补肾养精颗粒灌胃对早发性卵巢功能不全大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的抑制作用及其机制

于潇，王玉超 ，刘金星，郑伟，张芳，刘鹏飞

1 山东中医药大学附属医院妇科，济南 250014；2 青岛中西医结合医院妇科；3 山东中医药大学教务处；4 山东中医药大学附属医院生殖与遗传科

早发性卵巢功能不全（POI）是指女性在40岁以前出现卵巢功能减退，主要表现为月经异常和生育能力下降［1］。POI 的发生机制可能与卵泡颗粒细胞凋亡引起卵泡异常闭锁、卵巢功能损害有关。Hedgehog（Hh）信号具有进化保守性，在细胞增殖及分化过程中起先导作用［2］。研究表明，Hh 信号通路的关键基因Hh、肿瘤抑制基因（Ptch）和原癌基因（Smo）、锌指蛋白1（Gli1）存在于哺乳动物卵巢颗粒细胞、卵泡膜细胞及卵巢间质中［3］，可以调控Bax、Bcl-2等靶基因的表达，抑制卵巢颗粒细胞凋亡。补肾养精颗粒是由本团队自拟的治疗POI 的中药方，前期临床及基础研究证实，该方能够促进卵泡发育及促排卵，改善卵巢内分泌功能［4-5］。动物实验显示，补肾养精颗粒可通过调节凋亡相关基因Bcl-2、Bax、PI3K、AKT 表达，抑制卵泡颗粒细胞凋亡，从而改善POI 大鼠卵巢功能［6］。但是，补肾养精颗粒是否能够通过调控Hh 信号通路来抑制卵巢颗粒细胞凋亡尚不明确。2019 年 7 月—2022 年 6 月，我们以Hh通路为调控颗粒细胞凋亡的作用靶点，观察补肾养精颗粒对POI 大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的抑制作用，并探讨其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 8 周龄SPF 级雌性SD 大鼠90只，体质量（190±20）g，购自济南朋悦实验动物繁育有限公司。饲养于山东中医药大学附属医院动物实验中心，SPF级屏障环境，温度20～24 ℃，湿度50%～60%，适应性喂养2周后用于实验。……