自体骨髓间充质干细胞移植辅助高压氧治疗高血压脑出血临床观察

张化明 杨 冰

1）武汉市武钢总医院神经外科 武汉 430080 2）武汉市第八医院内一科 武汉 430014

高血压脑出血（hypertensive cerebral hemorrhage，HCH）是神经科的常见急危重症，发病率、致残率及病死率均较高。本研究对我院收治的高血压脑出血患者采取自体骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）移植辅助高压氧（hyperbaric oxygen，HBO）治疗，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2009-12—2012-12本院收治的HCH患者102例，均有高血压史，诊断符合中华医学会全国脑血管病学术会议制定的HCH诊断标准。随机分为2组，治疗组50例，男32例，女18例；年龄37～79岁，平均（54.7±3.2）岁，出血量10.5～69.6mL，平均（38.7±14.5）mL。对照组52例，男31例，女21例；年龄39～80岁，平均（56.2±4.5）岁，出血量9.3～70.6mL，平均（39.4±15.3）mL。2组患者入院时年龄、GCS评分、血肿量、手术比例及神经功能缺损评分等方面差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。所有患者家属对治疗及试验知情同意并签字，并经医院伦理委员会批准。2组排除以下病例：既往有严重心、肺、肝、肾等系统性疾病者，既往有脑卒中史并遗留严重神经功能缺失者，血液系统疾病者，严重过敏史者。

1.2 治疗方法 所有患者入院后根据具体情况，有手术指征立即手术治疗；保守治疗患者给予脱水降低颅内压、控制血压、保护胃黏膜、预防感染、促进脑细胞代谢、防止并发症及维持水、电解质平衡等对症支持治疗。所有患者均接受高压氧治疗。对照组接受上述常规治疗；治疗组在基础上接受骨髓间充质干细胞移植治疗。

1.2.1 高压氧治疗：采用空气加压舱，舱内压力0.2MPa，升减压时间各20min，吸氧时间30min×2次，中间间歇10 min，1次／d，10次为1个疗程，每个疗程间隔3～5d，共治疗3个疗程。

1.2.2 骨髓间充质干细胞的制备及移植：患者入百级层流手术室，在局部麻醉下取髂后上棘、髂前上棘行骨髓穿刺抽取骨髓，采集骨髓150～200mL（枸橼酸钠抗凝），然后在超净工作台内将骨髓血加入干细胞提取专用试剂中，按试剂盒操作说明，采用密度梯度离心法制成体积5mL的细胞悬液，其中留取0.5mL用于有核细胞及干细胞计数，其余的用于移植治疗。移植方法为腰椎穿刺蛛网膜下腔注射，1次／10 d，连续3次为1个疗程。

1.3 观察项目 2组患者分别于治疗前和治疗后6个月采用美国国立卫生院神经功能缺损评分（NIHSS）和日常生活活动能力评分（Barthel指数）进行疗效评定。治疗后6个月进行格拉斯哥预后评分（GOS）及远期生活质量评估量表评分（KPS）评定预后。

1.4 统计学方法 应用SPSS 11.0统计软件进行分析，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，2组均数比较采用配对t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者NIHSS评分及Barthel指数比较 治疗前2组NIHSS评分及Barthel指数差异无统计学意义（P＞0.05）。与治疗前比较，治疗组治疗6个月后NIHSS评分显著降低（P＜0.05），Barthel指数显著升高（P＜0.05）；与对照组比较，治疗组治疗6个月后NIHSS评分显著降低（P＜0.05），Barthel指数显著升高（P＜0.05）。见表1、表2。

表1 治疗前2组NIHSS评分及Barthel指数比较（±s）

表1 治疗前2组NIHSS评分及Barthel指数比较（±s）

组别 n NIHSS评分 Barthel指数治疗组50 20.75±12.10 31.60±15.73对照组52 21.05±12.34 30.44±15.16

表2 治疗6个月后2组NIHSS评分及Barthel指数比较 （±s）

表2 治疗6个月后2组NIHSS评分及Barthel指数比较 （±s）

注：与治疗前比较，＊P＜0.05；与对照组比较，＃P＜0.05

组别 n NIHSS评分 Barthel指数治疗组 50 10.87±7.46＊＃ 62.79±25.25＊＃对照组52 15.25±10.05 49.55±21.76

