不同产地、不同生长期红景天中总多糖的含量分析

何宝佳，魏 蔚

（皖南医学院，安徽 芜湖 241000）

不同产地、不同生长期红景天中总多糖的含量分析

何宝佳，魏 蔚

（皖南医学院，安徽 芜湖 241000）

目的：测定不同产地、不同采收期红景天总多糖含量变化，以确定其最佳采收期.方法：采用蒽酮-硫酸比色法，以葡萄糖作为对照品，在620nm波长下测定吸光度，对不同产地、不同采收期红景天多糖含量进行测定.结论：不同产地红景天的总多糖含量不同，西藏大花红景天的含量最高，然后依次是青海大花红景天，西藏圣地红景天，四川大花红景天，临江高山红景天.临江不同采收期的高山红景天的总多糖含量有差异，建议采收高山红景天的适宜时间为7-9月，尤以9月左右为宜.从回收率和精密度可看出,蒽酮－硫酸比色法是一种常用的测定方法，该方法简便、可靠、易行.

红景天；总多糖；含量分析

红景天系蔷薇目景天科（Crassulaceae）红景天属（Rhodiola），多年生草本或亚灌木植物的干燥根及根茎[1]，红景天属植物,素有“高原人参”和“雪山仙草”之称.长期以来,民间用其根茎熬水、泡酒可消除疲劳,抵御严寒，公元1200年的著名藏医经典《四部医典》中就记载红景天“性凉、清热、滋补元气”,称红景天治病具有神效；《晶珠本草》、《藏药图鉴》中记载红景天能治疗咳血和妇女白带等病症；《本草纲目》草部第20卷中注明红景天为“草本上品”,主要功效是扶正固本、补气养血、清热润肺[2].在国外前苏联将红景天作为“适应原”样药物，用于宇航员、飞行员、潜水员、运动员等消除疲劳，增强体力.在此启迪下，近年来国内将红景天作为强身健体的药物逐步进行深入研究和开发，已有了多种制剂、保健品及饮料[3].现代药理学研究也证明红景天属植物具有抗辐射、预防高原反应、抗缺氧[4]、抗衰老[5]、抗肿瘤[6]、提高记忆力[7]等作用.王秀清等[48]研究了灌喂红景天提取物后感染柯萨奇B5病毒的小鼠脾脏NK细胞活性及血清酶学变化，发现红景天对柯萨奇B5病毒有一定的抵抗作用.朴花等[8]研究表明红景天多糖对增强免疫功能有显著作用，并认为红景天多糖可作为一种免疫调节剂进行开发.阎奇等[9]也证实红景天多糖对抗病毒有明显效果.因此，本文研究不同产地、不同采收期红景天总多糖的含量变化，以确定其最佳采收期，为更好的开发利用红景天资源提供理论依据，并建立其分析方法,为红景天药材的鉴定、质量标准的建立以及质量控制提供一定的实验依据.

1 仪器设备与试剂

1.1 仪器

722 S分光光度计(Spectrophotometer)(上海精密科学仪器有限公司),KQ-250DB型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司),电子计数天平(500g/0.001g)(金羊天平仪器厂),百灵LAI14型电子天平(110g/0.0001g)(常熟市百灵天平仪器有限公司) 101-2A型数显电热鼓风干燥箱(上海锦屏仪器仪表有限公司通州分公司)

1.2 试剂

蒽酮、葡萄糖、浓硫酸、盐酸、无水乙醇等，均为分析纯.

2 实验方法

2.1 样品来源

西藏大花红景天、青海大花红景天、西藏圣地红景天、四川大花红景天、临江高山红景天，临江不同采收期高山红景天分别为：8月25日、8月30日、9月5日、9月15日、9月25日、9月30日；以上均由吉林农业大学胡全德教授鉴定为景天科（Crassulaceae）红景天属（Rhodiola）植物红景天(Rhodiola crenulata).

2.2 红景天多糖类物质的提取

2.2.1 可溶性多糖的提取

精密称取红景天粉末(恒重)0.500g,每个样品都称取三份（三次平行）,分别置于100ml具塞三角瓶中，加80%EtoH 45ml，浸泡30min，超声提取30min，静置过滤，重复提取1次，过滤(保存滤渣)，两次滤液置100ml容量瓶中，以80%EtoH定容至刻度，备用.

2.2.2 粗多糖的提取

将上步中提取后的滤渣蒸干，加2%的盐酸45m l，置沸水浴中提取lh,充分放冷，于100ml容量瓶中滤过，重复提取1次，过滤，洗涤滤纸，以2% HC1定容至刻度,备用.

2.3 显色剂（蒽酮-浓硫酸）的制备

取98%的浓硫酸76m1，稀释成l00ml溶液；精密称取蒽酮0.1000g，放入100ml容量瓶中，逐渐加入上述配制的硫酸溶液至刻度并摇匀，冷却至室温，备用(需临用前现配).

