高效液相色谱法测定小儿咳喘口服液中绿原酸的含量

邓云天 时东海

（1 江苏省苏州君安药业有限公司，苏州215129；2 江苏省苏州雷奥生物科技有限公司，苏州215104）

高效液相色谱法测定小儿咳喘口服液中绿原酸的含量

邓云天1时东海2

（1 江苏省苏州君安药业有限公司，苏州215129；2 江苏省苏州雷奥生物科技有限公司，苏州215104）

目的 建立高效液相色谱法测定小儿咳喘口服液中绿原酸的含量。方法 Agela Promosil C18（250mm×4mm，5μm)分析柱，流动相为乙腈∶1%冰醋酸（11∶89），流速为1.0ml•min-1，检测波长为327nm。结果 绿原酸与其他组分分离良好。线性范围为0.1032～1.032μg，相关系数r=0.9998，平均加样回收率为98.93%（RSD= 0.4%）。结论 本法简便、准确可靠，可用于该药的质量控制。

高效液相色谱；小儿咳喘口服液；绿原酸

1 仪器与试药

仪器高效液相色谱仪戴安U3000，Sartorias电子天平（CPA-225D）；绿原酸（110753-200413），中国药品生物制品检定所提供小儿咳喘口服液为市售品；试药甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：Agela Promosil C18 (4.6mm× 100mm，5μm)；流动相：乙腈∶1%冰醋酸（11∶89），流速为1.0mL•min-1，检测波长为327nm，柱温为30℃，进样量10μl。

2.2 溶液的制备 精密称定绿原酸对照品10.32mg，用甲醇制成浓度为20.64μg•mL-1的溶液，作为对照品溶液（见图1）。精密量取本品1ml，精密加入60%甲醇1ml摇匀，作为供试品溶液（见图2）。按处方中称取除金银花外的药材适量，照文献[1]中方法制得阴性对照溶液（见图3）。

2.3 标准曲线的绘制 在上述条件色谱下，精密吸取上述对照品溶液5、10、20、30、50μl，注入液相色谱仪，测得峰面积。以对照品峰面积为纵坐标，以进样量为横坐标作标准曲线，并以最小二乘法计算得回归方程：Y = 321451X+6851，Y =0.9998，绿原酸在0.1032μg～1.032μg范围内有良好线性关系。

2.4 精密度试验 取同供试品溶液，连续进样6次，结果绿原酸RSD为0.68%（n=6）。

2.5 稳定性试验 取供试品溶液，间隔4h进样1次，共间隔24h，结果绿原酸RSD为1.01%（n=7）。

2.6 重复性试验 取同一批号样品6份，分别按本法处理后进行测定，结果绿原酸平均含量为41.11μg•ml-1，RSD为1.33%（n=6）。

2.7 加样回收试验 精密量取已知含量的小儿咳喘口服液6份1ml，精密加入对照品溶液1ml、1ml、2ml、 2ml、3ml、3ml，照本法制备供试品溶液，按本法进行含量测定并计算回收率见表1。

2.8 样品的测定 精密量取3个批号的样品各2份，按本法制得供试品溶液，按本法进行含量测定结果批号为20111203，20111010，20120111的样品绿原酸含量分别为41.11μg•ml-1，39.41μg•ml-1，45.37μg•ml-1。

3 讨论

曾用不同比例甲醇-0.4%磷酸，甲醇-1%冰醋酸，乙腈-0.4%磷酸，乙腈-1%冰醋酸作为流动相进行试验，其中以乙腈-1%冰醋酸作为流动相，绿原酸保留时间适中，而且能有效抑制绿原酸拖尾现象，基线平稳，绿原酸峰处无干扰杂质峰。该方法简单准确，可行，可用于绿原酸的质量控制。

表1 样品中绿原酸回收率试验结果（n=6）

图1 对照品

图2 样品

图3 阴性对照

[1] 中国国家药典委员会·中华人民共和国药典2010年版一部[S].北京:化学工业出版社,2010:485

Determination of Chlorogenic Acid Pediatric Kechuan Oral Liquid By HPLC

Deng yuntian1Shi donghai2(1 Jiangsu Suzou Junan Medical Corporation,Suzhou 215129,China; 2 Jiangsu Suzou Leiao Biological Science and Technology Ltd, Suzhou 215104 ,China)

Objective To establish a HPLC method for the determination of pediatric Kechuan oral liquid on the content of chlorogenic acid. Methods Agela Promosil C18(250mm×4mm,5μm) column, the mobile phase consisted of acetonitrile -1% glacial acetic acid (11∶89), the flow rate was 1.0ml•min-1, the detection wavelength was 327 nm. Results Chlorogenic acid and other components were separated well. The linear range was 0.1032～1.032μg, the correlation coefficient r=0.9998, the average recovery rate was 98.93% (RSD= 0.4%). Conclusion This method is simple, accurate and reliable, and can be used for the quality control of drugs.

High performance liquid chromatography; Pediatric Kechuan oral liquid; Chlorogenic acid

10.3969/j.issn.1672-2779.2012.15.108

1672-2779（2012）-15-Ⅲ-01

苏玲

2012-06-07）