灵芝孢子油对大鼠骨骼肌收缩作用的影响

李如海 贺永贵 崔 永 许青松◇ 金元哲

吉林省安图县中医院(安图 133600)

灵芝是我国传统的补益中药,被历代医家视为滋补强壮、扶正固本、延年益寿之珍品。灵芝别名赤芝、红芝、木灵芝、菌灵芝、万年蕈、灵芝草,为多孔蓖科真菌灵芝,夏、秋季多生于林内阔叶树的木桩旁,或木头、立木、倒木上,有时也生于针叶树上,其孢子卵圆形,8cm～11cm×7cm,壁两层,内壁褐色,表面有小疣,外壁透明无色,长白山原始森林中有着广泛分布。现代研究表明灵芝具有调节血脂、增强免疫、抗肝纤维化、抗肿瘤等多种功效[1-4]。灵芝孢子油是采用破壁方法,直接从孢子粉中提纯的脂溶性物质,高度集中了灵芝孢子原生质的三菇类、多糖类、核苷类等有效成分。本研究以大鼠为研究对象,观察了长白山地产灵芝孢子油对在体骨骼肌收缩作用的影响。

1 材料与方法 1.1 材料 实验动物:选用体重 200～240gWistar雄性大鼠 40只,由延边大学医学部实验动物科提供。药品与试剂:长白山地产灵芝孢子粉,经破壁、提取而得精制灵芝孢子油,由延边圣霖菌业有限公司制备。实验仪器:RM6240生物机能实验分析系统为成都仪器厂产品。

1.2 方法 1.2.1动物分组及给药:将 40只 Wistar雄性大鼠随机分为对照组、灵芝孢子油小、中、大剂量组,每组 10只。分别灌胃给与生理盐水、灵芝孢子油 0.25g/kg、0.50g/kg、1.00g/kg,1次 /d,连续灌胃 15d。第 15d灌胃 1h后,进行在体骨骼肌收缩力学实验。

1.2.2 大鼠骨骼肌模型制备:于最后 1次灌胃 1h后 ,参照文献的方法进行手术制备在体带有神经支配和血液供应的大鼠骨骼肌标本[5-6]。

1.2.3 大鼠骨骼肌收缩指标测定:用 RM6240生物机能实验系统测定大鼠骨骼肌收缩指标。分别把腓肠肌和比目鱼肌肌腱上的结扎线与张力换能器的金属片相连,结扎线的走行应与肌肉原始自然位置一致,牵拉肌肉至自然状态下的长度。打开RM6240系统电源,调节张力换能器的零点。将 RM6240系统刺激器的输出与双极氯化银刺激电极相连,并把刺激电极悬空搭在坐骨神经干上。选择刺激器的刺激参数,波宽 0.2ms、延迟1min、刺激频率根据需要使用单刺激或连续刺激。连续刺激的频率 f= (T/1000)×20(T=骨骼肌单收缩时的收缩时间)。刺激强度在单刺激时从零开始逐渐递增,寻找引起骨骼肌发生最大收缩的最小刺激强度(Ti)。测定指标:①单收缩:利用 2倍于最大刺激的刺激强度,观察测得骨骼肌收缩的单收缩曲线的潜伏期(CT)、收缩幅度(Pt)和 1/2舒张时间(HRT)。②强直收缩:利用 2倍于最大刺激的刺激强度给予连续刺激后测得强直收缩曲线的潜伏期(CT)、收缩幅度(Pt)。

2 实验结果 2.1 灵芝孢子油对大鼠骨骼肌单收缩刺激强度的影响 灵芝孢子油小、中、大剂量组与空白组比较,大鼠腓肠肌和比目鱼肌单收缩时的最大收缩的最小刺激强度均明显降低(P＜0.05);腓肠肌单收缩时中剂量组 1/2舒张时间与空白组比较明显缩短(P＜0.05),见表 1、3。

2.2 灵芝孢子油对大鼠骨骼肌收缩潜伏期的影响 2.2.1腓肠肌:灵芝孢子油中、大剂量组与空白组比较,大鼠腓肠肌单收缩和强直收缩的潜伏期均明显缩短 (P＜0.05),见表 1、2。

