特色南药牛大力多糖含量的比较

翟勇进　黄浩　白隆华　姚绍嫦

摘 要：为了比较牛大力多糖在不同地理种源、不同类型、不同植株部位和不同采收季节时间差异，对广西钦州市、隆安县、上林县、天峨县4个野生种源进行多糖含量测定，以筛选出最佳牛大力种源、用药部位和采收季节。结果表明，上林县蔓生型牛大力多糖含量明显多于其他3个县直立型牛大力，其次为隆安县直立型牛大力，天峨县的多糖含量最少；多糖含量最高的部位为根部，茎次之，叶的含量最少；牛大力在冬季采收，多糖含量显著高于夏季采收。

关键词：牛大力 种源 化学成分 多糖

牛大力（Millettia speciosa Champ.）为豆科（Leguminosae）崖豆藤属（Millettia Wight et Arn.）美丽崖豆藤的块根，又称山莲藕、牛古大力、大莲藕、倒吊金钟等。为岭南地区著名的药食两用植物 [1]，主要成分为牛大力多糖，具有补肺滋肾、清热止咳、舒筋活络、提高免疫、抗炎、抗氧化和清除自由基作用和抗疲劳的作用[2-4]，主治肺虚咳嗽、咳血、肾虚、腰膝酸痛、遗精、白带、风湿痹痛、跌打损伤、慢性肝炎等[6-9]，同时毒副作用小，性质稳定、不易变性失活[10]，主要分布于广西、海南和广东等省区 [11]，有直立和蔓生2种类型 [12]。随着市场需求的不断增大，种植面积成倍增加，选育优良牛大力种源和类型成为当前急需解决的关键问题，但相关研究报道极少。牛大力多糖是评价牛大力品质的一个重要指标，因此，拟研究通过对不同种源的牛大力多糖含量测定，为牛大力的选育和人工栽培提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 试验材料

试验材料分别为广西钦州市、隆安县、上林县、天峨县4个市（县）5年生及以上的野生牛大力，其中上林县种源有蔓生和直立型2种类型，其他3个市（县）均为直立型牛大力。采收时间为2014年8月和12月。洗净脏物和泥土，自然晒干后用高速粉碎机将植株的根、茎、叶分别打粉，选取过40目标准筛后的粉末作为提取材料。

试验材料经广西壮族自治区药用植物园白隆华研究员鉴定，为豆科崖豆藤属牛大力（Millettia speciosa Champ.）。

1.2 主要仪器与试剂

主要仪器：北京博医康实验仪器有限公司FD-1A-50冷冻干燥器；北京医用离心机厂LG16-W离心机；Perkin Elmer Lamb-da35紫外光谱仪；Mettler Toledo AL204分析天平。

主要试剂：乙酸乙酯、正丁醇、苯酚、浓硫酸和葡萄糖，均为天津大茂化学试剂厂生产，纯度为分析纯；蒸馏水。

1.3 试验方法

1.3.1 多糖提取和待测液制备

精确称取牛大力根、茎、叶粉末样品500 g，在60℃水浴条件下，用85 %乙醇溶液提取5次，每次0.6 L。合并提取液，减压浓缩至80 mL，依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取，冷冻干燥，最后获得棕红色浸膏即为牛大力多糖，置于干燥器中备用。

精确称取上述制得的牛大力多糖各20.8 mg，溶解并分别定容至250 mL，待测量。

1.3.2 标准曲线的绘制

参照文献方法[2] ，精确称取葡萄糖10.0 mg，溶解后定容至250 mL作为标准液。分别吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mL标准液，再分别用蒸馏水补足至2 mL。再加入6 %苯酚溶液1.0 mL和浓硫酸5.0 mL，静止10 min，摇匀，室温下静置20 min，然后在490 nm波长处测量吸光度。

以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程：

Y=0.0080X+0.005 （r=0.997）

1.3.3 牛大力多糖测量

分别吸取0.2、0.6、1.2 mL牛大力样品溶液，用蒸馏水补足至2 mL（对照用2 mL蒸馏水），再加入6 %苯酚溶液1.0 mL和浓硫酸5.0 mL，静止10 min，摇匀，室温下静置20 min，然后在490 nm波长处测量吸光度。按标准曲线计算平均浓度值，再按以下公式计算多糖含量：

多糖含量（%）=[（C×8）/V] ×250÷20.8 ×100

C：根据标准曲线方程算出平均浓度

V：样品体积

2 结果与分析

2.1 不同牛大力种源根部多糖含量差异

对2014年12月采收的4个种源，进行牛大力多糖含量测定，结果见表1。不同牛大力种源根的多糖含量差异明显，来源为隆安和上林的含量较高，分别为 17.8 %和17.2 %，天峨县的最低，只有5.5 %，约为隆安和上林产牛大力块根多糖含量的1/3左右，差异达显著水平。

2.2 不同植株类型、部位牛大力多糖含量的差异

直立型牛大力和蔓生型藤本牛大力是目前栽培的2个类型，2014年8月，分别取上林县直立型和蔓生型2种药材的根、茎和叶进行多糖含量分析，结果见表2。从表中可看出，不管是直立型还是蔓生型类型，多糖含量高低的部位均依次为根、茎、叶，根部的量均不低于6.00 %，而茎在3.50 %左右，叶较低，均不超过1.60 %。而在不同植株类型中，蔓生型根、茎、叶中牛大力多糖的含量均高于直立型。

2.3 不同采收时期对多糖含量的影响

上林县直立型和蔓生型2种植株在8月和12月采收的根部多糖含量结果见表3。可见不同采收时间牛大力根部多糖的含量差异明显（表3）。在冬季12月采收，直立型牛大力和蔓生型藤本牛大力2个类型的多糖含量分别为17.8 %和17.2 %，明显高于8月份采收的含量（分别为6.08 %和6.58 %），即12月份的牛大力多糖含量显著高于8月份。这可能与春、夏、秋初季节是植物营养生长时期，而冬季是植物营养成分积累时期有关。这与传统根茎类药材在冬季采收是一致的[12]。但在同一季节采集，直立型和蔓生型根部多糖含量差异不显著。

3 结论

在试验的4个种源中，隆安县和上林县牛大力种源的多糖含量较高，表明原产地的土壤、湿度、光照、温度、pH值等环境因素对牛大力多糖积累有明显的影响，这与段左俊等[13]研究结果相同；而蔓生型和直立型的多糖含量差异不明显。牛大力多糖含量在根、茎、叶均有分布，含量高低依次为根、茎、叶。尽管在茎和叶中，牛大力多糖的含量相对较低，但仍可加以利用 [14-15]。

参考文献

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[13] 段左俊，曾祥全，陈飞飞，等. 牛大力的生物学特性及其栽培管理[J]. 热带林业，2011，39

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