膨化发酵菜籽粕对肉鸡生长性能、血清生化及抗氧化指标的影响

邓 卉，邹成义，汪林书，屈 东，李 斌，余 丹，倪青松，刘进远，张 敏

（四川省畜牧科学研究院，动物遗传育种四川省重点实验室，四川成都 610066）

目前，豆粕是我国畜禽日粮的主要植物蛋白源，玉米-豆粕型日粮已被生产上广泛采用。但因豆粕主要依赖进口且价格高，正在成为制约我国饲料工业和养殖业发展的瓶颈。因此，豆粕替代或减量使用技术正在成为行业的研究热点。菜籽粕含粗蛋白质35%～41%，除赖氨酸含量低于豆粕外，其余氨基酸含量与豆粕近似。由于菜籽粕含有硫甙等抗营养因子，会引起单胃动物适口性变差、养分利用率下降、慢性中毒等，在畜禽日粮中的使用非常有限。

研究表明，微生物发酵或膨化等预消化处理工艺技术可提高菜籽粕的饲用品质。倪光远报道，发酵处理可提高蛋菜籽粕粗蛋白质、多肽的含量及体外消化率。胡永娜等研究表明，菜籽粕发酵后噁唑烷硫酮（OZT）的降解率达99.99%。Chiou 等发现，发酵能大幅度改善菜籽粕中纤维素消化率。田珍珍等研究表明，膨化加工可严重破坏菜籽粕中的异硫氰酸酯（ITC）和噁唑烷硫酮（OZT）。以上研究表明，无论是微生物发酵还是膨化加工均可改善菜籽粕的饲用品质。单一处理工艺发挥作用程度有限，而2 种及2 种以上的联用工艺是否可进一步提升菜籽粕饲用品质，目前鲜见报道。

本试验采用先发酵、后膨化的工艺制备膨化发酵菜籽粕，在日粮中添加不同水平膨化发酵菜籽粕对崇仁麻鸡生长性能、血清生化及抗氧化指标的影响，评价膨化发酵菜籽粕在肉鸡日粮中的饲喂效果。

1 材料与方法

1.1 试验材料 菜籽粕经固态混菌发酵工艺处理后，再经115℃湿法挤压膨化进行二次处理，2 种工艺联用生产出膨化发酵菜籽粕，备用。发酵菜籽粕主成分：水分9.50%；干物质（DM）基础条件下，粗蛋白质38.82%、赖氨酸1.03%、酸溶蛋白3.83%、酸性洗涤纤维（ADF）30.50%、中性洗涤纤维（NDF）38.90%、异硫氰酸酯（ITC）34.25%、噁唑烷硫酮（OZT）0.11%。

1.2 试验设计及日粮 采用单因子随机区组试验设计，选择60 日龄、平均体重700 g 左右的崇仁麻公鸡600 只，随机分为5 组，每组5 个重复，每个重复24 只鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮，试验组分别在日粮中添加2.5%、5.0%、7.5%、10.0% 膨化发酵菜籽粕。参照《黄羽肉鸡营养需要量》（NY/T 3645-2020）及崇仁麻肉鸡近期营养研究文献，确定营养需要和配制基础日粮。试验组选用不同比例膨化发酵菜籽粕等氮替代基础日粮中的豆粕，日粮组成及营养成分见表1。试验期56 d。

表1 日粮组成及营养成分（风干基础）

1.3 饲养管理 试验于2020 年开展，试鸡饲养在全新的3 层阶梯式金属笼里，自由采食及饮水，按肉鸡常规免疫程序免疫和饲养管理，各处理组饲养管理条件保持一致。

1.4 测定指标与方法

1.4.1 生长性能 试验开始和结束时，试验鸡禁食12 h 后称重，以重复为单位记录初始重和末重，并统计试验全期耗料量。计算鸡的平均日采食量（ADFI）和平均日增重（ADG），根据ADFI 和ADG 计算耗料增重比（F/G）。

