骨髓增殖性肿瘤患者JAK2、MPL及CALR基因突变位点分析及临床观察

马丽丽

骨髓增殖性肿瘤患者JAK2、MPL及CALR基因突变位点分析及临床观察

马丽丽

目的 探讨骨髓增殖性肿瘤患者JAK2及MPL及CALR基因突变的位点，及患者的临床特点。方法 选取我院2014年2月～2015年5月收治的骨髓增殖性肿瘤患者100例，通过测序法测定患者CALR基因突变，通过AS-PCR法检测患者骨髓中JAK2及MPL基因突变。结果 所有患者MPL基因突变阴性；PV患者JAK2基因突变发生率91.9%，CALR基因突变阴性；ET患者JAK2基因突变发生率41.2%，CALR基因突变发生率为32.4%；PMF患者JAK2基因突变发生率为44.8%，CALR基因突变发生率为31.0%。结论 骨髓增殖性肿瘤患者发生CALR基因突变的患者与发生JAK2、MPL基因突变的患者比较，更有可能获得较好的预后效果。

骨髓增殖性肿瘤；基因突变；位点；临床分析

骨髓增殖性肿瘤是源于多功能造血干细胞的恶性骨髓增殖性疾病，患者经常发生血管病变事件，纤维组织增生、栓塞出血及髓外造血，发展方向是白血病[1-3]。本文主要通过对骨髓增殖性肿瘤JAK2、MPL及CALR基因突变的研究，了解患者JAK2、MPL及CALR基因突变与患者临床症状及预后效果的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2014年2月～2015年5月确诊为骨髓增殖性肿瘤的患者100例，其中真性红细胞增多症患者37例，原发性血小板增多症患者34例，原发性骨髓纤维化患者29例；参与调查的患者中男53例，女47例；患者年龄18～72岁，平均年龄为（44±12）岁。患者按照标准进行诊断和分类。参与调查的所有患者均被告知，并签署同意协议。

1.2 方法

将100例骨髓增殖性肿瘤患者的初期血常规检查结果进行汇总。并对参与研究的患者进行随访，随访时间10个月以上。真性红细胞增多症患者通过DNA提取试剂盒提取骨髓细胞基因组DNA，CALR9号外显子PCR扩增引物。将扩增引物进行提纯、分析，分析结果显示，358以外的片段显示条带时，代表CALR突变阳性。应用等位基因特异性-聚合酶链反应（AS-PCR）及序列测定方法，检测患者骨髓及外周血单个核细胞JAK2V617F及MPLW515L/K点突变情况并进行分析。

2 结果

2.1 患者的临床特征及实验室检测结果

对真性红细胞增多症患者37例，原发性血小板增多症患者34例，原发性骨髓纤维化患者29例均采取规范化的治疗，并定期对上述患者做随访，最后一次随访显示，所有患者无死亡和失访。检验CALR基因突变结果为阳性的患者中有10例患者为原发性血小板增多症患者，与JAK2患者相比，血小板计数更高。检验CALR基因突变结果为阳性的患者中有12例为原发性骨髓纤维化患者，无论是白细胞计数水平，还是血红蛋白的检查结果均呈现较低的水平。

2.2 JAK2、MPL及CALR基因突变

真性红细胞增多症患者共37例，未见CALR基因突变发生，其中有34例患者的JAK2基因检测中发现JAK2V617F出现基因突变，突变发生率为91.9%；原发性血小板增多症患者共34例，其中有14例患者的JAK2基因检测中发现JAK2V617F出现基因突变，突变发生率为41.2%，CALR基因突变的患者共有11例，发生率为32.4%，原发性血小板增多症患者中有20例患者JAK2基因突变显示阴性，其中有9例患者CALR基因发生突变，CALR基因的突变发生率为45.0%；原发性骨髓纤维化患者共29例，其中有13例患者的JAK2基因检测中发现JAK2V617F出现基因突变，发生率为44.8%，CALR基因突变的患者共有9例，发生率为31.0%，原发性骨髓纤维化患者中有16例患者JAK2基因突变显示阴性，其中有10例患者CALR基因发生突变，CALR基因的突变发生率为62.5%。参与此项调查的所有患者均未见MPL基因发生突变。

3 讨论

对于骨髓增殖性肿瘤的治疗，近年来，临床多采用JAK2基因突变点为靶点进行治疗[4]，不仅如此，JAK2基因对于骨髓增殖性肿瘤的诊断和预后等方面也都有很大作用[5-7]，但是，作用机理目前还不明确。

本研究显示，所有患者MPL基因突变阴性；PV患者JAK2基因突变发生率91.9%，CALR基因突变阴性；ET患者JAK2基因突变发生率41.2%，CALR基因突变发生率为32.4%；PMF患者JAK2基因突变发生率为44.8%，CALR基因突变发生率为31.0%。从研究数据显示，CALR基因突变与JAK2基因突变相比较，对于原发性骨髓纤维化患者，血小板计数更高，血红蛋白和白细胞都偏低，出现血栓的概率低，同时也提示患者预后更好，具有较高的患者生存率。

有研究显示，骨髓增殖性肿瘤患者的JAK2、MPL及CALR基因突变并不会同时出现[8]，本项研究中也未见两种及以上基因突变共同出现。

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[3] 董莹，朱华锋，侯莉萍，等. 骨髓增殖性肿瘤120例JAK2 V617F基因突变的临床分析[J]. 白血病·淋巴瘤，2015，24（7）：433-436.

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Analysis and Clinical Observation of JAK2, MPL and CALR Gene Mutations in Patients With Bone Marrow Proliferation

MA Lili Department of Hematology, The Hospital of Chifeng City, Chifeng Inner Mongolia 024000, China

Objective To study the patients with tumor in bone marrow hyperplastic JAK2 and MPL and CALR gene mutation sites, and the clinical characteristics of patients. Methods 100 cases of bone marrow cancer patients treated in our hospital from February 2014 to May 2015 were selected. The mutation of CALR gene was determined by sequencing method. Detection of JAK2 and MPL gene mutations in bone marrow of patients by AS-PCR. Results All patients MPL gene mutation negative. PV JAK2 gene mutation rate was 91.9%, CALR gene mutation negative. ET JAK2 gene mutation rate was 41.2%, CALR gene mutation rate was 32.4%. Patients with PMF JAK2 gene mutation rate was 44.8%, CALR gene mutation rate was 31.0%. Conclusion Bone marrow in patients with hyperplastic tumor CALR gene mutations in patients with JAK2, MPL gene mutation of patients were compared, and are more likely to achieve good prognosis

Marrow hyperplastic tumor, Gene mutation, Site, Clinical analysis

R733.3

A

1674-9308（2016）32-0104-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.32.058

内蒙古赤峰市医院血液内科，内蒙古 赤峰 024000