参蛤益肺胶囊对 COPD大鼠氧化相关指标的影响

彭贵清 孙 钢 指导 何焕荣 江苏省苏州市中医院 (苏州 215003)

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种严重危害人类健康的呼吸系统疾病,其发生发展是一复杂的、多因素综合作用的过程,氧化-抗氧化失衡被认为是 COPD发生的重要因素之一,并受到学者们的广泛重视,成为研究热点[1]。笔者多年应用参蛤益肺胶囊治疗 COPD稳定期患者,在改善患者临床症状,运动耐力和生活质量方面都取得了很好的疗效[2],动物实验也提示本方具有一定的抑制 COPD气道炎症的作用[3]。本研究通过观察参蛤益肺胶囊对 CO PD大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛 (M DA),肺组织匀浆谷胱酐肽 (GSH)的影响,进一步探讨参蛤益肺胶囊治疗 CO PD的机理。现报道如下。

1 实验材料 1.1 动物 清洁级 SD大鼠,雄性,84只,体重 250±30g,由苏州大学医学院实验动物管理中心提供。

1.2 药物 参蛤益肺方(西洋参、蛤蚧、虫草菌丝、紫河车、川贝、参三七等组成),苏州市中医院药剂科加工,用蒸馏水分别以 25、50、100g/L浓度配置成混悬液 ,金水宝胶囊药粉用蒸馏水以 50g/L浓度配置成混悬液。

1.3 仪器与试剂 脂多糖(LPS)由美国 Sigma公司提供。M DA、SOD、GSH、考马斯亮兰蛋白定量试剂盒,由南京建成生物工程有限公司生产。熏烟箱(自制,体积 60cm×40cm×35cm)。

2 实验方法 2.1 造模及给药 将实验动物随机分为六组,即正常对照组、COPD模型组、金水宝对照组、参蛤益肺 (以下简称“参蛤组”)胶囊低、中、高剂量组,每组 14只,采用烟熏加气道内注入 LPS的造模方法建立 COPD模型[4]。除正常对照组外,其余各组大鼠分别在实验第 1d和第 14d气管注入LPS0.2mL(1mg/1mL),在实验的第 2～13d和第 15～30d,在熏烟箱内对动物予大前门牌香烟烟熏,每箱 4支,持续熏烟30min。除第 1d和第 14d外,参蛤高中低各剂量组分别以上述25、50、100g/L浓度灌胃,金水宝组以上述浓度灌胃,灌胃量1mL/100g,正常组和模型组予等量蒸馏水灌胃。

2.2 取材处理及观察指标 2.2.1 实验第 30d,抽取大鼠腹主动脉血 5mL,离心(4℃,3500r/min,10min)后,取上清液于-20℃冰箱中保存待检 M DA、SOD,按试剂盒说明操作。

2.2.2 剪开大鼠胸腔 ,分离出肺脏,滤纸吸干肺脏,称重肺脏,检测肺系数用。肺系数=肺重(g)/体重(Kg)

2.2.3 取右肺下叶组织 0.2～0.3g,制成 10%组织匀浆,离心 (4℃,5000r/min,10min)后,取上清液于 -20℃冰箱中保存待检 GSH,按试剂盒说明操作。

2.2.4 从右肺中叶相同部位取材约 0.5g,10%甲醛溶液固定,经梯度乙醇脱水,二甲苯透明 ,常规石蜡包埋,切片,苏木精-伊红(HE)染色,应用琅珈病理图像分析系统测量细支气管内径:每只大鼠选取直径约 200-400μm的小支气管,采用琅珈病理图像分析系统之测微尺测量其内径。

3 结果 3.1 参蛤益肺胶囊对大鼠氧化、抗氧化相关指标的影响。肺系数、病理定量分析见表 2,表 3。

4 讨 论 由于肺部通过呼吸和外界的氧化剂、烟雾、微尘直接接触,因此肺是氧化剂破坏的主要目标。过多的氧化物一方面直接引起气道和肺部的损伤;另一方面,通过氧化应激加剧肺部炎症。越来越多的研究证明氧化/抗氧化失衡与COPD发生发展关系密切[5]。MDA是体内自由基脂质过氧化反应的终末产物,其含量高低可反应体内自由基氧化损伤反应的强度[6]。SOD是机体清除 O2-的唯一抗氧化酶,在一定程度上代表了机体的抗氧化能力;另一重要的抗氧化剂 GSH是细胞内外消除氧化应激最主要的物质[7]。体内外的实验研究显示GSH作为一种重要的抗氧化剂,在保持气道上皮细胞完整性,抵御肺部损伤与炎症等方面起到了重要的作用[8]。GSH在远端气道肺上皮细胞内衬液中浓度比血浆中的浓度要高出许多,表明测定肺组织匀浆中 GSH含量较血液中更有价值。本研究发现参蛤益肺胶囊能降低 CO PD大鼠血清 M DA含量,提高 SOD活力及肺组织匀浆中 GSH水平。提示参蛤益肺胶囊治疗COPD疗效与其一定的抗氧化作用有关。同时,通过对实验大鼠肺系数和支气管内径的观察,表明该方能够减轻 CO PD大鼠支气管及其周围炎症,减轻肺泡气肿及支气管阻塞程度。与正常组相比:△P＜0.05;与模型组相比:▲P＜0.05。病理定量分析

表1 各组实验大鼠血清 SOD、MDA及肺组织匀浆 GSH统计表

表1 各组实验大鼠血清 SOD、MDA及肺组织匀浆 GSH统计表

与正常组相比:△P＜0.05;与模型组相比,▲P＜0.05。肺系数

表2 各组实验大鼠肺系数统计表

表2 各组实验大鼠肺系数统计表

表3 实验大鼠细支气管内径统计表

表3 实验大鼠细支气管内径统计表

与正常组相比:△P＜0.01;与模型组相比:▲P＜0.01。

中医药对 COPD的治疗已有悠久的历史,尤其对稳定期的治疗具有一定的疗效和独特优势。参蛤益肺胶囊是我们经多年临床观察,疗效确切的中药复方。现代药理研究也表明,其组成药物西洋参、蛤蚧、紫河车、虫草菌丝均具有抗氧化的作用。结合以往研究,表明参蛤益肺胶囊多方面的综合作用可以减缓病情发展,改善患者临床症状,提高生活质量,其作用机理值得进一步研究。

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[3]孙 钢,吕志坚,茅彩萍,等.参蛤益肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症因子的影响 [J].中国中医药信息杂志,2007,14(2):37-38.

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