叶黄素软胶囊缓解视疲劳功能研究

张 雪，程 倩，栾金玲，董运海，张海波*

（1.酵母功能湖北省重点实验室，湖北宜昌 443003；2.安琪纽特股份有限公司，湖北宜昌 443000）

视疲劳是以患者眼的自觉症状为基础，眼或全身器质性因素与心理因素相互交织的综合征，现已成为干扰和危害人们身心健康的慢性疾病[1-2]。随着社会的进步与发展，工作竞争加剧，人们长期过度用眼、疲劳用眼，导致视疲劳的发生率逐年上升，有关数据显示，我国有约1.5亿以上视疲劳患者[3]。

叶黄素是含紫罗铜环的二羟基类胡萝卜素，具有抗氧化、抗炎和抗血管生成的特性[4-5]。叶黄素在人类健康中的作用，特别是在视力健康中的作用，已通过流行病学、临床干预研究得到了很好的证实[6-7]。WALCHUK等[8]研究发现食用富含叶黄素和DHA的鸡蛋可改善健康老年人的视网膜功能。刘霁等[9]应用叶黄素酯开展人体试食试验证实每日食用10 mg叶黄素酯对视力易疲劳者安全且有效。

蓝莓学名越橘，果实中含有多种药效成分[10]，其中花青素应用较广泛，具有改善视力[11]、抗氧化[12]、清除自由基、降血压[13]、调节代谢[14]等功效。周小娟[15]研究越橘花青素对豚鼠形觉剥夺性近视的防治作用中发现口服越橘花青素可抑制豚鼠形觉剥夺性近视的眼轴增长，具有防治近视作用。程强[16]证实花青素类提取物对大鼠视网膜光损伤有一定的预防保护作用，且灌胃给药方式比滴眼给药方式见效快。目前花青素已成为临床眼科药物的主要活性成分，用于治疗糖尿病及高血压性视网膜病变[17]。

β-胡萝卜素具有与维生素A相似的化学结构，能在体内转化为维生素A，有补肝明目的作用，可治疗夜盲症[18-20]。袁克敏等[21]在研究4种功效物质（茶氨酸、γ-氨基丁酸、β-胡萝卜素和葡萄籽提取物）对视疲劳的缓解作用中证实，食用含β-胡萝卜素的巧克力糖果可以有效提高受试者视力，缓解其视疲劳症状。蔡晓湛等[22]研究显示血清中β-胡萝卜素水平低者其白内障的发病率高于血清中β-胡萝卜素高者。

视疲劳的发病率逐年上升，而缓解视疲劳的药物都存在一定的问题。叶黄素、花青素、β-胡萝卜素是人体无法合成的天然化学物，必须通过膳食补充获得[23]，叶黄素有显著的改善视疲劳功能。β-胡萝卜素被人体吸收后，可以贮存在肝脏中，根据人体需要转化为维生素A，不会因过量的维生素A而产生毒性。蓝莓提取物中含有大量花青素，在缓解视疲劳的同时可以清除体内自由基，调节代谢。该天然物质配方可以极大地减轻药物的副作用。因此，开发由叶黄素酯、蓝莓提取物、β-胡萝卜素3种功效成分复配的保健食品具有重要意义。

本研究根据《关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知》（国食药监保化[2012]107号）中缓解视疲劳功能判定标准，对叶黄素软胶囊进行了为期60 d的人体试食试验的效果观察，旨在为以上原料在缓解视疲劳产品中的适用性和使用方法提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

叶黄素软胶囊，主要原料有蓝莓提取物、叶黄素酯、天然β-胡萝卜素，每100 g样品中含叶黄素0.38 g、花青素2.50 g、β-胡萝卜素0.75 g，规格为0.8 g/粒×60粒/瓶，人体推荐量为每日1次，每次1粒，口服。血细胞分析稀释液，日本希森美康（批号：G7159）；尿试纸条，优利特（批号：G80416257）；生化试剂盒。