2.2.2 比目鱼肌:灵芝孢子油中、大剂量组与空白组比较,大鼠比目鱼肌单收缩的潜伏期明显缩短(P＜0.05);在强直收缩时,灵芝孢子油小、中剂量组与空白组比较,比目鱼肌收缩的潜伏期明显缩短(P＜0.05)。

2.3 灵芝孢子油对大鼠骨骼肌收缩幅度的影响大鼠腓肠肌和比目鱼肌单收缩和强直收缩的收缩幅度各给药组与空白组比较均无显著差异(P＞ 0.05),见表 3、4。

表1 灵芝孢子油对大鼠腓肠肌单收缩的影响(,n=10)

表1 灵芝孢子油对大鼠腓肠肌单收缩的影响(,n=10)

与对照组比较,△ P＜0.05。

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表2 灵芝孢子油对大鼠腓肠肌强直收缩的影响(,n=10)

表2 灵芝孢子油对大鼠腓肠肌强直收缩的影响(,n=10)

与对照组比较,△ P＜0.05。

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表3 灵芝孢子油对大鼠比目鱼肌单收缩的影响(,n=10)

表3 灵芝孢子油对大鼠比目鱼肌单收缩的影响(,n=10)

与对照组比较,△ P＜0.05。

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表4 灵芝孢子油对大鼠比目鱼肌强直收缩的影响(,n=10)

表4 灵芝孢子油对大鼠比目鱼肌强直收缩的影响(,n=10)

与对照组比较,△ P＜0.05。

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3 讨 论 增强骨骼肌收缩力和速度药物的研究和开发是当前运动医学、航天医学、军事医学、老年医学和康复医学等领域密切关注和面临的课题之一。一些化学药品和生物制品在提高运动能力方面确有较好的效果,但是由于某些这类药物含有兴奋剂等可能对机体造成危害的成分而使其应用受到很大限制。在寻找安全和有效的药物时,中国传统的中草药由于副作用少,不含对人体有害的兴奋剂成分而成为研究的热点。灵芝是一种真菌,作为药用已有悠久历史,可灵芝防治多种疾病,如慢性支气管炎、高血脂症、高血压病、神经衰弱、肝炎、白细胞减少、肿瘤的辅助治疗等。近年来随着孢子采集、破壁技术的发展,对灵芝孢子的化学成分、药理作用及作用机制的研究逐渐增多。现代研究发现灵芝孢子中含有三萜类、多糖类、氨基酸多肽类、甾醇类、生物碱类、脂肪酸类、维生素类、无机离子等多种化学成分,具有免疫调节、抗肿瘤、抗艾滋病毒、生镇静催眠、保肝、改善肝纤维化、抑制胃溃疡的形成、提高机体抗缺氧能力、清除自由基等多种药理作用[7-9]。另外,王满福等[10,11]的研究结果灵芝对运动员还具有较好的抗疲劳效果,能加快血乳酸清除,提高机体耐酸能力。本研究灌胃给与 Wistar雄性大鼠长白山地产灵芝孢子油后,制作在体坐骨神经-骨骼肌标本,观察刺激坐骨神经时腓肠肌和比目鱼肌收缩作用的影响,结果0.25g/kg、0.50g/kg、1.00g/kg3个给药组腓肠肌和大剂量组比目鱼肌的单收缩的最大收缩的最小刺激强度均减小;单收缩和强直收缩的潜伏期均缩短(P＜0.05),而收缩幅度无明显变化(P＞0.05);0.50g/kg组腓肠肌 1/2舒张时间明显延长(P＜0.05)。实验结果表明灵芝孢子油能在一定程度上降低骨骼肌收缩的最小刺激强度,缩短骨骼肌收缩的潜伏期,提高骨骼肌刺激传导的速度,提示可能与增强骨骼肌收缩的敏感度有关,其中以 0.50g/kg、1.00g/kg剂量作用较为明显,其机制尚有待于进一步研究。

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[10]王满福,胡淑萍.灵芝液对运动员抗疲劳效果的实验观察 [J].中国运动医学杂志,1999,18(1):78-79.

[11]王满福.灵芝液对运动员抗疲劳效果的试验观察[J].中国医药杂志,2004,1(3):165-166.