张洁 吴 倩 王晓玲 唐 勇 吴宗涛
1.陕西中医药大学,陕西咸阳 712046;2.陕西省安康市中医医院,陕西安康 725000
脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)占卒中24%[1],属中医“中风”范畴,急性期治法以熄风、化痰、活血为主,目前临床中尚无证据表明活血化瘀药会其增加出血风险[2]。出血性中风1 号方有平肝熄风、凉血化瘀功效,有研究表明,该方对ICH 患者有脑保护作用,但机制尚不明确[3-5]。本研究探讨该方对ICH 模型大鼠脑组织的影响及机制。
1.1.1 实验动物 84 只雄性SD 大鼠,体重(220±20)g,购于成都达硕实验动物有限公司,许可证号:SCXK(川)2020-030,合格证号:0043162。本研究经过陕西中医药大学实验动物伦理委员会批准。
1.1.2 药物 出血性中风1 号方配方颗粒(水牛角15 g、钩藤10 g、牛膝10 g、生大黄6 g、栀子10 g,广东一方制药有限公司,批号:9116533、9120933、9100363、90713 91、9110873)。脑血疏口服液(山东沃华医药科技股份有限公司,批号:20070059)。
1.1.3 主要试剂与仪器 胶原酶Ⅶ(sigma,批号:C824248);肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6 试剂盒,核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65 抗体(武汉博士德,批号:EK0526、EK0412、A00284-1);磷酸化NF-κB(phos phorylated NF-κB,p-NF-κB)p65 抗体(Affinity,批号:AF2006)。脑立体定位仪(成都泰盟科技有限公司,DW-2000),微量进样器(上海高鸽工贸有限公司,批号:HY20082702)。
1.2.1 分组及给药 84 只大鼠中随机选取24 只,采用随机数字表法将其分为空白组和假手术组,每组12 只。剩余60 只采用胶原酶Ⅶ注射诱导ICH 模型,造模成功后采用随机数字表法将其分为模型组、脑血疏组(2.08 ml/kg)及出血性中风1 号方低、中、高剂量组(3.2、6.4、12.8 g/kg)。空白组、假手术组、模型组灌胃等量生理盐水,其余组灌胃对应剂量药物,1 次/d,连续7 d。
1.2.2 模型制备 参照文献[6-7]复制ICH 模型:5%水合氯醛(6 ml/kg)腹腔注射麻醉大鼠,以前囟向后0.2 mm,向右3.0 mm,垂直下移5.5 mm 为注射点,微量进样器取1.5 μl 胶原酶Ⅶ注入右尾状核区。……