色素上皮衍生因子及其多肽对非小细胞肺癌增殖、凋亡及迁移的影响

晁志祥 秦西淳 贾才力 秦昊 张昊

目前肺癌是世界上发病率和死亡率极高的恶性肿瘤[1]，据统计，非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）约占报告病例的85%[2]，近80%的NSCLC患者被诊断为晚期，晚期NSCLC患者的预后极差[3]。近年来，血管生成在肿瘤发展，生长和转移中的作用一直是研究的热点[4]。色素上皮衍生因子（pigment epithelium-derived factor,PEDF）是一种50 kDa分泌性的糖蛋白，具有多种生物学功能，包括抗血管生成、抗炎和神经营养[5]。越来越多的证据[6]表明，PEDF对多种类型肿瘤细胞具有抑制作用，如卵巢癌、胰腺癌、骨肉瘤等。然而，由于PEDF本身分子量较大，半衰期短，免疫原性较强，难以实现临床转化应用。多肽在多种疾病的治疗上具有特异性和有效性，并具有良好的药理动力学和较低的生产成本[7]。已在人类PEDF中鉴定出两个功能性基序，分别是34聚体（氨基酸位置Asp44-Asn77）和44聚体（氨基酸位置Val78-Thr121），它们分别负责抗血管生成活性和神经营养活性[8]。已有研究[9]证明PEDF能有效抑制肺癌的增殖和迁移，然而PEDF多肽的抗肿瘤作用鲜有报道。因此，探究短功能PEDF肽的抗肿瘤生物学活性具有潜在价值。本研究旨在探讨PEDF及其衍生多肽对肺癌细胞系A549细胞增殖、凋亡及迁移的影响，从而为肺癌的治疗提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 细胞培养与试剂 A549细胞和H1299细胞购于上海中科院细胞库，A549细胞用含10%血清的高糖DMEM培养基，H1299细胞用含10%血清的高糖RPMI-1640培养基，在37oC、5% CO2的培养箱内常规培养，细胞生长汇合度达到90%以上时，消化传代培养。A549细胞和H1299细胞铺满培养皿60%左右时，分别对细胞进行药物处理，分为正常组、PEDF组（60 nmol/L）、34肽组（60 nmol/L）、44肽组（60 nmol/L）及34+44组合肽（60 nmol/L）；……