1 123株铜绿假单胞菌临床分布及耐药性分析*

张 婧，孙恒彪，潘祖汉，尤 旭，陈佑明

(南方医科第三附属医院检验科，广州 510630)



·论 著·

1 123株铜绿假单胞菌临床分布及耐药性分析*

张 婧，孙恒彪，潘祖汉，尤 旭，陈佑明△

(南方医科第三附属医院检验科，广州 510630)

目的 了解2012～2014年该院铜绿假单胞菌临床感染分布及耐药性情况。方法 对分离得到的铜绿假单胞菌进行鉴定及抗菌药物敏感性试验，数据使用WHONET5.6软件进行统计分析。结果 2012～2014年共分离得到1 123株铜绿假单胞菌，标本来源主要为痰(753株，67.1%)、伤口分泌物(179株，15.9%)、中段尿(95株，8.5%)，科室来源主要为神经外科(255株，22.7%)、呼吸内科(238株，21.2%)、ICU(177株，15.8%)、创伤骨科(84株，7.5%)。1 123株铜绿假单胞菌对哌拉西林(29.4%)、哌拉西林/他唑巴坦(20.9%)、头孢吡肟(27.8%)、左氧氟沙星(29.9%)、氨基糖苷类(15.8%～25.8%)具有较低的耐药率，对氨曲南(47.7%)耐药率最高。分离自痰标本的铜绿假单胞菌耐药率明显高于总耐药率。2012～2014年多重耐药及泛耐药铜绿假单胞菌检出数量逐年增加。结论 日常工作中应加强铜绿假单胞菌的耐药监测，减少及预防多重耐药和泛耐药菌的产生。

铜绿假单胞菌； 耐药性； 多重耐药； 泛耐药； 经验用药

铜绿假单胞菌是一种广泛存在于自然环境中的革兰阴性非发酵菌，对各种环境具有很强的适应性，是引起院内感染最为重要的病原菌之一[1]。同时铜绿假单胞菌与肺囊性纤维化有着密切的关系，是引起肺囊性纤维化患者病情加重及肺功能衰竭的重要原因[2]。2013年CHINET监测显示铜绿假单胞菌与大肠埃希菌、克雷伯菌、鲍曼不动杆菌占据了致病性革兰阴性菌前4位，铜绿假单胞菌已成为临床分离最常见的病原菌之一[3]。近年来随着广谱抗菌药物的广泛使用导致铜绿假单胞菌感染，尤其多重耐药及泛耐药铜绿假单胞菌在世界范围流行，往往导致临床治疗失败，已成为全球性的难题[4-5]。因此分析铜绿假单胞菌临床分布、耐药性及呼系统来源耐药性对指导临床合理使用抗菌药物有着重要的指导意义，本文对2012～2014年南方医科大学第三附属医院分离到的1 123株铜绿假单胞菌进行了回顾性分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 2012～2014年从本院临床送检标本中共分离得到1 123株铜绿假单胞菌，剔除同一患者多次重复送检标本中的分离株。

1.2 质控菌株 大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCC29213、粪肠球菌ATCC29212均购自广东省临床检验中心。

1.3 菌株鉴定及药敏试验 所有分离菌株菌均采用西门子Microscan Walkaway 40 plus型全自动微生物鉴定及药敏试验系统进行鉴定及药敏试验。药敏试验药物包括：哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/克拉维酸、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、美罗培南(2012年未检测)、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、左氧氟沙星，共13种。抗菌药物敏感性采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)文件2013版进行判断。

1.4 多重耐药及泛耐药菌判断 根据多重耐药菌、泛耐药菌术语国际专家提议的暂行标准中关于多重耐药及泛耐药铜绿假单胞菌判断标准，即青霉素类/β内酰胺酶抑制剂复合类、抗假单胞菌头孢菌素类、单环β内酰胺类、抗假单胞菌碳青霉烯类、氨基糖苷类、抗假单胞菌氟喹诺酮类、磷霉素类、多黏菌素类共8类抗菌药物中3类或以上(每类中1种或以上)不敏感为多重耐药铜绿假单胞菌，6类或以上(每类中1种或以上)不敏感为泛耐药铜绿假单胞菌[6-7]。

