人免疫球蛋白对血液病患者梅毒螺旋体抗体检测的影响

王晓伟 靳丽丽 邵春燕 卓海龙 骆群

人免疫球蛋白对血液病患者梅毒螺旋体抗体检测的影响

王晓伟 靳丽丽 邵春燕 卓海龙 骆群

目的 分析血液病患者静注人免疫球蛋白前后梅毒螺旋体抗体检测结果的变化，为临床检验诊断提供参考。方法采用化学发光法（CLIA）试剂检测人免疫球蛋白血液病患者梅毒螺旋体抗体S/CO＞0.5标本52例，其中42例输注人免疫球蛋白，采用两种酶联免疫法（ELISA）试剂复查，梅毒螺旋体血凝实验（TPHA）进行确认。追踪9例血液病患者停止输注人免疫球蛋白后梅毒螺旋体抗体检测结果的变化。为将人免疫球蛋白（PH4）用生理盐水和AB型血浆倍比稀释，检测梅毒螺旋体抗体，比较体内外人免疫球蛋白检测结果。结果10例患者经TPHA确证为阳性。42例输注人免疫球蛋白的血液病患者梅毒螺旋体抗体经强生、万泰和索林试剂检测，阳性率分别为78.6%、88.1%和66.7%，TPHA确认均为阴性。9例患者停止输注人免疫球蛋白一段时间后，梅毒螺旋体抗体检测结果转为阴性。人免疫球蛋白用生理盐水和AB型血浆稀释前、后经3种试剂检测均有不同程度的阳性。结论人免疫球蛋白会引起血液病患者梅毒螺旋体抗体检测呈假阳性，有人免疫球蛋白输注史且梅毒螺旋体抗体检测阳性反应低的患者，建议停止输注3个月后复查梅毒螺旋体抗体。

人免疫球蛋白 梅毒螺旋体抗体 血液病

人免疫球蛋白静脉注射法可用以治疗原发性免疫缺陷综合征继发性免疫球蛋白缺陷病和自身免疫性疾病，生物半衰期为16～24 d。近年来，梅毒已成为严重危害我国公共卫生安全的问题之一[1]。梅毒检验方法因抗原制备方法不同分为非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试验，前者包括：VDRL、USR、RPR等，后者包括FTA-ABS、ELISA、TPHA、TPPA等。TPHA、TPPA操作简单且特异性、敏感性好，被广泛应用于确认试验。为探索人免疫球蛋白对梅毒螺旋体抗体检测的影响，用强生、索林和万泰三种试剂检测血液病患者梅毒螺旋体抗体52例，有42例患者至少有一种试剂检测为阳性，追踪发现这些患者均输注了哈尔滨派斯菲科静注人免疫球蛋白（PH4）。检测该PH4梅毒螺旋体抗体，同时对比检测成都蓉生药业有限责任公司的PH4。准确判断人免疫球蛋白对血液病患者梅毒螺旋体抗体检测结果的影响，对患者和临床检验诊断均具有重要意义。

对象与方法

1 对象 2014年1月～2015年3月本院临床送检的52例血液病患者标本，其中急性髓性白血病13例，急性白血病20例，骨髓增生异常综合征5例，急性淋巴细胞白血病6例，再生障碍性贫血2例，淋巴瘤2例，慢性粒单核细胞白血病1例，急性非淋巴细胞白血病1例，非霍奇金淋巴瘤1例，血小板减少症1例。

2 试剂 美国强生公司梅毒螺旋体抗体CLIA检测试剂盒（批号0360、0400、0440）；意大利索林公司梅毒螺旋体抗体ELISA诊断试剂盒（批号D278510、D309510）；北京万泰公司梅毒螺旋体抗体ELISA诊断试剂盒（批号N20140608）；哈尔滨派斯菲科人免疫球蛋白（批号20140601、20131213）；成都蓉生药业有限责任公司人免疫球蛋白（批号201206B041）。

3 仪器 爱康公司Uranus AE 280全自动酶免分析仪；强生公司Vitros3600全自动免疫分析仪。

4 方法

4.1 采用强生公司CLIA从患者标本中筛出静注人免疫球蛋白血液病患者梅毒螺旋体抗体S/CO＞0.5的血清样本，再采用索林公司和万泰公司两种ELISA试剂复查，将至少有一种试剂呈阳性反应的标本采用TPHA进行确证实验。

4.2 首先将哈尔滨派斯菲科和成都蓉生的不同批号的人免疫球蛋白用生理盐水和AB型血浆分别倍比稀释，然后用强生公司CLIA、索林公司和万泰公司两种ELISA试剂分别检测，最后用TPHA进行确认。TPHA试验是一种针对梅毒螺旋体抗体特异的灵敏的被动血凝试验。试验细胞是用螺旋体特异性抗原包被经过醛化和鞣化的鸡红细胞，对照细胞是没有用上述抗原包被的经过醛化和鞣化的鸡红细胞，如果是阳性标本，当和致敏的鸡红细胞混合后，抗体和抗原的结合会引起致敏血球的凝集，在血凝板底部形成凝集块，如为阴性标本，则血细胞在孔底形成致密的沉淀。

