甲硝唑和替硝唑体外抑制阴道毛滴虫疗效比较

毛明辉，侯欣喜，刘 俊，张欢欢，万殊岑，徐 慧，毛川江，杨宗琪，赵 勇

（川北医学院 病原中心，四川 南充637007）

阴道毛滴虫主要寄生在人体的阴道及泌尿道，易引起滴虫性阴道炎、前列腺炎等疾病，并与其他性传播疾病共同影响人类健康，甚至导致不孕不育。甲硝唑为治疗滴虫性阴道炎的首选药物，但近年来表现出高耐药性。本实验特将甲硝唑和替硝唑作比较，以期为临床治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 药物

甲硝唑注射液（100mL：0.5g，四川科伦药业股份有限公司，产品批号：C090524－B2），替硝唑注射液（100mL：0.4g，四川科伦药业股份有限公司，产品批号：C090921－G1）。现配现用。

1.2 肝浸汤的制备［6］

成分：牛肝15g、氯化钠0.5g、蛋白胨2g、半胱氨酸盐酸盐0.2g、麦芽糖1g及蒸馏水100mL。制法：将牛肝15g切成小块，于100mL蒸馏水中置4℃冰箱内过夜，次日煮沸1h，过滤取滤液，不足100mL用蒸馏水补足。每100mL滤液分别加入上述营养成分，加热溶解，调节pH至6.0［7］，8磅压力下消毒20min后，于37℃恒温箱密闭培养24h，证明无菌后即加青霉素使其浓度为1万U／mL［6］，冰箱冻存。临用前加无菌灭活牛血清20%。

1.3 虫株及提纯

阴道毛滴虫来自川北医学院附属医院妇科门诊患者，取确诊患者阴道后穹窿分泌物于5mL培养基（1mL灭活无菌牛血清＋4mL含青霉素30万U／mL，链霉素2万U／mL的肝浸汤）中37℃下培养12h，后连续转种于含青霉素浓度为10万U／mL，链霉素浓度为1万U／mL的肝浸汤中37℃下培养至染色涂片无菌即可。

1.4 体外药敏实验

设置A、B、C组，培养基均为5mL（1mL灭活无菌牛血清＋3.5mL肝浸汤含青霉素和链霉素各5万U＋0.5mL稀释的药液）。A、B组为实验组，C为空白对照组。A组加无菌生理盐水稀释的甲硝唑0.5mL，B组加同样稀释的替硝唑0.5mL，C组加入无菌生理盐水0.5mL。A、B组的抗毛滴 虫 药 物 浓 度 都 设 为 5μg／mL、50μg／mL、100μg／mL、200μg／mL、500μg／mL、1 000μg／mL、1 500μg／mL、2 000μg／mL，且每个浓度下均设10支试管。将A、B、C三组放于37℃恒温箱培养24h，混匀后用血球计数板观察活虫，计算相对抑制率。相对抑制率＝活虫数／总虫数×100%。

2 结果

2.1 甲硝唑、替硝唑的效果比较

空白对照组的活虫率均在90%以上，结果见表1。

表1 甲硝唑、替硝唑的效果比较

2.2 甲硝唑和替硝唑的量—效曲线

甲硝唑和替硝唑的量—效曲线，结果见图1。

图1 甲硝唑和替硝唑的量—效曲线

3 讨论

本实验中使用的甲硝唑具广谱抗厌氧菌和抗原虫的作用，是治疗滴虫性阴道炎的首选药，但其在体内作用效果因其半衰期短、生物利用度小等原因而逊于替硝唑，且副作用也很大。替硝唑是WHO推荐的集体和个人治疗滴虫性阴道炎最佳选择。从实验结果可知，同浓度下甲硝唑的相对抑制率低于替硝唑，这与邵启祥等［5］报道相似。两药浓度在5μg／mL、500μg／mL、2 000μg／mL时，甲硝唑的相对抑制率分别为3.2%、16.4%、60.8%；替硝唑的相对抑制率分别为4.2%、21.3%、76.4%，此说明随两药的浓度升高其药效也不断增强。对此，毛维丹等［4］的报道中也有相似结论。当浓度为200μg／mL及以下时，甲硝唑的相对抑制率与替硝唑差异不大；当两药物浓度高于200μg／mL时，替硝唑作用明显好于甲硝唑且两药均不超过20%；当浓度高于500μg／mL时，两药体外抑制阴道滴虫的作用效果明显增强且甲硝唑和替硝唑在2000μg／mL时分别达到60.8%和76.4%，效果显著。其体外抗阴道毛滴虫报道中，刘淑英等［3］已证实在3μg／mL时作用效果不及甲硝唑，而据邵启祥等［5］报道，同剂量下，甲硝唑效果均不及替硝唑。本实验结果与邵启祥等［5］相似，而与刘淑英［3］有差别，这可能与药物剂型和虫株等有关。阚全程（1999）［2］、刘淑英等（2003）［3］均报道替硝唑为6μg／mL，甲硝唑为3μg／mL时虫体全部死亡；王芃芃（1995）［1］报道的甲硝唑和替硝唑的致死浓度均在5μg／mL；邵启祥［5］报道两种药物的 MIC和 MBC分别为甲硝唑阴道泡腾片是50μg／mL和100μg／mL，而替硝唑为25μg／mL和50μg／mL，两药同效果下浓度相差一倍；毛维丹［4］报道甲硝唑在2 500μg／mL时抑制率为51.2%；本实验在2 000μg／mL时甲硝唑和替硝唑分别为60.8%和76.4%。从引用文献和本实验看，替硝唑和甲硝唑抑制阴道毛滴虫的浓度从几微克到几千微克不等，各自杀虫效应虽可能与虫株的耐药性以及药物的剂型等因素有关，但是从时间上看，阴道毛滴虫的耐药性在增强趋势非常明显，这足以引起临床医务工作者对阴道毛滴虫的耐药性以及合理用药的重视。

［1］王芃芃，邓珊珊，严晓岚.替硝唑体外抗阴道毛滴虫试验［J］.实用寄生虫病杂志，1995，3（3）：120－121.

［2］阚全程，于 玲，马春会.替硝唑栓体内外抗阴道毛滴虫作用［J］.中国现代应用药学，1999，16（2）：62－64.

［3］刘淑英，于 玲.替硝唑栓体内外抗阴道毛滴虫作用研究［J］.临床医学，2003，23（4）：57－58.

［4］毛维丹，梁菲菲，孙贝蒂，等.3种药物体外抗阴道毛滴虫作用比较观察［J］.应用预防医学，2008，14（4）：200－202.

［5］邵启祥，李良菊，李卫竞，等.替硝唑阴道泡腾片体内外抗阴道毛滴虫感染的实验研究［J］.镇江医学院学报，1998，1（8）：5－6.

［6］徐露，王宇学，周玉娟.肝浸汤培养阴道毛滴虫的改进［J］.实用医技杂志，2008，15（18）：2 366－2 367.

［7］郭步平，李宇飞.不同pH肝浸汤培养基培养阴道毛滴虫的观察［J］.中国病原生物学杂志，2006，1（1）：20－21.