1.5 统计学处理 采用世界卫生组织发布的耐药性统计分析软件WHONET5.6版对数据进行统计分析。

2 结 果

2.1 标本分布 2012～2014年1 123株铜绿假单胞菌临床标本分布情况，见表1。

表1 2012～2014年1 123株铜绿假单胞菌临床 标本分布[n(%)]

2.2 科室分布 2012～2014年1 123株铜绿假单胞菌临床科室分布情况，见表2。

表2 2012～2014年1 123株铜绿假单胞菌临床 科室分布[n(%)]

2.3 铜绿假单胞菌耐药性分析 2012～2014年13种抗菌药物中有9种抗菌药物耐药率呈逐渐上升趋势。1 123株铜绿假单胞菌对哌拉西林(29.4%)、哌拉西林/他唑巴坦(20.9%)、头孢吡肟(27.8%)、左氧氟沙星(29.9%)、氨基糖苷类(15.8%～25.8%)具有较低的耐药率，对氨曲南(47.7%)耐药率最高。分离自痰标本的铜绿假单胞菌耐药率明显高于总耐药率，对阿米卡星(16.8%)、哌拉西林/他唑巴坦(25.2%)、庆大霉素(27.9%)、妥布霉素(24.5%)具有较低的耐药率。见表3。

表3 1 123株铜绿假单胞菌耐药性分析(%)

注：-表示未检测。

2.4 多重耐药及泛耐药菌检出情况 2012年共检出多重耐药菌104株，占43.2%，泛耐药铜绿假单胞菌17株，占7.1%。2013年共检出多重耐药铜绿假单胞菌173株，占46.4%，泛耐药铜绿假单胞菌34株，占9.1%。2014年共检出多重耐铜绿假单胞菌239株，占47.0%，泛耐药铜绿假单胞菌69株，占13.6%。

3 讨 论

铜绿假单胞菌是人类重要的条件致病菌，可引起多种类型的急、慢性感染，如肺部感染、伤口感染、尿路感染、血流感染[8]。2012～2014年分别分离铜绿假单胞菌241、373、509株，分离率呈逐年增加趋势，这可能和近3年本院门诊及住院量逐年增高有关。回顾性分析显示2012～2014年铜绿假单胞菌主要分离自痰(753株，67.1%)、伤口分泌物(179株，15.9%)、中段尿(95株，8.5%)等，说明铜绿假单胞菌主要引起肺部感染、伤口感染、尿路感染、浆膜腔感染、血流感染。

2013～2014年铜绿假单胞菌主要来源于神经外科(255株，22.7%)、呼吸内科(238株，21.2%)、ICU(177株，15.8%)等科室。神经外科、ICU及神经内科多以重症患者为主，多数患者接受了呼吸机辅助通气、手术治疗、静脉置管、广谱抗菌药物的使用；呼吸内科患者主要以肺部感染多见，而铜绿假单胞菌是引起肺部感染最重要的病原菌之一；伤口感染在创伤骨科较为常见；血液内科患者多数因血液系统疾病而导致免疫力低下容易感染，以上可能是这些科室铜绿假单胞菌分离率较高的原因。

