蓝靛果忍冬快繁技术研究综述

张 爽，潘 伟，杨巧红，梁超澎

（1.黑龙江农业职业技术学院，黑龙江 佳木斯 154007；2.佳木斯绿鸿山野菜开发有限公司，黑龙江 佳木斯 154007）

蓝靛果忍冬（Lonicera caerulea）又名蓝靛果、黑瞎子果、山茄子[1]，为忍冬科忍冬属的一种多年生落叶小灌木，其果实中含有人体必需的7种氨基酸和多种微量元素，具有很高的营养价值，被誉为“果实营养库”[2]、“果中之王”[3]；同时果实中还含有食用天然色素，是天然的抗氧化剂；蓝靛果果肉多汁，出汁率高，耐腐，是优良的酿酒、饮料的原料[4]。蓝靛果具有广阔的发展前景及经济价值，但我国开展蓝靛果的研究起步较晚，为使蓝靛果快繁技术得以快速推广和应用，该文就蓝靛果外植体选择、消毒、基本培养基的选择、激素的使用及培养等快繁技术进行简要概述，为蓝靛果大规模工厂化生产及栽培奠定理论基础。

1 蓝靛果快繁外植体选择与消毒方法

蓝靛果快繁所选取的外植体一般有腋芽[1，5，7-8]、茎尖[6，9]、茎段[2-4，9]、叶片[3]、种子[3]，其中以冬眠枝条上萌发的腋芽作为外植体较多、其次为茎段，且以1年生的材料为好[9]。李桂君、梁琦兰等[3，5]研究表明，以蓝靛果腋芽、茎尖、茎段为外植体，其分化率均为100%，而以叶片和种子作为外植体，其分化率均为0。

蓝靛果外植体消毒主要采用70%～75%的酒精[1，4-6，8-9]10～60 s，无菌水冲洗3～6次[5]，0.1%氯化汞溶液表面消毒15 s～10 min[1-3，5-6，8-9]，无菌水冲洗3～10次[3，5-6，9]，时间的长短依据材料的生理状态而定。据梁琦兰等[3]报道茎段、茎尖、叶片、种子最佳消毒方法是0.1%氯化汞溶液消毒6 min，其中茎段、茎尖的污染率均为6.67%；曲迪[8]研究表明腋芽采用75%的酒精消毒30 s，无菌水冲洗3次，然后0.1%氯化汞溶液消毒6 min，无菌水冲洗3次效果最好，其污染率小于6.33%，死亡率低于8.00%。

2 蓝靛果快繁基本培养基选择

蓝靛果组培苗生长需要较高浓度的无机物质以及多种有机物质，因此在蓝靛果培养过程中基本培养基以MS培养基为主，MS培养基具有盐类含量高、微量元素种类全、无机营养数量和比例较合适等特点，能够满足植物细胞营养和生理需要，有利于植物组织生长，对蓝靛果快繁具有良好的效果。曲迪等[8]研究表明，在蓝靛果分化培养中应用MS基本培养基附加6-BA 2.0 mg/L，苗的生长及分化等方面均明显优于White、WPM、A3、1/2MS、2MS、B5、N6，其分化率可达到93.33%，与2006年梁琦兰等[3]应用MS基本培养基附加6-BA 2.0 mg/L、IBA 0.2 mg/L，其分化率可达到98.51%的研究基本一致。但也有报道应用1/2MS作为基本培养基附加6-BA 2.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L，对蓝靛果快繁也有良好的效果[5，7]，其分化率可达到96.12%，这可能与蓝靛果品种、培养条件有关。

3 植物激素在蓝靛果快繁中的作用

植物激素在植物组织培养过程中起着重要的调控作用，生长素的作用是促进腋芽的生长，细胞分裂素的作用则是打破顶端优势，促进腋芽不断分化和生长，形成丛生芽，而两者的合理搭配对外植体的分化增殖都具有较大影响。在蓝靛果组培快繁中应用的植物激素主要有6-BA、IBA、GA3、NAA。李富恒、曲迪等[1，8]研究表明，基本培养基和不同激素都会对蓝靛果分化产生影响，在分化培养基的4个因素中，基本培养基、6-BA、IBA和GA3的极差分别为25.97、24.68、14.07和13.39，这说明基本培养基和6-BA是影响蓝靛果分化的主要因素，IBA和GA3是次要因素。同时田新华等[2]研究表明无论是从苗高还是从分化增殖情况来看，6-BA都是决定蓝靛果组培苗生长的重要因素，两者研究结果基本一致。

4 蓝靛果快繁

植物组织培养过程中获得无菌组培苗是植物组织培养的前提，因而蓝靛果组培过程中一般选用1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L或MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L[1，2，3，8]进行初代培养，获得无菌苗后再进行分化增殖，也可直接进行分化增殖。

快速繁殖是植物组织培养的目的，因而筛选适宜的蓝靛果分化增殖培养基是蓝靛果快繁的关键。蓝靛果分化增殖培养中基本培养基以MS为主[1-4，6，10]，也可用1/2MS[5]，并附加6-BA、IBA、NAA、GA3等植物激素，其中以6-BA为主，浓度一般为1.0 mg/L或2.0 mg/L；6-BA可单独使用，也可与IBA或NAA配合使用，亦可与IBA、GA3并用，IBA浓度一般为0.2 mg/L或0.3 mg/L，NAA浓度为0.1 mg/L，GA3浓度分别为0.3 mg/L、0.5 mg/L、1.5 mg/L。各配方均可达到分化增殖效果，其分化率最低95.92%，最高可达100%，增殖倍数最低3.3倍，最高可达7.4倍。曲迪等[8]研究表明蓝靛果分化增殖最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L+GA31.5 mg/L，分化率为95.92%，培养30 d平均苗高8.43 cm，采用相同配方进行增殖，培养30 d，增殖系数达4.14，且分化出的不定芽芽体粗壮，长势良好。同时李桂君等[5]研究表明俄罗斯耐寒蓝靛果忍冬腋芽分化及增殖的最佳培养基是1/2MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L，分化率可达100%，增殖系数可达7.4，7 d后腋芽开始萌发，15 d后芽长到1.0～1.5 cm，30 d后芽平均高3.5 cm。

5 生根培养

蓝靛果生根培养中基本培养基以1/2MS为主[2，4，10]，也可采用MS[8]、改良MS[11]、WPM[5]以及1/4MS[6]为基本培养基。研究表明蓝靛果生根培养基中主要应用IBA、NAA 2种植物激素，以单独使用为主，NAA使用浓度一般为0.2 mg/L或0.5 mg/L，IBA浓度为1.0 mg/L。为增强生根效果，也可添加活性炭，一般浓度为0.1%。曲迪等[8]研究表明影响蓝靛果生根的主要因素是基本培养基，其次是NAA，活性炭的影响最小，且蓝靛果最适生根培养基为MS+NAA 0.2 mg/L+0.1%活性炭，培养18 d时平均生根率达99.33%，根长势最好，培养24 d生根率可达100%，苗长势最好。