2.2 2组GOS评分比较 治疗后6个月，治疗组预后显著优于对照组（P＜0.05）。见表3。

表3 2组治疗后6个月GOS评分比较 ［n（%）］

2.3 2组KPS评分比较 治疗后6个月，治疗组KPS评分（80.32±10.56）明显高于对照组（56.54±6.85），差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.4 安全性 治疗6个月后随访，所有患者头颅MRI、肿瘤标志物、血常规及生化全套均无明显异常。

3 讨论

HCH是指高血压引起脑的微动脉病变在血压骤升时破裂导致的脑实质出血，是高血压最严重的并发症之一。脑出血形成血肿后，由于血肿压迫并破坏周围脑组织，可引起脑组织缺血、缺氧而发生水肿，使脑细胞变性坏死，导致血氧弥散困难，进一步加重缺血缺氧，形成恶性循环。HBO能有效纠正病灶区域缺氧，促进脑细胞功能恢复。HBO治疗是通过提高患者血氧分压，加大血氧弥散范围，促使缺血半暗影区的受损细胞恢复；改善网状激活系统的功能，促进意识恢复；收缩脑血管，使脑血流量减少，从而降低颅内压，打断脑缺氧和脑水肿之间的恶性循环；减少自由基产生，增加细胞膜的稳定性，抑制炎症反应，有利于休眠细胞复活和神经功能恢复［1-2］。

HCH患者神经功能恢复一直是临床中的难点。目前研究发现，BMSCs是一类存在于骨髓网状间质内的除造血干细胞之外的另一类非造血干细胞，在适宜的体内外环境下，可定向分化为多种组织细胞，如成骨细胞、肌肉细胞、脂肪细胞及神经细胞等［3］。由于BMSCs具有取材方便、扩增迅速、无免疫原性、可自体移植等优点，解决了神经干细胞、胚胎干细胞等细胞移植中可能遇到的免疫排斥反应和伦理等问题，使其更便于应用于临床。2003年，Mahmood等［4］将体外培养的人骨髓间质干细胞（hBMSCs）移植到外伤性脑损伤（TBI）大鼠模型体内，发现移植的BMSCs可以迁移到脑组织内，且多聚集在损伤脑组织的周围，部分移植的细胞还表达神经元和神经胶质细胞的特异性标志物，表明hBMSCs在大鼠体内能够存活并能向神经组织分化，移植治疗的TBI大鼠的神经功能有明显改善。詹三华等［5］及高宇等［6］在对脑梗死患者进行自体BMSCs移植后发现，BMSCs移植能明显促进患者肌力、肌张力、语言、智力等恢复，表明自体BMSCs移植能显著改善脑梗死患者的神经功能。

本研究采用自体BMSCs移植辅助HBO治疗HCH患者，通过HBO治疗提高患者体内动脉血氧分压，增加机体内血氧含量及氧贮备，改善缺血、缺氧组织血供，进而改善脑组织的缺氧状态，促进脑组织损伤的恢复；联合自体BMSCs移植技术进一步治疗，通过细胞替代或分泌营养物质等方式促进损伤神经功能的恢复。本研究表明自体BMSCs移植辅助HBO治疗对HCH患者的神经功能的改善及预后有显著促进作用。

该技术为HCH的治疗提供了一条新的思路。但本研究样本量有限，随访时间不长，进行干细胞移植的最佳时机及是否存在致瘤性也尚无定论［7］。其确切疗效尚有待于临床上远期随访及进一步更大样本研究。

［1］张玉姣.高压氧早期治疗脑梗死临床分析［J］.中国实用神经疾病杂志，2011，14（7）：48-49.

［2］何桂英，陈克芳，杨萍，等.高压氧在颅脑外伤治疗中的应用［J］.中国实用神经疾病杂志，2010，13（2）：54-55.

［3］Meirelles Lda S，Nardi NB.Methodology，biology and clinical applications of mesenchymal stem cells［J］.Front Biosci，2009，14：4 281-4 298.

［4］Mahmood A，Lu D，Lu M，et al.Treament of traumatic brain injury in adult rats with intravenous administration of human bone marrow stromal cells［J］.Neurosurgery，2003，53（3）：697-703.

［5］詹三华，张鲁峰，姚卫民，等.自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死后遗症30例［J］.中国老年学杂志，2012，32（12）：4 821-4 822.

［6］高宇，迟鲁梅，毛颖，等.自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死8例［J］.中国老年学杂志，2011，31（13）：2 426-2 427.

［7］寿纪新，马林，付旭东，等.不同时间移植神经干细胞治疗颅脑损伤的对比研究［J］.中国实用神经疾病杂志，2010，13（9）：71-73 .