1.4.2 血清生化 试验结束时，每重复按平均体重选取1 只鸡翅静脉采血8 mL 置于采血管中，室温静置4 h 后，3 000 r/min 离心制备血清，待测相关指标。血清中碱性磷酸酶（ALP）采用AMP 法测定，谷丙转氨酶（ALT）采用丙氨酸底物法测定，谷草转氨酶（AST）采用天门冬氨酸底物法测定，总蛋白（TP）采用双缩脲法测定，尿素氮（BUN）采用尿素酶-谷氨酸脱氢酶法测定。测定仪器选用日立（HITACHI）全自动生化分析仪（型号：3100）。

1.4.3 血清抗氧化指标 血清中总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性、总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）含量采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定。ELISA 试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品。

1.5 统计分析 运用SPSS17.0 软件对数据进行单因素方差分析（One-Way ANOVA）和Duncan's 法多重比较，并进行线性和二次曲线回归分析，以<0.05 和<0.01作为差异显著和极显著的判断标准，试验数据采用平均值±标准差表示。

2 结果

2.1 膨化发酵菜籽粕对肉鸡生长性能的影响 由表2 可知，2.5%、5.0%、7.5%、10.0% 膨化发酵菜籽粕组鸡只末重、耗料量、ADG、ADFI 和F/G 与对照组均无显著差异；膨化发酵菜籽粕添加水平与F/G 存在二次回归关系（<0.05），F/G 随添加水平升高呈先降低后上升趋势，以5.0%添加量最低（图1）。

图1 膨化发酵菜籽粕添加水平与肉鸡F/G 的二次曲线回归关系

表2 膨化发酵菜籽粕对肉鸡生长性能的影响

2.2 膨化发酵菜籽粕对肉鸡血清生化指标的影响 由表3 可知，各组血清ALP、ALT、TP 和BUN 含量均无显著差异，5.0%和10.0%膨化发酵菜籽粕组AST 含量高于对照组（<0.05）；膨化发酵菜籽粕添加水平与血清AST 含量存在线性回归关系（<0.05），AST 含量随添加水平升高而升高（图2）。

表3 膨化发酵菜籽粕对肉鸡血清生化指标的影响

图2 膨化发酵菜籽粕添加水平与肉鸡血清AST 含量的线性回归关系

2.3 膨化发酵菜籽粕对肉鸡血清抗氧化指标的影响 由表4 可知，各组血清CAT、T-SOD、GSH-Px 活性均无显著差异；2.5%、7.5%、10.0%膨化发酵菜籽粕组T-AOC含量低于对照组（<0.05），5.0% 膨化发酵菜籽粕组T-AOC 含量与对照组差异不显著；7.5%、10.0% 膨化发酵菜籽粕组MDA 含量高于对照组（<0.01），而2.5%、5.0% 膨化发酵菜籽粕组MDA 含量与对照组差异不显著；膨化发酵菜籽粕添加水平与血清CAT 活性存在二次回归关系（<0.05），CAT 活性随添加水平升高呈先降低后升高趋势，与血清MDA 含量存在线性回归关系（<0.05），MDA 含量随添加水平升高而升高（图3 和图4）。

