四川不同产地厚朴总生物碱的含量分析

董佳悦，刘美琳，任波，张梅

·品种品质·

四川不同产地厚朴总生物碱的含量分析

董佳悦，刘美琳，任波，张梅

目的：测定四川不同产地厚朴中总生物碱的含量，为四川产区优质种质资源筛选及质量标准研究提供参考。方法：采用非水滴定法分别测定16批四川不同产地二十年左右树龄的木兰科植物厚朴中总生物碱的含量，并对测定结果进行分析比较。结果：16批四川不同产地川厚朴中总生物碱含量为3.3978 mg·g-1～6.9111 mg·g-1，其中峨眉山市的茶地村、丰收村、荷叶村、黑水村四个产地厚朴的总生物碱含量较其他产地高，分别为6.0625±0.1715 mg·g-1、6.2058±0.1850 mg·g-1、6.9111±0.0662 mg·g-1、6.0490±0.0809 mg·g-1，都江堰龙池镇虹口景区观风沟和丫口产区川厚朴总生物碱含量则低于其他产区，分别为3.3978±0.0519mg·g-1、3.4380±0.0670mg·g-1。结论：四川境内厚朴中总生物碱的含量存在明显差异，其中尤以峨眉山市生物碱的含量较高。

厚朴;生物碱;含量测定；种质资源

厚朴又名川朴、油朴、紫油厚朴等。《中华人民共和国药典》（2015年版）收载中药厚朴为木兰科植物厚朴Magnolia offcinalis Rehd.et Wils或凹叶厚朴Magnolia offcinalis Rehd.et Wils. var. bilobaRehd.et Wils.的干燥干皮、根皮及枝皮。其气香，味辛辣、 微苦，具有燥湿消痰、下气除满的功效，用于湿滞伤中、脘痞吐泻、痰饮喘咳等症[1]。厚朴作为大宗常用中药，其资源分布较广。《本草经集注》曾记载: 厚朴“今出建平、宜都。今四川东部、湖北西部等地[2]。随着近年来厚朴资源调查发现，现代厚朴资源主要分布在四川西南部、湖北西部、陕南及甘南等地[3]。化学研究方面发现厚朴药材中主要包含三类化学物质，分别为木脂素类、挥发油类及生物碱类成分，其中木脂素类成分中主要以厚朴酚、和厚朴酚两种成分为主；其次挥发油中主要以桉叶醇含量最高；而生物碱类成分较其两类成分含量较少，主要包括异啉类（木兰箭毒碱、木兰花碱）和有机胺类（柳叶木兰碱）两大类生物碱，其中异喹啉类生物碱广泛存在于木兰科植物中，具有较高药用价值[4～6]。生物碱作为厚朴中主要化学成分之一，现代药理药效研究表明，生物碱有镇痛、抗菌、降压、松弛肌肉和抑制中枢等作用，其中一些生物碱有抑制气管收缩作用，从而对哮喘有一定的治疗作用[7]。但同时生物碱也是厚朴的主要毒性成分[8]。

四川自古至今作为厚朴的主要产区之一，因其出产的厚朴品质优良，疗效佳，因此也是厚朴的道地产区之一。而四川境内地域辽阔，厚朴种质资源遍布了都江堰市、乐山市（沐川、马边等）、阿坝州（松潘、汶川、茂县等)、峨眉山市等多个地区。据相关文献报道不同品种、不同产地间化学成分组成及含量差异显著[9～10]。因此我们采集了四川省内16个不同产地的二十年左右树龄的木兰科植物厚朴，对其中总生物碱成分的含量进行了研究与比较，现将分析结果报告如下。

1 材料

1.1 药材

厚朴药材样品分别从四川都江堰、峨眉山、乐山、眉山、阿坝州五个地区，16个厚朴产地集，由成都中医药大学中药资源与鉴定系裴瑾教授鉴定。均为木兰科植物厚朴Magnolia offcinalis Rehd.Et Wils.的干燥干皮。厚朴来源见表1。

表1 厚朴药材来源

1.2 仪器

BT 125D型电子天平（北京赛多利斯科学仪器有限公司），RE-5203旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）、2 mL半微量滴定管（天长市金桥分析仪器厂）。

1.3 试剂

试剂：甲醇、冰醋酸、醋酐、高氯酸、结晶紫均为分析纯（成都市科龙化工试剂厂）。

2 方法与结果

2.1 测定方法

2.1.1 供试品溶液的制备 取待测样品粉末(通过四号筛)约1.5 g，精密称定,置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20 mL，称定重量,摇匀。室温放置过夜(16小时以上)，再称定重量。补足损失的溶剂量，振摇后放置,过滤得样品溶液。

2.1.2 总生物碱含量测定 参考相关文献[11～12]和《中华人民共和国药典》（2015年版）四部“通则0702”非水溶液滴定法项下“第一法”测定[13]。精密量取供试品溶液10 mL，旋转蒸干，残渣加无水冰醋酸15 mL使溶解，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.02mol·L-1)滴定至蓝色，读取体积，计算各样品中总生物碱总含量。样品含生物碱以木兰箭毒碱(C19H24NO3)计算。

