大鼠脑出血模型血肿周围TLR4动态表达及其与脑水肿相关性

奉俊敏，李少明*，邝素军，郭 伟

(1.广州医科大学附属第一医院神经内科，2.急诊科，广东 广州 510120)

脑出血(intracerebral hemorrhage，ICH)是致残率、死亡率极高的脑血管疾病。脑出血后继发脑水肿，尤其是血管源性脑水肿被认为是出血后损伤的中心环节，是导致患者病情加重和死亡的主要原因之一[1]，但血肿周围脑水肿形成的病理生理机制尚不清楚。有研究表明，脑出血后血肿周围炎症损伤是造成脑水肿的直接原因[2]。TLR4属于跨膜炎性信号转导受体，可加剧炎性损伤。动物实验证实，TLR4是脑出血后炎症反应的重要参与者[3，4]。但TLR4是否通过介导炎性反应，参与脑出血后脑水肿形成，还有待实验证实。本研究采用自体动脉血注入法建立大鼠脑出血模型，观察血肿周围TLR4的动态表达与脑水肿的相关性，为进一步探索TLR4在脑出血后血肿周围脑水肿形成中的炎症损伤机制奠定初步基础。

1 材料与方法

1.1 材料

SPF级健康雄性SD大鼠120只，体质量250～300 g，购自广东省实验动物中心。动物头颅立体定向仪(美国Stoelting公司)；电子分析天平(上海天平仪器厂)；免疫组化抗体试剂(美国Abcam公司)；202A-1 型电热恒温干燥箱(上海浦东跃欣科学仪器厂)。

1.2 方法

1.2.1模型制备 10%水合氯醛对大鼠进行腹腔内麻醉(剂量为4 μl/g)，大鼠俯卧位，头顶正中纵行切开，颅骨前囟前0.2 mm、中线右侧旁3 mm处钻一个直径为1.5 mm圆孔，深达硬脑膜表面。将微量进样器沿钻孔垂直进针约6 mm直至靶点。手术组将自体新鲜非抗凝动脉血50 μL 20 min内缓慢推注入脑(相当于尾状核的位置)，假手术组将生理盐水50 μL 20 min内缓慢推注入脑，留置10 min后缓慢拔针。……