1.2 仪器与设备

全自动血液分析仪URIT-5250（桂林优利特）；心电图仪ECG-1350P（日本光电）；全自动生化分析仪Viva-proE（西门子）；尿液分析仪Uritest-500B（桂林优利特）；X光机RE2100（RAYON）；B超诊断仪PREIRUS（二郎神，日立）。

1.3 试验方法

1.3.1 受试对象

人群：成人，18～65岁，长期用眼，视力易疲劳者。排除标准：患有感染性、外伤性眼部疾病患者，进行眼部手术不足3个月者；患有角膜、晶体、玻璃体、眼底病变等内外眼疾患者；患有心血管、脑血管、肝、肾、造血系统等疾病者；妊娠或哺乳期妇女、过敏体质患者；短期内服用与受试功能有关的药物、保健品，影响到对结果的判定者；长期服用有关治疗视力的药物、保健品或使用其他治疗方法未能终止者；不符合纳入标准，未按规定食用受试物者，或资料不全等影响功效或安全性判断者。

1.3.2 试验分组及试验设计

将106例受试者按随机双盲法平均分为试验组和对照组，每组53例，分组时考虑年龄、性别等，以保证组间的可比性。采用自身和组间两种对照设计。分组时根据眼部疲劳症状及视力检查情况，使试验组和对照组的症状及视力水平均衡。试验组服用试验样品，对照组服用安慰剂，连续服用60 d，试验期间不改变原来的生活状态及饮食习惯。

1.3.3 安全性观察

血、尿常规检查：白细胞计数、红细胞计数、血小板计数等。肝、肾功能及血糖检查：血清白蛋白（Serum Albumin，ALB）、总蛋白（Total Protein，TP）、谷丙转氨酶（Alaninetransaminase，ALT）等。腹部B超，心电图，X线胸部透视（仅在试验开始前做一次）。

1.3.4 功效性观察（试验开始及结束时检查）

问卷调查：症状询问、用眼情况。眼科检查：包括眼底检查、视力检查（近视、远视、散光等）。明视持久度。

1.3.5 功效判定标准

（1）症状改善有效率。眼酸痛、眼胀、畏光、视物模糊、眼干涩、异物感、流泪和全身不适，8种症状中有3种改善，且其他症状无恶化即判定症状改善，计算两组症状改善例数和两组症状改善有效率，症状改善有效率（%）计算方法为症状改善例数/试食例数×100%。将两组症状改善有效率进行统计学检验[24]。

（2）症状平均积分。计算每位试食者试验前后的症状积分，分别计算两组的平均积分值，并进行统计学检验，见表1。

表1 视疲劳症状判定方法（半定量积分法）

（3）视力改善率。统计两组服用受试物后的视力改善率作为参考指标。参考指标不作为对缓解视疲劳功能是否有效的判定标准[24]。

（4）明视持久度。试验组自身比较或试验组与对照组组间比较，明视持久度有显著性差异（P＜0.05）且平均明视持久度提高≥10%为有效[24]。

1.3.6 统计方法

采用SPSS 17.0统计软件进行统计分析，凡自身对照资料采用配对t检验，两组均数比较采用成组t检验，后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行t检验。计数资料可用χ2检验。

1.3.7 结果判定

①试验组自身比较或试验组与对照组组间比较，症状改善有效率或症状总积分有显著性差异（P＜0.05）。②试验组自身比较或试验组与对照组组间比较，明视持久度有显著性差异（P＜0.05），且平均明视持久度提高≥10%。具备①及②且视力改善率未明显降低，可判定受试物具有缓解视疲劳功能的作用[24]。