2.2 结果

16批不同产地川产厚朴的总生物碱含量比较结果见表2所示。

表2 各样品中总生物碱含量测定结果（X±SD，n=3）

从表2可以看出，16批四川不同产地川厚朴中总生物碱含量为3.3978 mg·g-1～ 6.9111mg·g-1，其中峨眉山市茶地村、丰收村、荷叶村、黑水村四个产地厚朴的总生物碱含量较其他产地高，分别为6.0625±0.1715mg·g-1，6.2058±0.1850 mg·g-1，6.9111±0.0662 mg·g-1，6.0490±0.0809 mg·g-1，而都江堰龙池镇虹口景区观风沟和丫口两个地点厚朴总生物碱含量相对较低，分别为3.3978±0.0519 mg· g-1，3.4380±0.0670 mg·g-1。综合分析16批四川不同产地川厚朴大致划分为峨眉山、眉山、乐山、都江堰及阿坝州五个区域，发现厚朴中总生物碱含量从高到低分别为峨眉山＞乐山＞阿坝州＞眉山＞都江堰，以峨眉山区域的厚朴中总生物碱的含量较高，都江堰产区厚朴中生物碱含量较低。

3 讨论

厚朴作为我国珍贵中药材，有着广泛的药效作用和经济价值。由于种质资源的过度消耗，野生资源日益枯竭，大多数野生厚朴药材质量难以达到“安全、有效、可控、稳定”的品质要求。又因其栽培地区广，采收年限差异大，且药材来自不同部位，从而造成厚朴药材品质参差不齐。四川是厚朴的主要产区之一，也是资源高消耗地区，四川各地产厚朴药材的品质也存在一定的差异。已有的厚朴质量控制指标主要以其中所含木脂素类成分厚朴酚、和厚朴酚的含量作为标准，而未考虑其他两类化学成分生物碱和挥发油。生物碱作为厚朴的主要成分之一，虽然其含量较木脂素类成分低，近年来研究发现其具有抑菌、抗肿瘤、抗炎、肌肉松弛、促进胃肠蠕等作用[14]，同样印证了厚朴对脘痞吐泻、痰饮喘咳等症治疗作用。因此，有必要将生物碱作为厚朴质量的评价标准之一。本试验通过对四川省内16个产区二十年左右树龄的木兰科植物厚朴中总生物碱的含量进行了测定与分析，结果发现，大部分产区厚朴中总生物碱的含量相近，但个别地区（眉山市的茶地村、丰收村、荷叶村、黑水村）所产厚朴中生物碱含量较高，与其他产地差异显著，约为其他产地的1.5～2倍。因此，如将其作为评价指标完善厚朴药材质量控制方法时，需进一步开展其含量高低与药效相关性研究。本文研究结果为完善厚朴质量控制方法，筛选川产厚朴优良种源及种源地，提供了一定的科学依据。

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[8] 杨熙东.厚朴的药理作用及临床应用[J].中国社区医师(医学专业),2011,26:151.

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（责任编辑：李芸霞）

The analysis of total alkaloids content of Houpo from different habitats

/DONG Jia-yue, LIU Mei-lin, REN Bo, ZHANGMei //(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan)

Objective: To analyze and evaluate the total alkaloid content of Houpo from different producing areas in Sichuan Province to provide a reference for selecting high-quality germplasm resources and study on quality standard. Method: 16 batches Houpo total alkaloid contents from different origins were determined using non-water titration and the results were compared. Result: The total alkaloid content of 16 batches Houpo were in the range of 3.3978 mg·g-1to 6.9111 mg·g-1. The total alkaloid contents of Houpo from Chadi village, Fengshou village, Heye village and Heishui village in Emeishan City were 6.0625±0.1715 mg·g-1, 6.2058±0.1850 mg·g-1, 6.9111±0.0662 mg·g-1, 6.0490±0.0809 mg·g-1, respectively, which were higher than that from other origins. But the contents of total alkaloids in the Guanfenggou and Yakou producing areas in Dujiangyan Longchi Hongkou Scenic spot were 3.3978±0.0519 mg·g-1and 3.4380±0.0670 mg·g-1, which were lower than that from other origins. Conclusion: There are obvious differences in the contents of Houpo total alkaloids, and Houpo from Emeishan City has the highest contents.

Houpo; alkaloids; content detection; germplasm Resources

R 284.2

A

1674-926X(2016)06-003-03

四川省科技计划项目“中药种质资源库建设关键技术研究及示范”，项目编号2014SZ0156

成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137

董佳悦（1991-），女，硕士在读，研究方向为中药有效成分分析研究. Tel:18280270918 Email:1070994058@qq.com

任波（1979-），男，副教授，从事中药及复方物质基础研究 Tel:(028)61800231 Email:bobofuly@163.com张梅（1963-），女，教授，博士生导师，从事中药及其复方物质基础及质量标准化研究工作

Tel:(028)61800231 Email:zhangmei63@126.com

2016-03-08