解脲支原体感染对不育男性精液质量及生育能力的影响

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(1.南华大学附属第一医院泌尿男科，湖南 衡阳 42100；2.湖南环境生物职业技术学院)

·临床医学·

解脲支原体感染对不育男性精液质量及生育能力的影响

刘伯龙1*，王娟花2，唐正1，张益康1，秦松林1

(1.南华大学附属第一医院泌尿男科，湖南 衡阳 42100；2.湖南环境生物职业技术学院)

目的探讨解脲支原体(UU)感染对不育男性精液质量及生育能力的影响。方法回顾性分析本院生殖中心就诊的男性不育患者298例，根据患者精液是否存在解脲支原体感染分为病例组(n=109)和对照组(n=189)，并对两组患者的精液质量进行分析。同时，对UU感染患者予以阿奇霉素治疗，随访1年观察治疗后病例组患者生育情况。结果与对照组相比，病例组患者精子总活力、前向运动率(PR)、精子存活率显著降低，精子正常形态率显著降低，精子头部畸形率显著增高(P均<0.05)，而两组患者的精子畸形指数、畸形精子指数、体部畸形率和尾部畸形率差异无统计学意义。与对照组相比，病例组精子顶体酶活性显著降低，而顶体酶异常率、精浆弹性蛋白酶显著高；精浆弹性蛋白酶诊断解脲支原体感染的敏感性为67.8% (95%CI:47.1%～87.4%)，特异性为66.7% (95%CI:43.5%～86.8%)，ROC曲线下面积为0.71(95%CI:0.57～0.86)；病例组78例接受了阿奇霉素治疗2周，1年内妻子受孕率明显高于对照组 (HR=2.76，95%CI:1.26～6.06,P<0.05)。结论解脲支原体感染可影响男性精液质量，是导致不育的重要原因之一，抗解脲支原体治疗可提高患者生育机会。

解脲支原体； 不育； 精液质量； 生育能力

生殖健康相关流行病学资料显示[1]，近年来我国男性生殖水平明显降低，男性不育患者数量呈现出逐年增加趋势。生活压力增大、生育年龄延后及不良的生活饮食习惯是我国男性生殖能力降低的重要原因。同时，有研究报道[2]，我国不育男性精液中解脲支原体感染率较高，提示解脲支原体感染可能与我国男性不育有关。但国外亦有研究报道，不育男性患者中解脲支原体感染率与正常生育能力男性人群并无明显差异[3]。因此，解脲支原体感染是导致男性不育的原因仍存在争议。本研究对我院近年来门诊接诊的男性不育患者精子检查结果进行分析，探讨解脲支原体感染对不育男性精液质量及生育能力的影响。

1 资料与方法

1.1临床资料

1.1.1 患者来源 回顾性分析2012年1月至2014年1月本院生殖中心就诊的男性不育患者298例，收集其精液进行检测分析，并根据是否存在解脲支原体(ureaplasma urealyticum，UU)感染分为病例组(n=109)和对照组(n=189)，并对两组患者的精液质量进行分析，探讨解脲支原体感染对不育男性精液质量的影响。病例组平均年龄30.6±5.5岁，平均不育史16.8±6.6月，对照组31.1±4.8岁，平均不育史15.6±5.9月。两组患者性生活正常无明显睾丸、附睾、输精管等异常，无性传播疾病病史。

1.1.2 精液采集 嘱患者禁欲2～7 天后进行精液检测，患者于取精室安静状态下进行取精，首先用温水清洗手部及阴茎、龟头等部位，然后通过手淫的方法进行取精，应将精液全部射入无菌无毒精杯。取精成功后将无菌精杯迅速放入37℃培养箱中，待精液完全液化后进行相关指标检测。

1.2方法

1.2.1 解脲支原体感染检测 本研究中支原体检测试剂盒由珠海丽珠生物科技有限公司提供,按照说明操作，结果判断：UU培养基由黄变红，且清澈透明，判断为有解脲支原体生长，判断为阳性。

1.2.2 精子活力分析 采用计算机精液辅助分析系统进行检测，(检测设备为CASA系统，购自：北京中科科技有限公司)。精子活力分为前向运动、非前向运动和不动3级。

