碱性神经酰胺酶抑制剂D-e-MAPP对胰腺癌小鼠模型的作用*

陈泰宇，吴 炀，杨慧媚，陈冰丽，张鹏程，喻亚群，肖 娟**

(1.桂林医学院附属医院广西肝损伤与修复分子医学重点实验室，广西 桂林 541001；2.桂林医学院附属医院广西神经鞘脂代谢相关疾病基础研究重点实验室；3.桂林医学院附属医院肝胆胰外科)

胰腺癌(pancreatic adenocarcinoma，PAAD)恶性程度高，同时早期诊断困难[1-2]，具有病程短、进展快、预后差等特点，其癌症死亡率排第7位[3]。除手术切除外，化学疗法是主要的治疗手段。吉西他滨已成为治疗胰腺癌的标准化疗方法，但其单药治疗有效率不到20%[4]。胰腺癌患者的五年生存率不到10%[5]，大多数患者死于耐药性转移性疾病。神经酰胺酶(ceramidase，Cer)已被证实在多种癌细胞中过量表达[6]，说明这可能是一个潜在的靶点。神经酰胺酶对肝癌的作用效果先前已有报道[7]，而对胰腺癌的作用鲜有报道。D-e-MAPP是一种碱性神经酰胺酶(alkaline ceramidase，ACER)抑制剂，可促进肿瘤细胞凋亡以抑制肿瘤增殖。本研究通过建立Pan02-luc胰腺癌细胞株小鼠移植瘤模型，观察D-e-MAPP对小鼠移植瘤生长的影响，并检测肿瘤组织中碱性神经酰胺酶表达量变化及Ki-67蛋白表达情况，探讨其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 试剂与材料

胰腺癌细胞系Pan02-luc购自上海中乔新舟生物科技有限公司；无病原体雄性C57/BL小鼠购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司；DMEM高糖培养基购自美国Gibco公司；胎牛血清购自浙江天杭生物科技股份有限公司；D-e-MAPP购自美国Cayman Chemical公司；荧光素酶底物D-Luciferin购自美国MedChemExpress公司。

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养

胰腺癌Pan02-luc细胞置于含10%胎牛血清的DMEM培养基，37℃ CO2培养箱中。……