槲皮素对人宫颈鳞癌顺铂耐药细胞 SiHa/DDP的逆转作用研究

冯磊 杨建敏 杨然 孙丽 董莉丽 张清伟

中图分类号 R965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）23-2875-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.23.10

摘 要 目的：研究槲皮素对人宫颈鳞癌顺铂耐药细胞SiHa/DDP的逆转作用。方法：测定顺铂对SiHa/DDP细胞的耐药指数以及槲皮素对SiHa/DDP细胞的逆转耐药倍数;考察槲皮素（0.005 μg/mL）、顺铂（2.5 μg/mL）、顺铂联合槲皮素（2.5 μg/mL顺铂+0.005    μg/mL槲皮素）、槲皮素联合通路抑制剂（0.005 μg/mL槲皮素+20 nmol/L雷帕霉素）对SiHa/DDP细胞凋亡率及磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关蛋白[PI3K、Akt、mTOR、肿瘤多药耐药蛋白（P-gp）、p70核糖体S6激酶（p70S6K）]表达的影响。结果：顺铂对SiHa/DDP细胞的耐药指数为5.19，槲皮素对SiHa/DDP细胞的逆转耐药倍数为4.00。与单用顺铂和单用槲皮素比较，顺铂联合槲皮素、槲皮素联合雷帕霉素均可显著升高SiHa/DDP细胞的凋亡率（P<0.05），显著降低Akt、mTOR、p70S6K蛋白的磷酸化水平和P-gp蛋白的表達水平（P<0.05）。结论：槲皮素可逆转SiHa/DDP细胞对顺铂的耐药性，其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达有关。

关键词 槲皮素;宫颈鳞癌;SiHa/DDP细胞;PI3K/Akt/mTOR信号通路;耐药性;逆转

Study on Reversal Effect of Quercetin on Human Cervical Squamous Carcinoma Cisplatin-resistant Cell Line SiHa/DDP

FENG Lei1，YANG Jianmin1，YANG Ran1，SUN Li1，DONG Lili1，ZHANG Qingwei2（1. Dept. of Gynaecology， Nanyang Municipal Central Hospital， Henan Nanyang 473000， China; 2. Dept. of Gynaecology， the First Affiliated Hospital of Luohe Medical College， Henan Luohe 462000， China）

ABSTRACT   OBJECTIVE： To study the reversal effect of quercetin on human cervical squamous carcinoma cisplatin-resistant cell line SiHa/DDP. METHODS： The drug resistance index of cisplatin to SiHa/DDP cells， and the reversal resistance multiple of quercetin to SiHa/DDP cells were determined. The effects of quercetin （0.005 μg/mL）， cisplatin （2.5 μg/mL）， cisplatin combined with quercetin （2.5 μg/mL cisplatin+0.005 μg/mL quercetin）， quercetin combined with pathway inhibitor （0.005 μg/mL quercetin+20 nmol/L rapamycin） on the apoptotic rate of SiHa/DDP cells were investigated， as well as its effects on the expression of phosphatidylinositol 3-kinase （PI3K）/protein kinase B（Akt）/mammalian rapamycin target protein （mTOR） signaling pathway related proteins （PI3K， Akt， mTOR， P-gp， p70S6K）. RESULTS： The resistance index of cisplatin to SiHa/DDP cells was 5.19， and reversal resistance multiple of quercetin to SiHa/DDP cells was 4.00. Compared with cisplatin alone and quercetin alone， cisplatin combined with quercetin， quercetin combined with rapamycin could significantly increase the apoptotic rate of SiHa/DDP cells （P<0.05）， while decreased the phosphorylation of Akt， mTOR and p70S6K protein as well as the expression of P-gp protein （P<0.05）. CONCLUSIONS： Quercetin can effectively reverse drug resistance of SiHa/DDP cells to cisplatin， which may be associated with inhibiting the expression of the protein related to PI3K/Akt/mTOR signaling pathway.

KEYWORDS   Quercetin; Cervical squamous carcinoma; SiHa/DDP cells; PI3K/Akt/mTOR signaling pathway; Drug resistance; Reversal

宫颈癌是较常见的恶性腫瘤之一，其发生、发展与人乳头瘤病毒（HPV）密切相关;在宫颈癌的病理分类中，宫颈鳞癌是最主要的类型，约占80%[1]。有研究提示，以顺铂为基础的辅助化疗对宫颈鳞癌的副作用小、疗效确切，可改善患者局部病灶，提高患者生存率;但顺铂易产生耐药性，降低肿瘤化疗的效果[2]。相关研究发现，在多数耐药肿瘤细胞中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路常处于异常激活的状态[3]。PI3K/Akt/mTOR信 号通路相关蛋白是调控细胞增殖及分裂的关键信号分子，可影响肿瘤多药耐药蛋白（P-gp）、p70核糖体S6激酶（p70S6K）等蛋白的表达，从而激活肿瘤细胞的耐药作用[4-5]。……