1.2.3 精子形态分析 采用拉薄技术制作适当厚度精子涂片，采用Diff-Quick染色试剂盒进行染色(试剂盒购自珠海丽珠生物科技有限公司)。计数200条精子的形态，统计正常形态精子数目及比例，精子头部畸形、中段畸形及尾部畸形精子数目及比例，并计算精子畸形指数与畸形精子指数。

1.2.4 顶体酶活性检 应用精子顶体酶活性检测试剂盒(购自：深圳博锐德生物科技有限公司)检测患者精子顶体酶活性，并根据试剂盒说明计算精子顶体酶活性。

1.2.5 精浆弹性蛋白酶水平 用精浆弹性蛋白酶定量测试剂盒 (购自：北京百奥莱博科技有限公司)测定患者精浆弹性蛋白酶水平，浓度测定大于1 000 ng/mL提示泌尿生殖道存在感染。

1.2.6 随访 对患者进行电话或门诊随访，记录患者妻子是否怀孕及怀孕时间。

1.3统计学处理

2 结 果

2.1解脲支原体感染与精子活力病例组患者精子总活力、前向运动率、精子存活率显著低于对照组，而精子浓度两组比较差别无统计学意义(P>0.05)，详见表1。

表1两组患者精子活力比较

组别n总活力(%)前向运动率(%)存活率(%)精子浓度(106/mL)病例组10943．2±13．6a31．3±15．1a53．3±17．2a43．8±6．6对照组18949．4±15．135．1±14．357．9±16．644．2±7．4

与对照组比较，a∶P<0.05

2.2解脲支原体感染与精子形态病例组患者精子正常形态率为(2.61±1.45)% 显著低于对照组(4.55±1.88)，且差别有统计学意义(P<0.05)；病例组精子头部畸形率显著高于对照组(82.6±4.1 vs 70.3±5.4)%，且差别有统计学意义(P<0.05)；而两组患者的精子畸形指数、畸形精子指数、中段畸形率和尾部畸形率差异无统计学意义(P>0.05)(图1)。

图1 两组患者解脲支原体感染与精子形态关系 与对照组比较，*：P<0.05

2.3解脲支原体感染与精子顶体酶活性如表2所示，病例组与对照组精子顶体酶活性分别为(58.6±26.8) μIU/106和(95.1±24.7) μIU/106，且病例组显著低于对照组(P<0.05)，其顶体酶异常率显著高于对照组(P<0.05)。

表2两组患者精子顶体酶活性及异常率比较

组别n顶体酶活性(μIU/106)异常率[n，(%)]病例组2858．6±26．89(32．1)对照组5195．1±24．77(13．7)t/χ22．493．80P0．010．04

2.4解脲支原体感染对精浆弹性蛋白酶的影响如图2所示，病例组21例患者与对照组28例患者进行了精浆弹性蛋白酶水平分析，病例和对照组中精浆弹性蛋白酶分别为(318.56±233.7) ng/ 1 mL和(268.8±186.6) ng/mL，病例组显著高于对照组(P<0.05)；以精浆弹性蛋白酶为判断泌尿生殖道解脲支原体感染的标准，其诊断敏感性为67.8% (95%CI:47.1%～87.4%)，特异性为66.7% (95%CI:43.5%～86.8%)，ROC曲线下面积为0.71(95%CI:0.57～0.86。

图2 精浆弹性蛋白酶判断解脲支原体感染的ROC曲线

2.5抗解脲支原体治疗对生育率影响病例组78例接受了阿奇霉素治疗(阿奇霉素0.5 g/日，口服，连续2周)，1月后复查，66例患者UU感染转为阴性，并对患者进行1年的随访。对两组患者1年内妻子受孕率进行比较，结果显示，试验组妻子怀孕几率明显高于对照组，且差别有统计学意义(HR=2.76，95%CI:1.26～6.06,P<0.05)，图3。