结 果

1 10例血液病患者经三种方法检测均为阳性，TPHA确认后均阳性。

2 42例输注人免疫球蛋白血液病患者梅毒螺旋体抗体检测结果见表1。这些患者输注前强生试剂检测均为阴性，输注中强生试剂检测阳性33例，阳性率为78.6%；万泰试剂检测阳性37例，阳性率为88.1%；索林试剂检测阳性28例，阳性率为66.7%。TPHA最后确认均为阴性。

3 9例输注人免疫球蛋白的血液病患者停止输注一段时间后梅毒螺旋体抗体检测前后的变化见表2。患者2经强生和万泰试剂检测均为阳性，索林试剂为阴性；患者7经万泰试剂检测为阳性，强生和索林试剂为阴性；患者30经万泰试剂检测为阳性，强生和索林试剂为阴性；其余6例患者经3种试剂检测均为阳性。9例患者停药后梅毒螺旋体抗体检测为阴性的停药时间最长为80 d。

4 哈尔滨派斯菲科人免疫球蛋白经不同稀释法梅毒螺旋体抗体检测结果见表3。用生理盐水稀释8倍，经强生和索林试剂检测均为阳性，稀释16倍及以后均为阴性，万泰试剂均为阴性；用AB型血浆稀释8倍，经强生和万泰试剂检测均为阳性，稀释16倍及以后均为阴性，万泰试剂原倍为阴性，索林试剂稀释4倍均为阳性，稀释8倍及以后均为阴性。

5 成都蓉生的人免疫球蛋白梅毒螺旋体抗体检测结果见表4。用生理盐水稀释，经强生检测原倍为阳性，其他均为阴性。用AB型血浆稀释，经强生检测原倍为阳性，稀释8倍经索林检测均为阳性，原倍及稀释16倍以后均为阴性。稀释2倍经万泰检测为阳性，原倍及稀释4倍以后均为阴性。

讨 论

人免疫球蛋白是健康人血浆、血清和胎盘血中分离提纯的免疫球蛋白制剂，主要用于某些疾病的预防和治疗，含健康人血清具有的各种抗体，有增强机体抵抗力以预防感染的作用[2]。静脉注射用免疫球蛋白含有广谱抗病毒、细菌或其他病原体的IgG抗体，具有免疫替代和免疫调节的双重作用。现有研究表明，人免疫球蛋白不传播HIV、CMV、HBV，可治疗原发性免疫球蛋白缺乏症、继发性免疫球蛋白缺陷病、同种异体骨髓移植和自身免疫性疾病，常用于血液病患者的辅助治疗。梅毒螺旋体是引起人类梅毒的病原体，随着性传播疾病的流行，其发病率有增加的趋势，部分无明显症状者为隐性感染[3]。近年来，由于梅毒感染率迅速增加，已成为国际社会共同关注的社会性问题[4]。检验方法因抗原制备方法不同分为非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试验，由于常规检测方法的局限性及其他因素的干扰，两类

梅毒血清学试验都存在生物学假阳性及假阴性问题，检测结果不能完全反映患者的真实情况。避免医疗纠纷，构建和谐医患关系一直是大家所期待的，准确的临床检验诊断结果尤为重要。

