针刺对肥胖大鼠胰岛素抵抗状态的干预作用

老锦雄 邓 聪

(佛山市中医院针灸科，广东 佛山 528000)

肥胖的发生，除与不良生活习惯和遗传因素有关外，胰岛素抵抗是导致肥胖的最主要原因〔1〕。针灸治疗虽显示出良好的减肥及纠正IR的临床效果，但是防治肥胖、纠正IR的机制尚不十分明确。本文通过针刺对肥胖模型大鼠进行治疗性干预，同时动态观察胰岛素抵抗相关指标的变化，阐明针刺治疗肥胖的作用机制，探讨其纠正胰岛素抵抗的机制，为针灸治疗肥胖提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 动物与饲料 选用健康SD大鼠60只，雌雄各半，SPF级，体重200～250 g，广州中医药大学实验动物中心提供。实验动物使用许可证号:syxk(粤)2008-0001。动物合格证号:0099165。高脂饲料的配置:基础饲料50%，猪油23%，蔗糖15%，鸡蛋黄12%，广州市花都区花东信华实验动物养殖场提供。

1.2 分组与造模 在室内适应性喂养1 w后，随即数字表法选取10只，雌雄各半，用普通饲料喂养，作为空白组(CG);另外50只，雌雄各半，用高脂饲料喂养，喂养60 d，制作单纯性肥胖大鼠模型。大鼠的体重超过同期普通饲料喂养大鼠体重的20%作为单纯性肥胖症实验肥胖大鼠。

将造模成功的肥胖大鼠随机分为模型组(MG)、穴位组(AG)、非穴位组(NG)，每组10只，雌雄各半。

穴位组:将大鼠捆绑于自制的固定器中，取中脘、足三里(双侧)、三阴交(双侧)穴位〔2〕，用0.25 mm ×13 mm 毫针刺约2 mm、7 mm、4 mm，平补平泻后，同侧穴位接通G6805-1A型低频电子脉冲治疗仪，采用疏密波，采用频率5～10 Hz，强度以针柄震动引起穴位局部轻轻抽动为度，留针20 min，每日1次，连续进行1个月。

非穴位组:选取大鼠以上穴位旁开0.5 cm处的非经非穴点针刺，余加电、强度、时间等均同穴位组。

空白组、模型组:用同样方式每日将大鼠捆绑于自制的固定器中，捆绑时间同针刺组，以排除应激因素引起的实验偏倚，其余不作处理。

实验期间，每天观察各组大鼠摄食、饮水情况及活动状态。每周测量各组大鼠的体质量、体长，并据此计算Lee's指数〔Lee's指数=体重(g)1/3×103/体长(cm)〕，Lee's指数的大小反映大鼠体脂的含量。

1.3 标本采集及检测 造模成功后，取正常饲料组与高脂饲料组大鼠眼眶采血;实验结束后，各组大鼠禁食12 h过夜，次日各组大鼠经10%水合氯醛麻醉〔(0.3～0.4)ml/100 g〕后，摘除眼球取血，收集血液样本，分离血清，以3 500 r/min转速离心后取上清液，密封于-4℃冰箱内，备用。

血清用于检测INS、FBG、C肽值等指标。血清空腹葡萄糖测定采用葡萄糖氧化酶法，胰岛素测定采用ELISA法，操作严格按照试剂盒步骤进行。

1.4 统计学处理 采用SPSS17.0软件进行分析。计量资料以x±s表示。多个样本均数比较采用方差分析，多个样本均数间两两比较采用q检验。两变量相关性采用Pearson相关分析。

2 结果

2.1 各组大鼠的一般情况 实验前8 w，饲养高脂饲料组大鼠体质量增加迅速，活动稍减少，毛色白中带油亮，较普通饲料组大鼠的粗糙，粪便较普通饲料组的黏、味臭。实验第9、10周，模型组大鼠活动明显减少，体型肥胖。第11、12周穴位组、非穴位组大鼠体质量增加减慢，尤以穴位组大鼠较明显。

2.2 各组大鼠体质量、体长、与Lee's指数 各组大鼠的体质量、体长与Lee's指数随着周龄增长而增加。第8周末，MG、AG、NG组的体质量与Lee's指数均较同周龄的CG组大鼠明显增高(P＜0.05)，表明造模成功;而MG、AG、NG组之间体质量与Lee's指数比较，无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

在第9周，穴位组、非穴位组大鼠的体质量与Lee's指数增长的幅度随着周龄增长而减少，而空白组无明显变化，模型组则继续增长。第12周末，即治疗结束后，穴位组与模型组比较明显下降(P＜0.01)，但非穴位组无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