3 讨 论

图3 抗解脲支原体治疗对生育率影响曲线图

解脲支原体为体积介于细菌和病毒之间的一类病原体，直径仅有15～25 μm，是引发泌尿生殖系统感染的重要病原体之一。研究报道[4-5]，解脲支原体感染患者精液量减少，精子活力减弱，可能是是引发男性不育的重要原因之一。既往有文献报道[5]，男性不育患者中，解脲支原体感染的发生率明显高于正常男性，提示解脲支原体感染与男性不育存在流行病学上的相关性。进一步研究发现解脲支原体感染后男性精液质量变化，包括精液体积、精子浓度、活力、正常形态精子等降低[6]。同时，解脲支原体能够与男性精子结合，进而导致精子头部及颈部发生形态学改变，而精子尾部发生卷曲，导致精子的活动能力降低，前向运动能力降低，从而影响精子与卵子的正常结合，从而导致男性不育。周欢群，等[7]对广东地区143例男性不育患者的精液质量进行了分析，143例不育患者中，解脲支原体感染者为46例，感染率为32.2%。解脲支原体感染者精子形态正常率显著降低、顶体酶活性降低，顶体酶异常率升高(P<0.05); 而感染者精子前向运动率及总活力与无感染组比较无统计学差异(P>0.05)。胡建新，等[8]对贵州地区男性不育患者精子质量检测发现，不育患者精液中解脲支原体感染率为47.2% 明显高于周欢群等人报道到的32.2%，而我们发现男性不育患者解脲支原体感染率为36.6% 与周欢群等人的报道接近。胡建新，等[8]研究认为男性生殖道解脲支原体感染与精液中抗精子抗体的产生有相关性，从而导致男性生育能力下降。在本研究中，精液解脲支原体感染感染能够影响患者的精子总活力、前向运动率、精子正常形态率。而对患者的精子畸形指数、畸形精子指数、中段畸形率和尾部畸形率无明显影响，这与国内外相关文献报道基本一致[9-10]。同时本研究还发现感染组患者精子顶体酶活性显著降低，这可能是解脲支原体感染导致不育的重要原因。因为，精子与卵子的正常结合是受孕的基本条件，这个结合过程最重要的步骤就是精子发生顶体反应，精子顶体释放顶体酶和透明质酸酶，进而溶解透明带，能够使得精子顺利通过透明带与卵子结合完成DNA融合的授精过程，在此过程中，顶体酶无疑发挥重要作用。解脲支原体感染感染后，顶体酶水平降低，顶体异常率显著升高导致无法正常溶解透明带，从而无法顺利与卵子DNA融合完成授精过程。因此，理论上对解脲支原体感染患者进行抗解脲支原体治疗能够提高患者生育水平。在本研究中，我们对解脲支原体感染患者进行了阿奇霉素治疗，并对治疗后的患者进行了1年的随访，结果发现，78例患者接受阿奇霉素治疗(阿奇霉素0.5 g/日，口服，连续2周)，1年内妻子受孕率显高于对照组 (HR=2.76，95%CI:1.26～6.06,P<0.05)。但由于生育的因素可能与多种因素有关，如工作环境改变，性生活频率，年龄因素，女方因素等。因此，并不能说明UU感染是导致男性不育的直接原因。通过本研究，我们认为，解脲支原体感染可降低男性精液质量，是可能与男性不育有关，通过抗解脲支原体治疗有望提高患者生育机会。由于本研究为回顾性分析，容易受到信息偏倚的影响，且纳入患者例数较少，统计效能较低，结论的稳定性有待进一步证实。

[1] Wang RX，Fu C，Yang YP，et al.Male infertility in China:laboratory finding for AZF microdeletions and chromosomal abnormalities in infertile men from Northeastern China[J].J Assist Reprod Genet，2010,27(7):391-396.

[2] Wang Y，Han XD，Hou YY，et al.Ureaplasma urealyticum infection related to seminal plasma immunosuppressive factors，semen pH and liquefaction duration[J].Arch Andro，2005,51(4):267-270.

[3] Imudia AN，Detti L，Puscheck EE，et al.The prevalence of ureaplasma urealyticum，mycoplasma hominis，chlamydia trachomatis and neisseria gonorrhoeae infections，and the rubella status of patients undergoing an initial infertility evaluation[J].J Assist Reprod Genet，2008,25(1):43-46.

