号:ab181602)抗体均购自大连宝生物公司;Transwell 小室购自中国乐博生物公司。
1.2 实验方法 (1)细胞培养、用药与分组:取小细胞肺癌H466 细胞株复苏后,置入含10%胎牛血清的培养基培养,置于37 ℃、5% CO2恒温培养箱中常规培养。取对数生长期的A549 细胞用于实验,将对数生长期细胞悬液浓度调整为(1×105个/mL)接种于96 孔板中,每孔加入100 μL,设置培养箱室温条件为37 ℃、湿度条件为5% CO2,培养24 h。配……