2.3 各组大鼠的FBG、INS、ISI比较 针刺前，非穴位组、穴位组与模型组大鼠的FBG、INS均较空白组升高(P＜0.05)，ISI降低(P＜0.05);而非穴位组、穴位组与模型组之间则无差异(P＞0.05)。见表3。

表1 第8周末各组大鼠体质量、体长与Lee's指数比较(x±s)

与空白组相比:1)P＜0.05，2)P＜0.01;与模型组相比:3)P＜0.01，4)P＜0.05;与非穴位组相比:5)P＜0.05，6)P＜0.01

表3 第8周末各组大鼠FBG、INS与ISI的比较(x±s)

表4 针刺后各组大鼠FBG、INS与ISI的比较(x±s)

实验结束后，模型组的FBG、INS均较空白组显著升高(P＜0.01)，ISI显著降低(P＜0.01);穴位组、非穴位组大鼠的FBG、INS较模型组有不同程度的降低(P＜0.01，P＜0.05)，ISI升高(P＜0.05);穴位组较非穴位组FBG降低(P＜0.01)，INS降低，ISI增高(P＜0.05);穴位组各指标与空白组比较，差异均无显著性意义(P＞0.05)。针刺后模型组的C肽〔(315.53±19.73)mmol/L〕较空白组〔(280.11±11.20)mmol/L〕高(P ＜0.01)，穴位组 〔(289.84 ±18.66)mmol/L〕较非穴位组〔(295.31±19.29)mmol/L〕及模型组低(P ＜0.05，P ＜0.01)。

3 讨论

肥胖，根据中医基础理论，其病机在于脾虚为本，痰湿为标，治疗应以健脾利湿化痰为主〔3〕。《素问·调经论》日:“形有余则腹胀，泾溲不利;不足则四肢不用……形有余则泻其阳经，不足则补其阳络。”脾主肌肉，形有余则肥胖，脾与胃相表里，泻其阳经即泻阳明胃经，说明治疗肥胖病，应以泻阳明经为主，这为针灸减肥取脾胃经穴位以泻胃健脾奠定了理论基础。本实验选择中脘、足三里(后三里)、三阴交。脾为足太阴经，胃为足阳明经，二者同居中焦，承上启下，互为表里，脾主升清，胃主通降，系全身气机升降之枢;枢机通畅，则三焦条畅，枢机不利，则上下不宁。加上任脉理中焦，调升降。中脘、足三里健脾化湿，三阴交能调节三阴，健脾和胃，养肝益肾;如此配合运用具有健脾利湿，豁痰降浊之功，使脾胃功能健运，饮食水谷得以输布畅达，则身轻体健;相辅相成，相得益彰。

胰岛素抵抗是指胰岛素在促进葡萄糖摄取方面功能受损，导致一定量的胰岛素产生的生物学效应低于预计正常水平。它不仅与肥胖、高血压、糖尿病以及心脑血管疾病、脂质代谢异常等病的发生密切相关，而且还存在于妊娠、肿瘤、感染等多种生理或病理中。针刺可以改善胰岛素抵抗，是众多学者在研究针刺治疗非胰岛素依赖型糖尿病、肥胖、高血压等疾病的过程中发现的。本研究结果发现针刺可以逆转胰岛素抵抗模型大鼠的高血糖、高胰岛素血症，提高胰岛素敏感性指数。而本文观察的C肽是一个颇具临床意义的重要指标，C肽是含31个氨基酸的多肽，它和胰岛素是胰岛β细胞以1∶1等分子分泌后进入门静脉血，经过肝脏时，C肽几乎不被摄取(＜5% ～10%)，而胰岛素大部分被肝脏所摄取，外周血中的胰岛素只代表肝脏释出的胰岛素量，所以测定外周血中的C肽可大体反映β细胞的分泌量〔4〕。临床上2型糖尿病早期表现为胰岛素抵抗，以高胰岛素血症为主，C肽也有所上升，而进一步发展至胰岛β细胞功能衰竭时，胰岛素和C肽均下降〔5〕。本文结果提示针刺可显著降低胰岛素抵抗状态肥胖模型大鼠的血清C肽值，这可能与针刺具有良好的调节内分泌的作用有关。

1 曲 伸.2型糖尿病现代治疗进展〔J〕.上海医学，2010;33(8):731-6.

2 李忠仁.实验针灸学〔M〕.北京:中国中医药出版社，2008:255-6.

3 孟云凤，周美启.肥胖病针灸从脾论治〔J〕.针灸临床杂志，2003;19(7):35.

4 王国洪，许瑞吉，张中书，等.血清C肽浓度测定临床意义探讨〔J〕.放射免疫学杂志，2006;19(1):15-7.

5 葛 军，俞春芳，孙卫东，等.不同空腹血糖状态人群的C肽值意义〔J〕.上海医药，2005;28(6):472-4.