2012—2021年文山州禽新城疫病原监测及免疫效果评估

张立喜,张绍卫,陈瑞雪,袁正春

(1.文山州畜牧站,云南 文山 663099; 2.文山州动物疫病预防控制中心,云南 文山 663099)

新城疫疫苗的免疫接种工作在文山州已开展多年,为了解文山州禽新城疫病毒的流行情况,评估其免疫抗体水平及免疫效果,找出免疫工件中的薄弱环节,为进一步完善禽新城疫防疫措施提供科学依据,2012—2021年持续在文山州13个交易市场采集鸡、鸭喉气管样品,采用RT-PCR方法检测新城疫抗原;采用血凝及血凝抑制试验测定新城疫免疫抗体效价,并对结果进行时间、群间和空间分布分析。现将2012—2021年文山州禽新城疫病原监测及免疫效果评估结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 样品采集

1.1.1鸡血清

大部分鸡血清样品为每年春防、秋防集中监测送检样品。按照随机采样原则,每年每个县(市)抽查至少6个规模场,每个规模场采集样品20份;每个乡(镇)抽查至少10个散养户,每户采集样品10份(不足10份的全部采集)。少量样品为日常监测采样和定点采样。

2012—2021年,共对全州99个乡(镇)的10411个养殖场(户)采集80366份血清样品进行新城疫抗体检测。详见表1。

表1 2012—2021年鸡血清样品采集信息统计

1.1.2鸡、鸭喉气管样品

鸡、鸭喉气管样品固定在文山、砚山、麻栗坡、马关、丘北、富宁6个县(市)的13个交易市场采集。详见表2。

表2 2012—2021年鸡、鸭喉气管样品采集信息统计

1.2 检测与结果判定

1.2.1免疫抗体检测

采用血凝与血凝抑制试验对鸡血清样品进行新城疫免疫抗体检测,检测所需新城疫标准抗原和阴、阳性对照血清由青岛易邦生物工程有限公司生产,1%红细胞和PBS液由文山州动物疫病预防控制中心兽医实验室配制。阴性对照孔血清滴度≤2log2,阳性对照孔血清滴度≥9log2,判定试验结果有效。样品血清滴度≤4log2判定为阴性,样品血清滴度≥5log2视为免疫抗体合格; 群体免疫抗体合格率达到70%以上,视为群体免疫抗体合格。

1.2.2病原学检测

应用RT-PCR方法检测新城疫病原。包含病毒核酸提取和新城疫RT-PCR检测两个部分。

1.2.2.1病毒核酸提取

采用无锡百泰克生物技术有限公司生产的磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒提取新城疫病毒RNA,-80℃保存备用,具体操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.2.2.2新城疫RT-PCR检测

采用青岛立见生物科技有限公司生产的新城疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒检测新城疫病毒RNA,具体操作严格按照试剂盒说明书进行。阳性对照应出现特异性扩增曲线且C值≤35,且阴性对照无特异性扩增曲线或无C值,则判定检测结果有效。样品的扩增结果有典型的扩增曲线且C值≤35时可判定为新城疫病毒核酸阳性;C值>40或无C值时可判定为新城疫病毒核酸阴性;35

1.3 统计分析

将检测数据录入Excel 软件,按照不同年份、场点类别和区域进行统计分析描述,应用SPSS软件对统计结果进行差异性分析。

2 结果统计与分析

2.1 总体情况

2.1.1免疫抗体检测结果

鸡新城疫免疫抗体检测结果(见表3)显示:2012—2021年文山州禽新城疫免疫抗体水平均保持在75%以上,均达到农业农村部规定的免疫抗体合格率≥70%的标准,说明文山州新城疫免疫质量较好。但2021年文山州新城疫免疫抗体水平有所下降,特别是麻栗坡县新城疫免疫抗体水平仅达到58.6%,显著低于其他县(市)(P<0.05),存在发生疫情的风险,麻栗坡县应高度重视,并采取切实有效的措施,尽快提高新城疫免疫抗体水平,避免发生疫情。

表3 2012—2021年鸡新城疫免疫抗体检测合格率统计 单位:%

2.1.2病原监测结果

2012—2021年,全州8县(市)共检测鸡、鸭喉气管样品2805份,检出新城疫病毒阳性样品20份,新城疫病毒阳性率为0.71%,涉及砚山、马关、丘北、富宁四个县。从时间上看,2012年新城疫病毒阳性率最高,达到8.33%,显著高于其他年份(P<0.05),涉及砚山、马关、富宁三个县,其次是2015年、2017年和2013年,新城疫病毒阳性率分别为1.60%、0.77%、0.56%,仅涉及丘北一个县,其他年份未检出新城疫病毒阳性样品,且2018年后全州连续4年无新城疫病毒阳性样品检出。新城疫病原监测结果表明,通过多年的强化免疫,文山州新城疫带毒状况逐年改善,新城疫在文山州得到了比较有效的控制。

2.2 不同家禽情况

不同家禽新城疫病原监测结果(表4)显示:2012—2021年鸭综合阳性率为1.14%,较鸡综合阳性率高了0.8个百分点,鸭的阳性率显著高于鸡的阳性率(P<0.05),说明文山州新城疫病毒带毒状况鸭比鸡严重。

表4 2012—2021年不同家禽新城疫病原监测结果统计

2.3 不同养殖场(户)情况

不同养殖场(户)免疫抗体检测结果(表5)显示:规模场合格率显著高于散养户(P< 0.05) ,说明规模场免疫效果较好。

3 讨论

2012—2021年新城疫病原监测及免疫效果评估结果表明,随着免疫力度加大,新城疫免疫质量逐年提高,新城疫病毒带毒状况逐年改善,但鸭的带毒状况明显较鸡的带毒状况严重。这可能是因为水禽(鸭、鹅)对新城疫病毒有抵抗力,一般只带毒而不引起发病,所以长期以来大家都不够重视水禽的免疫工作导致。鸭的带毒问题逐步显现,可能会成为今后新城疫病毒难以根除的重要因素之一,值得大家讨论关注。

文山州2012—2021年新城疫整体免疫效果较好,达到了国家要求的抗体合格率70%以上标准,且2018年后连续4年无新城疫病毒阳性样品检出,说明新城疫在文山州得到了比较有效的控制。但2021年文山州新城疫免疫抗体水平有所下降,且存在一定的地区和场群差异,散养户和部分乡(镇)免疫水平偏低,存在发生疫情的风险。全州应依据地区和场群不均衡的抗体水平分布特点,制定有针对性的免疫措施,分类指导推进全州家禽新城疫防控工作,持续加强新城疫免疫,严格落实包括生物安全在内的各项防控措施,严阵以待,避免发生疫情。