蓬子菜有效部位总黄酮的急性毒性实验研究

崔明宇，孙志伟，王艳，马英丽

(黑龙江中医药大学，黑龙江中医药大学北药基础与应用研究省部共建教育部重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150040)

蓬子菜(Galium verum L.)为茜草科(Rubiaceae)拉拉藤(Galium)属植物蓬子菜的干燥全草，又名鸡肠草、黄牛尾、黄花米等。在我国东北地区分布广泛，资源丰富。蓬子菜在东北民间有广泛的药用基础，性温，味苦、甘，具有清热解毒、行血、利湿止痒之功效，即可内服又可外用，用于治疗肝炎、稻田皮炎、跌打损伤、荨麻疹、妇女血气痛等。临床用其治疗周围血管病取得良好疗效［1］。研究表明，蓬子菜总黄酮为治疗周围血管病的有效部位，为保证临床用药的安全性，为新制剂的开发提供可靠的安全性资料，本实验对蓬子菜总黄酮灌胃给药的急性毒性进行评价。

1 材料

1.1 药品

蓬子菜总黄酮提取物(本实验室自提，总黄酮含量57%)，以0.5%CMC溶液配制成最大给药浓度(约含蓬子菜总黄酮0.50g/mL)。

1.2 实验动物

昆明种小鼠80只，雌雄各半，5～6周龄，体质量18～22g，购自黑龙江中医药大学药物安全评价中心，动物合格证号:SYXK黑2008001。雌雄分笼饲养，每笼5只，自由饮水和进食，室温18～20℃，相对湿度50%，实验室观察1周。

2 方法与结果［2－3］

2.1 预实验

昆明种小鼠20只，雌雄各半，实验前禁食不禁水12h，分设实验组与对照组，实验组以最大给药浓度、最大给药剂量(0.3mL/10g)一次灌胃蓬子菜总黄酮，给药后立即观察动物中毒症状，连续观察7天，期间观察小鼠死亡数和一般情况。对照组灌胃等量0.5%CMC溶液，余同给药组。

2.2 最大耐受量的测定

昆明种小鼠60只，实验前禁食不禁水12h，按性别和体质量随机分成3组，雌雄各半，每组20只。分别设对照组、实验一组、实验二组，对照组给予同量0.5%CMC溶液，实验组以最大给药浓度、最大给药剂量(0.3mL/10g)灌胃，其中实验一组每日灌胃1次，实验二组每日灌胃2次(间隔8h)，灌胃1日。连续观察7日，详细观察与记录对照组、实验组体重、饮食、精神状态、大便和皮肤毛色变化情况。实验结束时，将全部动物处死、解剖、尸检，肉眼检查主要脏器组织有无异常病变情况，计算最大耐受量(MTD)。

2.3 结果

在预实验中，小鼠以最大给药浓度和最大给药剂量灌胃后，观察1周，无1例死亡，小鼠活动和饮食状况良好，因此测不出LD50，故进行最大耐受量(MTD)测定。以最大给药浓度和最大给药剂量分别进行灌胃给予蓬子菜总黄酮提取物，实验中发现，小鼠在第1次灌胃后均无异常现象，而在第2次灌胃后有部分小鼠出现自主活动减少现象，但无竖毛、抽搐、惊厥、翻倒等异常现象，且在灌胃后1～4h后活动恢复正常。灌胃后的小鼠连续观察7日，小鼠灌胃后的体质量、四肢活动、精神、毛发、饮水、粪便、尿液情况见表1，2。7日后处死受试小鼠并解剖、尸检，肉眼观察心、肝、脾、肺、肾等主要脏器，外观未见异常改变。结果，小鼠口服蓬子菜总黄酮MTD为30g/kg/d。

表1 蓬子菜总黄酮急性毒性试验小鼠体质量变化(g，±s，n=10)

表1 蓬子菜总黄酮急性毒性试验小鼠体质量变化(g，±s，n=10)

组别 性别 实验前 第1天 第3天 第5天 第7天对照组 雌 20.76 ±1.61 20.9 ±1.62 22.1 ±1.76 22.58 ±1.58 23.16 ±1.59雄 20.38 ±1.1120.78 ±1.1321.38 ±1.2122.06 ±1.26 22.86 ±1.22实验 雌 21.99 ±1.5722.21 ±1.6122.77 ±1.6623.31 ±1.55 23.81 ±1.67一组 雄 21.05 ±1.7221.31 ±1.7321.92 ±1.5922.44 ±1.62 23.01 ±1.60实验 雌 21.80 ±1.5722.01 ±1.5822.44 ±1.6322.82 ±1.66 23.23 ±1.64二组 雄 21.76 ±1.5921.95 ±1.5822.39 ±1.5722.89 ±1.54 23.31 ±1.45

3 讨论

由表1可以看出，实验组小鼠体质量的增加比对照组略少，可能为灌胃操作刺激或药物本身对小鼠食欲造成一定影响，应通过长期毒性试验做进一步考察。

由表2可知，小鼠灌胃后的四肢活动、精神、饮水、尿液情况均正常，但灌胃后前3日粪便颜色加深，3～4日后转为正常，应该为药物排泄所致。

小鼠灌胃后，对照组与雄性实验组毛发正常，但雌性实验组在灌胃后，毛发更为整齐和光亮，提示蓬子菜总黄酮提取物可能具有雌激素样作用，此项药理作用还有待进一步通过实验对其进行验证。

表2 蓬子菜总黄酮急性毒性试验小鼠反应情况(±s)

表2 蓬子菜总黄酮急性毒性试验小鼠反应情况(±s)

组别 四肢活动 精神 毛发 饮水 尿液 粪便 死亡对照组 雌 正常 正常 正常 正常 正常 正常0雄 正常 正常 正常 正常 正常 正常 0实验 雌 正常 正常 光亮 正常 正常 便色加深3日后正常0一组 雄 正常 正常 正常 正常 正常 便色加深3日后正常0实验 雌 正常 正常 光亮 正常 正常 便色加深4日后正常0二组 雄 正常 正常 正常 正常 正常 便色加深4日后正常0

小鼠口服蓬子菜总黄酮MTD为30g/kg/d，如按临床剂量，蓬子菜总黄酮成人(60kg)每日1.5g计算，小鼠MTD相当于60kg体重成人临床日用量的132倍。说明蓬子菜总黄酮的急性毒性很小，临床用药的安全性较大。

由于急性毒性实验是在1日内给药1次或数次，且观察时间也比较短，虽然蓬子菜急性毒性实验结果表明其具有较高的安全性，但其安全性评价还应结合长期毒性实验做进一步验证，以全面保证临床用药的安全性。

［1］ 赵钢，吕勃川，孙秋，等.蓬子菜水溶液对股动脉硬化闭塞症家兔模型血清 C－反应蛋白的影响［J］.中医药学报，2010，38(1):20－22.

［2］ 刘霞，王军永，张佐.双向固体发酵后雷公藤菌质的急性毒性研究［J］.中医药学报，2011，39(2):33 －35.

［3］ 李冀，王联政，沈德凤，等.安体舒哥胶囊的急性毒性实验研究［J］.中医药学报，2010，38(1):42－43.