2.4 标准曲线的制备

2.4.1 标准曲线试液的制备

葡萄糖标准液:将葡萄糖于60℃烘1h，再逐渐升温至105℃干燥至恒重.精密称取10.55mg,置100ml容量瓶中,用蒸馏水溶解并稀释至刻度，取16支试管，除空白试液外,其余5组都做三次平行实验,按表2加试剂，于620nm处测定吸光度，记录数据,见表1，得回归方程：Y=7.8038X+0.0015，R2= 0.9991.

表1 标准曲线试液的制备(单位:ml)

2.4.2 标准曲线的绘制

图1 标准曲线图

2.4.3 样品溶液的制备与测定

2.4.3.1 可溶性多糖的测定 各取可溶性多糖提取液5.0ml,分别置于25m1容量瓶中，用80%的乙醇定容至刻度，混匀.分别取1.0ml可溶性多糖提取液加入具塞试管中,再加入蒽酮-浓硫酸试剂5.0ml，混匀.同时另取一支具塞试管加80%EtoH，再加入蒽酮-浓硫酸试剂5.0m l,作为空白实验.置沸水浴中加热10min，冷却至室温.于620nm处测定吸光度.

2.4.3.2 粗多糖的测定 各取粗多糖提取液2.0ml，分别置于25m1容量瓶中，用2%的盐酸定容至刻度，混匀，分别取1.0ml粗多糖提取液加入具塞试管中,再加入蒽酮-浓硫酸试剂5.0m1,混匀，同时另取一支具塞试管加入2%的盐酸1.0m1，再加入蒽酮-浓硫酸试剂5.0ml,混匀,作空白实验.置沸水浴中加热10min，冷却至室温，于620nm处测定吸光度.

3 结果

表2 红景天样品中不同产地总多糖含量(%)测定结果

不同产地不同采收期红景天可溶性多糖及粗多糖含量比较

不同产地不同采收期红景天总多糖含量比较

4 讨论

4.1 不同产地红景天的总多糖含量不同，其中西藏大花红景天的含量最高，然后依次是青海大花红景天，西藏圣地红景天，四川大花红景天，临江高山红景天.临江不同采收期的高山红景天的总多糖含量有差异，建议采收高山红景天的适宜时间为7-9月，尤以9月左右为宜.实验中9月15日所测总多糖含量存在较大误差，粗多糖测定结果偏差很大，可重复平行实验以校正之.红景天多糖含量较高，而对多糖的药用价值研究尚浅，值得以后进一步研究.

4.2 由于红景天中其主要有效成分为黄酮类、苷类和多糖，所以不能只通过多糖的含量来评价药材质量，应以多指标综合评价药材的质量.综合其他实验数据，从药用价值来看，西藏大花红景天的药用价值要优于其他产地红景天，而临江地区红景天的药用价值还需要进一步深度研究.

4.3 从回收率和精密度可看出,采用蒽酮－硫酸比色法，此方法是一种常用的方法，其原理是利用糖类遇浓硫酸脱水后生成糖醛或其衍生物，可与蒽酮试剂缩合，反应后溶液呈蓝绿色，于620nm处有最大吸收，显色深度与多糖的含量呈线性关系；该方法简便，可靠、易行.

〔1〕龚晨睿，李字红，马良.红景天复合制剂抗疲劳作用研究[J].卫生研究,2002，31(5)：397．

〔2〕崔艳梅，娄安如，赵长琦.红景天属植物化学成分及药理作用研究进展[J].北京师范大学学报(自然科学版)，2004，44（3）：17.

〔3〕宋桂英,李九丹.不同的红景天不尽一样的疗效[J].中国民族民间医药杂志，2004，67(3)：9～12.

〔4〕Furmanova M．，B．Kedzia，M．Hartw ieh，et a1．Phytochemical and pharmacological properties of Rhodiolarosea L[J]．Herba Poloniea XLV，1999，2：108-113．

〔5〕Saratikov A.S．，Krasnov E．A.，Chnikina L.A.，et a1．Rhodioloside，a new glycoside from Rhodiola rosea and its pharmacological properties[J]．Pharmazie，1968，23：392-395．

〔6〕Udiintsev S N，Shakhov V Pt The role of humoral factors ofregenerating liver in the development of experimental tumors and the effect of Rhodiola rosea rxtract on this process [J]．Neoplasma，1991，38：323．

〔7〕V．D．Petkov，D．Yonkov，A．M osharoff，et a1．Effects ofalcohol aqueous extract from Rhodiola rosea L roots onlearning and memory[J]．Acta Physiological etPharmacological Bulgarica．1986，12(1)：3-16．

〔8〕朴花.高山红景天多糖对小鼠的免疫调节作用[J].延边大学医学学报,2000,23(4):251～255.

〔9〕阎奇.硫酸化高山红景天多糖对感染病毒小鼠血液SOD和IPO的影响[J].中国中医基础医学杂志,1997,3(6):28～31.

R284

A

1673-260X（2014）02-0039-03