[4] Gdoura R，Kchaou W，Ammar-Keskes L，et al.Assessment of Chlamydia trachomatis，Ureaplasma urealyticum，Ureaplasma parvum，Mycoplasma hominis，and Mycoplasma genitalium in semen and first void urine specimens of asymptomatic male partners of infertile couples[J].J Andro，2008,29(2):198-206.

[5] Gdoura R，Kchaou W，Chaari C，et al.Ureaplasma urealyticum，Ureaplasma parvum，Mycoplasma hominis and Mycoplasma genitalium infections and semen quality of infertile men[J].BMC Infect Dis，2007,7:129.

[6] Zeighami H，Peerayeh SN，Safarlu M.Detection of Ureaplasma urealyticum in semen of infertile men by PCR[J].Pak J Biol Sci，2007,10(21):3960-3963.

[7] 周欢群，周文，陆杉.解脲支原体感染对不育男性精液质量的影响[J].暨南大学学报:自然科学与医学版，2015,36(4):340-343.

[8] 胡建新，何坚，孙兆林，等.解脲支原体感染与抗精子抗体阳性及其男性不育症的关系[J].临床泌尿外科杂志，2008,23(8):615-616.

[9] Huang C，Long X，Jing S，et al.Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis infections and semen quality in 19,098 infertile men in China[J].World J Urol，2016,34(7):1039-1044

[10] Liu J，Wang Q，Ji X，et al.Prevalence of Ureaplasma urealyticum，Mycoplasma hominis，Chlamydia trachomatis infections，and semen quality in infertile and fertile men in China[J].Urology，2014,83(4):795-799.

EffectsofUreaplasmaUrealyticumInfectionontheQualityofSemeninPatientsofMaleSterility

LIU Bolong，WANG Juanhua,TANG Zheng，et al
(DepartmentofAndriatrics，TheFirstAffiliatedHospitalofUniversityofSouthChina，HunanHengyang421001，China)

ObjectiveTo evaluate the effects of ureaplasma urealyticum(UU) infection on the quality of semen in patients of male sterility.Methods298 cases of male sterility diagnosed in this study in our hospital were retrospectivel.The semen was diveided into case group(n=109) and control group (n=189) accoding to whether or not infected with UU.The semen quality of the two groups were tested，the patients of case group

Azithromycin treatment and follow up for one year.The fertility rate was analyzed in the cases grop.ResultsCompared with the control group，the total sperm activity，the forward movement rate and survival rate spermatozoa was significantly lower，while sperm concentration between the two groups had no significant difference; The morphology normal rate of sperm in the case group was significantly lower than that in the control group (P<0.05)，the abnormal rate of sperm head in the case group was significantly higher，But the sperm deformity index，abnormal sperm index，sperm head deformity rate，central deformity rate and tail deformity rate were not statistically significant between the two groups (P>0.05).Compared with the control group，sperm terminal enzyme activity of the case group was significantly lower (P<0.05)，but the abnormal rate of sperm terminal enzyme and the seminal plasma elastase was significantly higher (P<0.05).According to plasma elastase，the diagnosis of UU infection of urinary and reproductive tract was 67.8% (95%CI:47.1%～87.4%)，and 66.7%(95%CI:43.5%～86.8%)，for sensitivity and specificity with area under the ROC curve of 0.71 (95%CI:0.57～0.86).In the case group，78 cases were treated with azithromycin for 2 weeks and with 1 year follow up，the wife's pregnancy rate was significantly higher than that of the control group，and the difference was statistically significant (HR=2.76，95%CI:1.26 ～ 6.06，P<0.05).ConclusionUreaplasma urealyticum infection can affect the quality of semen in patients with sterility，which could be one of the reasons for sterility.Anti treatment of ureaplasma urealyticum can elevated the rate of fertility.

ureaplasma urealyticum; infertility; semen quality; fertility

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.04.015

2016-05-04；

2016-06-16

*通讯作者，E-mail:2674918171@qq.com.

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