蒲公英和苦参苦寒药物对脾胃虚寒实验大鼠模型的影响※

2017-03-01 01:18尹建康陈建章王小平侯春久唐春红汤灿辉
中国中医药现代远程教育 2017年4期
关键词:苦寒苦参蒲公英

尹建康 陈建章 王小平 侯春久 唐春红 汤灿辉

(江西中医药高等专科学校药学系,抚州344000)

蒲公英和苦参苦寒药物对脾胃虚寒实验大鼠模型的影响※

尹建康 陈建章 王小平 侯春久 唐春红 汤灿辉

(江西中医药高等专科学校药学系,抚州344000)

目的观察常见两种苦寒药物蒲公英、苦参不同剂量提取液对脾胃虚寒实验大鼠模型的影响。方法制备脾胃虚寒实验大鼠模型,以两种苦寒药物不同剂量的提取液为受试物,检测胃重、胃排空率以及利用酶联免疫法测定血清当中的胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)和前列腺素E2(PGE2)指标在不同组别的变化情况。结果蒲公英高剂量组对胃排空、PGE2、GAS有非常显著性差异,对胃重指数、MTL有显著性差异。蒲公英中剂量组对胃排空、GAS与模型组有非常显著性差异,对胃重指数、PGE2、MTL有显著性影响。蒲公英低剂量组对胃排空率、GAS、PGE2有显著性差异,对其它指标无显著性差异。苦参高剂量组和中剂量组对所有指标与模型组比较均无显著性差异。苦参低剂量组对胃重指数、GAS、MTL有显著性差异,其它指标无显著性差异。结论蒲公英高、中、低剂量组对脾胃虚寒实验大鼠均有很好的治疗作用,说明具有健胃功效,且中剂量组作用比较明显。苦参低剂量组对脾胃虚寒实验大鼠有一定的治疗作用,表现出健胃功效。

蒲公英;苦参;脾胃虚寒;动物实验

蒲公英,干燥全草入药,味苦甘、性寒,具有清热解毒、消肿散结、利尿通淋之功效。蒲公英主要含甾醇类、胆碱、有机酸、菊糖、橡胶等。现代药理研究表明:蒲公英具有抗病原微生物;促进胃及十二指肠的收缩和抗胃酸分泌;抗肿瘤;降血糖等作用[1]。中药苦参根类入药,性寒味苦,具有清热燥湿、杀虫、利尿的功能,主要含有氨基酸类、糖类、脂肪酸类、三萜皂苷类、甾醇类、生物碱类等主要成分。现代药理研究表表明:苦参具有抗寄生虫作用;抗菌,作用;抗肿瘤;抗病毒;抗炎等作用[2]。以上两种常见苦寒药物符合不少学者认为的苦寒药有伤胃之弊,尤其是脾胃虚寒者。同时,有的学者认为苦寒药伤胃主要与其寒性、用量和某些药物的毒副作用有关[3]。本次研究通过具体的实验来说明苦寒药物对脾胃虚寒大鼠的影响。探究苦寒药物健胃与伤胃的具体情况。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物SPF级健康SD大鼠,体重:180~220 g,雌雄兼用,许可证号:SCXK(湘)2009-0012,饲料证号:SCXK(湘)2009-0013,以上动物由湖南长沙天勤生物科技服务部提供。

1.1.2 药物及试剂蒲公英、苦参(均购于江西省中医药高等专科学校附属医院);经本校中药鉴定教研室鉴定为正品。2-硫代巴比妥酸(TBA);雷尼替丁(成都永康制药有限公司);胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、以上试剂盒均购于南京建成生物工程研究所;其它试剂均为分析纯。

1.1.3 仪器UV-2250岛津紫外可见分光度计(岛津公司);电子天平(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂);离心机(北京医用离心机厂);移液枪(大龙医疗设备有限公司);酶标仪(北京普天新桥技术有限公司);洗板机(北京普天新桥技术有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 蒲公英、苦参提取液的制备取蒲公英200 g,加入足量的水使水的液面超过药材大约2 cm,浸泡30 min后,武火加热至沸腾,再微沸30 min,过滤,待药材稍凉后再加入适量的水再一次加热至沸腾后微沸30 min。过滤并合并两次滤液。浓缩浓度至含2 g/mL生药备用。苦参提取液的制备方法同蒲公英。

1.2.2 SD大鼠脾胃虚寒模型的制备SD大鼠,体重180~220 g,雌雄各半,除空白组10只动物外,其它大鼠分别编号后,自由饮水,喂食。每天两次灌胃,上午冷白醋(约4℃)1.2 ml/100 g[4],下午精炼猪油脂1 ml/100 g[4-5]。连续10天后,观察动物出现进食减少、倦卧少动、大便稀溏、肢体温度降低、体重增长减慢等,即为模型成立。造模期间统计记录每天大鼠的饮食量,体重情况和饮水量。对造模成功的动物按照体重进行随机分组。具体分组情况见表1。