图3 膨化发酵菜籽粕添加水平与肉鸡血清CAT 活性的二次曲线回归关系

图4 膨化发酵菜籽粕添加水平与肉鸡血清MDA 含量的线性回归关系

表4 膨化发酵菜籽粕对肉鸡血清抗氧化指标的影响

3 讨论

3.1 膨化发酵菜籽粕对肉鸡生长性能的影响 吴东等研究结果表明，3.0%、6.0%、9.0% 发酵菜籽粕组肉鸡ADG、ADFI 和F/G 与0.0% 组均无显著差异。刘长松等研究表明，用发酵菜籽粕替代肉鸡基础日粮12.0%的豆粕对肉鸡生长性能无显著影响。陈昭琪等分别用发酵菜籽粕等氮替代肉鸡基础日粮中15.0%、35.0%、50.0%豆粕，结果表明发酵菜籽粕等氮替代饲料中15.0% 豆粕对肉鸡生长性能无负面影响。本试验结果显示，2.5%、5.0%、7.5%、10.0% 膨化发酵菜籽粕组肉鸡ADG、ADFI 和F/G 与对照组无显著差异，这与选用单一发酵工艺改良菜籽粕在肉鸡上的研究结果类似。此外，本试验发现膨化发酵菜籽粕添加水平与F/G 存在显著的二次回归关系，F/G 随添加水平升高呈先降低后上升趋势，F/G 在5.0% 添加量时最低，这可能与高水平膨化发酵菜籽粕组日粮中的赖氨酸含量较低有关。赖氨酸是在肉鸡日粮中继蛋氨酸之后的第二限制性氨基酸，肉鸡体蛋白中赖氨酸含量最高，约为含硫氨基酸和苏氨酸含量的2 倍，说明肉鸡代谢过程中体蛋白沉积对赖氨酸的需求很高。刘升军等研究也发现，在日粮中0.70 %、0.85 %、1.00 %、1.15%赖氨酸水平下，肉鸡F/G 随赖氨酸水平升高呈逐渐降低的趋势。

3.2 膨化发酵菜籽粕对肉鸡血清生化指标的影响 TP 含量主要反映体内蛋白质合成或丢失情况；BUN 是蛋白质、氨基酸代谢的终产物；ALT 和AST 主要参与体内氨基酸的转氨基作用，ALT 主要存在于肝细胞浆内，AST 主要分布在心脏的肌肉中及肝细胞的线粒体内。彭双等研究结果表明，在生长猪日粮中采用10%发酵菜籽粕替代豆粕对血清TP、ALT、AST 和BUN 均无显著影响；孙佩佩等研究结果表明，在生长猪日粮中添加8.4%、12.0%、16.0%发酵菜籽粕等氮替代豆粕，各组血清TP、BUN 均无显著差异。本试验中，膨化发酵菜籽粕添加水平与血清AST 含量存在显著的线性回归关系，AST 含量随添加水平升高而升高，提示膨化发酵菜籽粕替代豆粕对肉鸡心脏、肝脏等组织可能存在潜在影响。AST 是评价肝脏、心脏等组织病变的辅助指标，还应结合ALT 指标和组织细胞形态结构来明确膨化发酵菜籽粕是否对机体造成不良影响。本试验结果表明，膨化发酵菜籽粕对ALT 指标不存在显著影响，并且各膨化发酵菜籽粕组血清中ALP、TP、BUN、ALT 等多项指标含量均与对照组无显著差异。

3.3 膨化发酵菜籽粕对肉鸡血清抗氧化指标的影响 需氧生物细胞内具有抗氧化防御系统，该系统的酶类（SOD、CAT、GSH-Px 等）可因体内自由基化合物数量的增加而被诱导合成，它们的含量和活性会影响机体内活性氧自由基的水平，该系统酶类活性升高说明其保护细胞免受自由基损伤的程度增强；T-AOC 是衡量机体抗氧化能力的综合指标；MDA 作为脂质过氧化作用的终产物，其含量能直接反映细胞膜被氧化的程度。本试验中，虽然膨化发酵菜籽粕添加水平与血清MDA含量存在显著的线性回归关系，MDA 含量随添加水平升高而升高，但2.5%和5.0%膨化发酵菜籽粕组MDA含量与对照组差异不显著；CAT 活性随添加水平增加而降低，但在5.0%添加水平后呈升高趋势，这可能是体内随自由基化合物数量的增加而被诱导合成的原因；各组血清T-SOD、GSH-Px 活性均无显著差异；5.0%膨化发酵菜籽粕组T-AOC 含量与对照组无显著差异。由此说明，5.0% 膨化发酵菜籽粕等氮替代豆粕对肉鸡血清抗氧化指标无负面影响。

4 结论

本试验条件下，选用发酵-膨化联用工艺对菜籽粕进行预消化处理，肉鸡日粮中膨化发酵菜籽粕替代豆粕对肉鸡生长性能、血清生化和抗氧化指标无显著影响，以5.0%添加量效果最佳。