2 结果与分析

2.1 病例脱失率

试验结束后，试验组1人、对照组1人因间断服用受试品被筛除，最后有效例数104例，试验组52例，对照组52例，脱失率为1.89%。

2.2 试验前一般资料的比较

试验前对试验组与对照组的一般资料进行比较，两组人群的年龄、性别均无显著差异（P＞0.05），见表2。

表2 试验前一般资料比较

2.3 安全性指标观察结果

试验期间两组受试人员的精神、饮食、睡眠、大小便情况等均未见异常。试验前受试人员心率、心电图、血压、腹部B超检查和X线胸部透视等数据均在正常范围。试验前后尿常规检查、血常规和血生化指标结果也处于正常范围，见表3。这与其他学者研究结果一致，如武峰等[25]研究发现口服叶黄素微粒制剂安全性良好，王黎颖等[26]通过毒理学试验证实，盐藻粉（主成分β-胡萝卜素）和蓝莓提取物复配后未见毒性作用，且两者可以极大地减少体内自由基含量，保护机体免受氧化损伤。综合不良反应观察和检测指标数据，证明以叶黄素、蓝莓提取物、β-胡萝卜素为主要原料制成的叶黄素软胶囊在规定剂量范围内对机体健康无不良影响。

表3 试验前后血液学检测指标（x—±SD）

2.4 功效性指标观察结果

2.4.1 视力变化情况

试验组自身及试验后两组间比较，左、右眼视力均无显著性差异（P＞0.05）（见表4）。试验组左眼视力改善有效率为15.38%，对照组左眼视力改善有效率为1.92%，差异有显著性（P＜0.05）。试验组右眼视力改善有效率为11.54%，对照组右眼视力改善有效率为1.92%，差异无显著性（P＞0.05）（见表5）。食用叶黄素软胶囊对于视力没有显著的改善作用[9]。

2.4.2 症状总积分变化情况

试验组试用前后自身比较，症状总积分显著降低（P＜0.01），组间比较症状总积分亦显著降低（P＜0.05），见表6。试验组症状改善有效率32.69%，对照组症状改善有效率11.54%，两者差异有显著性（P＜0.05），见表7。该试验结果与张莉华等[27]研究结果一致。此外，文献报道经常食用富含叶黄素的食物或补充叶黄素可增加血液中叶黄素的含量，防治因器官衰老引起的白内障等眼部疾病[28]。

表6 试验前后症状总积分变化情况（x—±SD）

表7 试验前后症状改善情况比较

2.4.3 明视持久度变化情况

明视持久度是指明视时间与注视总时间的百分比，是研究照明状态对视疲劳影响的方法之一。试验结果显示，试验组自身比较，明视持久度显著提高（P＜0.01），平均明视持久度提高11.32%。试食后两组间比较，明视持久度亦有显著提高（P＜0.01），平均明视持久度提高13.46%，见表8。由此可见，食用叶黄素软胶囊对眼部明视持久度有明显的提高。

表8 试验前后明视持久度变化情况（x—±SD）

3 结论

本次人体试食试验结果显示，叶黄素软胶囊试食期间受试人员的睡眠、饮食、血常规、尿常规等各项临床指标均无明显异常，也未见其他不良症状，表明人体服用叶黄素软胶囊的安全性可以满足。试验组食用60 d后，症状总积分、明视持久度有明显改善，平均明视持久度提高11.32%，试验组及对照组两组间比较，症状总积分、症状改善有效率、左眼视力改善率有显著差异（P＜0.05），明视持久度有显著差异（P＜0.01），平均明视持久度提高13.46%。基于食药监局发布文件中缓解视疲劳功能判定方法及标准，叶黄素软胶囊具有缓解视疲劳的功能。

目前，越来越多的人面临视疲劳的问题，因此缓解视疲劳的功能营养保健品需求量极大。利用天然原料制备功效明显的保健食品是食品营养与科学研究的热点。本研究所用原料均为天然植物原料，且被大量动物及人体试验证明具有功效性及安全性。叶黄素对视疲劳的改善作用主要体现在两方面，分别为光屏障作用和抗氧化作用，叶黄素可吸收大量蓝光，使其无法到达视网膜。另外，通过抗氧化作用使视神经细胞、晶状体、黄斑等免受氧化损伤，蓝莓提取物中大量的花青素可增加视网膜中色觉感光色素视紫质的重生，从而保护视力，β-胡萝卜素提供维生素A增强眼部暗视力能力，几种主要原料的组合可协同保护眼部健康，缓解视疲劳。本研究通过分析各原料特性严谨搭配，制得软胶囊成品具有良好的缓解视疲劳功能，为今后缓解视疲劳功能产品的研发提供了参考依据。