1.2.3 给药及实验动物的处理根据临床上蒲公英和苦参的最少使用剂量,按照大鼠与人的体表面积计算公式分别确定蒲公英和苦参在实验大鼠的低剂量,并乘以相关的系数确定中剂量和高剂量,具体给药剂量详见表1。除空白组,模型组外,其它各组分别给予相应的药物灌胃,1次/d,连续7 d。末次给药前一天停止进食,但饮水自由。末次给药2 h后,除空白对照组及模型对照组灌服等体积蒸馏水外,每只大鼠灌服2 mL0.01%酚红溶液(含20%明胶),20 min后切割颈静脉处死大鼠,将血浆置于3500 rpm离心15 min,吸取上清液采用酶联免疫法分别测定血浆中胃泌GAS,MTL。解剖大鼠取胃,结扎幽门和贲门。称重后,将其置于50 mL 0.5 mol/LNaOH溶液中,沿胃大弯剪开胃,充分洗下胃内容物,取5 mL离心(3000 rpm,10分钟)。吸上层溶液用UV-2250岛津紫外可见分光光度计于560 nm波长测其吸光度,计算胃排空率。大鼠胃排空率=(1-实测酚红吸光度/标准酚红吸光度)×100%。并将洗净的胃在滤纸上吸干水分,测定胃重,并计算胃重指数。大鼠胃重指数=胃重/体重×100%。将胃用生理盐水洗净后刮取胃粘膜约200 mg,加生理盐水2 mL于冰浴下制成匀浆,匀浆液3500 rpm离心15 min取上清液。

1.3 统计学方法采用SPSS16.0统计软件进行统计处理,双侧检验,剂量资料用(±s)D表示,其中符合正态性,采用两两比较的t检验;不符合,采用秩和检验。P<0.05即认为差异有统计学意义;P<0.01即认为差异有高度统计学意义。

2 结果

2.1 蒲公英、苦参提取液对脾胃虚寒大鼠胃排空、胃重指数的影响蒲公英高剂量组对胃排空有非常显著性差异,对胃重指数有显著性差异。蒲公英中剂量组对胃排空与模型组有非常显著性差异,对胃重指数有显著性影响。蒲公英低剂量组对胃排空率有显著性差异,对其它指标无显著性差异。苦参高剂量组和中剂量组对所有指标与模型组比较均无显著性差异。苦参低剂量组对胃重指数有显著性差异,其它指标无显著性差异。详细结果见表1

表1 蒲公英、苦参提取液对脾胃虚寒大鼠胃排空、胃重指数的影响(n=10,±s)

表1 蒲公英、苦参提取液对脾胃虚寒大鼠胃排空、胃重指数的影响(n=10,±s)

注:与模型对照组比较▲P<0.05,▲▲P<0.01

组别剂量(g / k g)胃排空空白组模型组蒲公英高剂量组蒲公英中剂量组蒲公英低剂量组苦参高剂量组苦参中剂量组苦参低剂量组雷尼替丁组--1 2 . 3 3生药4 . 1 1生药1 . 3 7生药1 2 . 3 3生药4 . 1 1生药1 . 3 7生药0 . 0 2 8 0 . 7 6 4 9 ± 0 . 0 9▲▲0 . 5 0 0 8 ± 0 . 1 1 0 . 6 8 7 7 ± 0 . 1 2▲▲0 . 6 5 0 9 ± 0 . 1 5▲▲0 . 6 0 2 3 ± 0 . 0 7▲0 . 5 2 1 3 ± 0 . 1 5 0 . 5 2 8 5 ± 0 . 0 7 0 . 5 9 9 8 ± 0 . 1 3 0 . 5 9 3 5 ± 0 . 0 6▲胃重指数(%)0 . 2 0 ± 0 . 0 7▲▲0 . 3 4 ± 0 . 0 9 0 . 2 5 ± 0 . 0 7▲0 . 2 3 ± 0 . 0 8▲0 . 2 6 ± 0 . 0 5 0 . 3 2 ± 0 . 1 1 0 . 3 0 ± 0 . 0 9 0 . 2 6 ± 0 . 0 8▲0 . 2 2 ± 0 . 0 5▲▲

2.12 蒲公英、苦参提取液对脾胃虚寒大鼠GAS、MTL、PGE2的影响蒲公英高剂量组对PEG2、GAS有非常显著性差异,对MTL有显著性差异。蒲公英中剂量组对GAS与模型组有非常显著性差异,对PGE2、MTL有显著性影响。蒲公英低剂量组对GAS、PGE2有显著性差异,对MTL无显著性差异。苦参高、中剂量组对所有指标与模型组比较均无显著性差异,苦参低剂量组对GAS、MTL有显著性差异,对PGE2无显著性差异。详细结果见表2