表1 静注人免疫球蛋白前后血液病患者梅毒螺旋体抗体检测结果

表2 输注人免疫球蛋白血液病患者的梅毒螺旋体抗体检测前后的变化比较

表3 哈尔滨派斯菲科人免疫球蛋白不同稀释法梅毒螺旋体抗体检测结果

表4 成都蓉生不同稀释法梅毒螺旋体抗体检测结果

本实验采用CLIA检测人免疫球蛋白血液病患者梅毒螺旋体抗体，对检测结果S/CO＞0.5的标本分别采用两种ELISA试剂复查，将3种试剂中至少有一种试剂有阳性反应的标本用TPHA最后确认。42例白血液病患者输注人免疫球蛋白前经强生试剂检测均为阴性，输注中强生试剂检测阳性33例，阳性率为78.6%；万泰试剂检测阳性37例，阳性率为88.1%；索林试剂检测阳性28例，阳性率为66.7%。三种试剂至少有一种试剂检测为阳性，TPHA最后确认均为阴性。机体若无梅毒抗原刺激，一般不会产生TPHA抗体，如产生抗体，则可能在体内存在很长时间甚至终生携带。TPHA是利用间接血凝法测定人血清或血浆中梅毒螺旋体的特异性抗体，只要有微量的抗体就可成为致敏的红细胞发生凝集作用，试剂盒配制的血清吸收剂可消除试验中的生物学假阳性反应，提高实验的特异性。此实验用于确诊梅毒，具有快速、简便、敏感和特异等特点，但不适宜大样本量检测[5]。追踪9例患者停止输注人免疫球蛋白一段时间后，梅毒螺旋体抗体检测为阴性，TPHA确认也为阴性，说明输注人免疫球蛋白患者产生的抗体可能是非特异性的。9例患者停药后梅毒螺旋体抗体检测为阴性的停药时间最长为80 d，建议静注人免疫球蛋白的血液病患者停止输注3个月后复查梅毒螺旋体抗体。哈尔滨派斯菲科的人免疫球蛋白梅毒螺旋体抗体用生理盐水稀释，经万泰试剂检测为阴性，AB型血浆稀释后经万泰试剂检测均为阳性，说明万泰试剂对该检测的敏感性较好。分析原因可能与人体内pH环境及人免疫球蛋白进入机体后与血浆作用有关，具体机制待进一步研究证实。人免疫球蛋白输入人体后被稀释的倍数远大于实验检测稀释的倍数，但仍能检测出梅毒螺旋体抗体，可能与患者持续输注或人免疫球蛋白能够刺激机体产生非特异性梅毒螺旋体抗体有关。将成都蓉生的人免疫球蛋白用生理盐水和AB型血浆倍比稀释，用3种方法检测也有不同的阳性反应，说明国内其他厂家的试剂也能引起梅毒螺旋体抗体检测假阳性。

人免疫球蛋白引起血液病患者梅毒螺旋体抗体检测假阳性，应结合初筛试验、确认试验和患者临床、流行病学资料综合分析。有人免疫球蛋白输注史且梅毒螺旋体抗体检测阳性反应低的患者，建议停止输注3个月后复查梅毒螺旋体抗体。

1 俞树荣．微生物和微生物学检验[M]．第2版．北京：人民卫生出版社，2001：320-323．

2 徐洋.丙种球蛋白及其应用[J].贵州医药，2005，29（9）：863.

3 贾月琴，季必华．梅毒螺旋体实验室诊断研究进展[J].安徽医学，2005，26（5）：453-454．

4 李静，赵媛春，杨丽．3585例婚前医学检查人群梅毒感染情况分析[J]．中外医学研究，2011，9（28）：26-27．

5 邵春燕，王海平，卓海龙.化学发光法检测输血前梅毒特异性抗体复查策略的研究[J].临床输血与检验，2015，2（17）：46-48.

Influence of Human Immunoglobulin on the Detection of Antibodies to Syphilis in Patients with Hematopathy

WANG Xiao-wei，JIN Li-li，SHAO Shun-yan，et al. Department of Transfusion Medicine，Affiliated Hospital of Academy of Military Medical Science 100071

Objective To Analyze the change of Syphilis antibodies in patients with hematopathy before or after use of human Immunoglobulintreatment，and provide a reference for clinical diagnosis.MethodFifty-two cases of Syphilis antibody absorbance signal of sample cutoff value（S/CO）＞0.5 in patients with hematological diseases were detected by chemiluminescence immunoassay （CLIA），42 of them were injected with human immunoglobulin. Two ELISA reagents were used for verication. Syphilis haemagglutination assay（TPHA） was performed for confirmation. Nine cases were followed up for detection of Syphilis antibody after withdraw of human Immunoglobulin administration. To compare the results of human Immunoglobulin in vivo and in vitro，times dilution the Harbin Paisi ficco Human Immunoglobulin with saline and AB type plasma to detect Syphilis antibody，simultaneous test the results of Chengdu rongsen Human Immunoglobulin（PH4）.Result10 patients showed positive TPHA，42 patients who had received human Immunoglobulin injection presented positive rates of 78.6%，88.1% and 66.7% in Syphilis antibody detection when tested by different reagents purchased from Johnson，Wan Tai and Sorin，TPHA，however，was found to be negative in all patients. Nine patients revealed positive Syphilis antibody after withdraw of human Immunoglobulin.ConclusionHuman Immunoglobulin administration may cause a false positive detection of Syphilis antibody in patients with hematological diseases. The patients with the experience of human Immunoglobulin treatment together with low Syphilis antibody reaction should be re-checked for Syphilis antibody after three months.

Human immunoglobulin Syphilis antibody Hematopathy

R446.11 R377+.1 R552

A

1671-2587（2017）01-0040-04

2016-10-12）

（本文编辑：王虹）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.01.011

100071 北京，军事医学科学院附属医院

王晓伟（1988–），女，技师，学士，主要从事临床输血检验工作，（Tel）18600962758（E-mail）wangxiaowei.nm@163.com。

骆群，男，副主任医师，博士，主要从事临床输血研究，（E-mail）luoq66@aliyun.com。