铜绿假单胞菌耐药机制复杂多样，主要有染色体表达的头孢菌素酶、外排泵系统、产β内酰胺酶、氨基糖苷修饰酶、产生生物被膜渗透率减低等[9]。2012～2014年哌拉西林、替卡西林/克拉维酸、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、美罗培南(2012年未检测)、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素耐药率呈逐年增加趋势，这可能与本院2012～2014年重症患者收治量逐年增多导致抗菌药物使用量增加有关。哌拉西林(29.4%)、哌拉西林/他唑巴坦(20.9%)、头孢吡肟(27.8%)、左氧氟沙星(29.9%)、氨基糖苷类(15.8%～25.8%)具有较低的耐药率，对氨曲南(47.7%)耐药率最高，故经验用药推荐使用哌拉西林、氨基糖苷类、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟及左氧氟沙星。分离自痰标本的铜绿假单胞菌耐药率明显高于总耐药率，除哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、妥布霉素3种抗菌药物外，其他抗菌药物的耐药率均超过30%，说明呼吸系统铜绿假单胞菌感染耐药机制更为复杂。结合本院耐药监测情况及《国家抗微生物治疗指南》，肺部感染建议使用哌拉西林/他唑巴坦联合阿米卡星进行治疗。

2012～2014年耐亚胺培南铜绿假单胞菌总检出率为36.3%，略低于国内报道的39.8%[10]，铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物主要耐药机制为外膜孔道蛋白OprD的缺失及金属β内酰胺酶的产生[11]。2012～2014年多重耐药及泛耐药铜绿假单胞菌检出数量及检出率逐年增加，多重耐药菌总检出率为45.9%，明显高于国外的报道的14.8%，这可能与国外判断多重耐药菌选择多黏菌素有关，而临床分离的铜绿假单胞菌对多黏菌素耐药率较低[12]。多重耐药菌主要分离自神经外科及ICU，这2个科室患者多数存在住院时间较长，也是本院抗菌药物使用量最大的科室，这可能是导致本院多重耐药菌分离率较高的另外一个原因。

鉴于本院2012～2014年碳青霉烯耐药及多重耐药铜绿假单胞菌检出数量逐年增加，且检出率明显高于文献报道，这就一方面要求临床严格按照规定合理使用抗菌药物，加强临床微生物标本送检，另一方面要做好多重耐药菌的监控与管理工作，预防多重耐药及泛耐药菌在院内暴发流行。

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Distribution and drug resistance of 1 123 strains of Pseudomonas aeruginosa*

ZHANGJing,SUNHeng-biao,PANZu-han,YOUXu,CHENYou-ming△

(DepartmentofClinicalLaboratory,theThirdAffiliatedHospitalofSouthernMedicalUniversity，Guangzhou,Guangdong510630,China)

Objective To investigate clinical distribution and drug resistance of Pseudomonas aeruginosa isolated from 2012 to 2014.Methods All of the isolated Pseudomonas aeruginosa strains were identified and tested drug susceptibility.Data were analyzed by using the software WHONET5.6.Results 1 123 strains of Pseudomonas aeruginosa were isolated from 2012 to 2014,most of which isolated from sputum (n=753,67.1%),wound secretion (n=179,15.9%),urine (n=95,8.5%).And the Pseudomonas aeruginosa strains were mainly distributed in neurosurgery (n=255,22.7%),respiratory medicine (n=238,21.2%),ICU (n=177,15.8%),orthopedic trauma (n=84,7.5%).All of the 1 123 strains of Pseudomonas aeruginosa had low drug resistance rates to piperacillin (29.4%),piperacillin/tazobactam (20.9%),cefepime (27.8%),levofloxacin (29.9%),aminoglycosides (15.8%-25.8%),and had the highest drug resistance rate to aztreonam (47.7%).The drug resistance rates of Pseudomonas aeruginosa isolated from sputum samples were significantly higher than the overall resistance rate.The numbers of multi-drug resistant and pan-drug resistant Pseudomonas aeruginosa significantly increased from 2012 to 2014.Conclusion Monitoring drug resistance of Pseudomonas aeruginosa should be strengthened in daily work,so as to reduce and prevent multiple drug resistance and pan-resistant bacteria.

Pseudomonas aeruginosa; drug resistance; multi-drug resistant; pan-drug resistant; rational drug use

广东省广州市科技计划资助项目(2012Y5-00004)。

张婧，女，本科，检验技师，从事临床微生物检验工作。△

，E-mail：cym38432@163.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.20.015

A

1672-9455(2015)20-3009-03

2015-03-14

2015-06-18)