表2 蒲公英、苦参提取液对脾胃虚寒大鼠GAS、MTL、PGE2的影响(n=10±s)

表2 蒲公英、苦参提取液对脾胃虚寒大鼠GAS、MTL、PGE2的影响(n=10±s)

注:与模型对照组比较▲P<0.05,▲▲P<0.01

组别剂量(g / k g)P G E2( p g / m l )空白组模型组蒲公英高剂量组蒲公英中剂量组蒲公英低剂量组苦参高剂量组苦参中剂量组苦参低剂量组雷尼替丁组--1 2 . 3 3生药4 . 1 1生药1 . 3 7生药1 2 . 3 3生药4 . 1 1生药1 . 3 7生药0 . 0 2 8 1 0 0 . 2 1 ± 7 . 0 2▲▲7 9 . 8 3 ± 1 0 . 2 5 9 4 . 2 3 ± 9 . 5 5▲▲8 9 . 2 3 ± 6 . 4 1▲8 8 . 9 5 ± 7 . 0 6▲8 3 . 1 9 ± 6 . 9 3 8 6 . 9 7 ± 8 . 1 5 8 7 . 2 2 ± 9 . 7 4 9 3 . 4 5 ± 7 . 0 4▲▲G A S ( p g / m l ) 6 2 . 4 4 ± 1 0 . 8 1▲▲4 3 . 5 4 ± 9 . 1 2 5 7 . 6 3 ± 8 . 3 2▲▲5 3 . 7 7 ± 6 . 0 9▲▲5 0 . 7 3 ± 6 . 7 8▲4 6 . 9 9 ± 1 1 . 0 3 4 7 . 8 5 ± 8 . 3 2 5 0 . 8 6 ± 7 . 7 2▲5 8 . 0 7 ± 6 . 3 5▲▲M T L ( p g / m l ) 8 7 . 8 2 ± 1 2 . 5 1▲▲6 3 . 4 0 ± 1 1 . 7 5 7 3 . 8 5 ± 1 0 . 1 6▲7 5 . 3 6 ± 9 . 0 6▲7 0 . 2 1 ± 9 . 7 7 6 6 . 8 7 ± 9 . 2 5 6 7 . 5 3 ± 1 1 . 0 9 7 2 . 9 7 ± 8 . 5 6▲8 2 . 6 5 ± 8 . 7 1▲▲

3 讨论

本次研究以蒲公英和苦参两种常见的苦寒药物为代表。而苦寒伤胃之说也一直是历代医药学者非常重视的问题。过用苦寒药导致患者纳呆、脘痞、便溏、乏力等的临床事实说明苦寒伤胃现象的客观存在。本研究立足在经典的脾胃虚寒模型[9]的基础上对两种不同药物,三种不同剂量,选择了能够客观反映胃部变化的五个指标进行了研究。其中胃重指数是指胃的湿重与大鼠体重的比值的百分比,实验胃重指数增加可能是因为胃充血、水肿和炎症等导致,也可能是因为大鼠体重下降而导致的假性增大。具体原因还需要进一步研究确定。

蒲公英高、中剂量组对所有的指标与模型组组均有显著性差异,有的指标存在非常显著性差异,可以看出蒲公英的高、中剂量对实验大鼠有很好的治疗作用。从指标的变化趋势上看,高剂量组对指标的变化比中剂量更加明显。蒲公英低剂量组对PGE2、GAS和胃排空也有明显的变化,只是效果的程度还需要进一步的研究证明。苦参高剂量和中剂量对实验动物指标没有明显改善,且实验中动物的行为表现也没有改善。苦参低剂量对GAS、MTL和胃重指数有明显变化,苦参低剂量对实验大鼠有改善作用,具体的效果还需要进一步实验来证明。

通过以上两种苦寒药物对脾胃虚寒实验大鼠模型的影响结果分析,苦寒药存在着健胃之功效,同时也佐证了传统意义上苦寒药的伤胃作用,且大剂量应用苦寒药物伤胃作用可能更加明显。苦寒药物伤胃与健胃的对应剂量和作用大小,与苦寒药物自身苦寒性的强弱有较密切的关系。苦寒药物伤胃与健胃的具体结论,还需要更深入的苦寒药物实验研究来确定。

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Effect of Dandelion and Lightyellow Sophora Root Bitter Cold Medicine on Experimental Rat Model of Deficient Cold of Spleen and Stomach

YIN Jiankang,CHEN Jianzhang,WANG Xiaoping,HOU Chunjiu,TANG Chunhong,TANG Canhui
(Department of Pharmacy,Jiangxi College of Traditional Chinese Medicine,Jianxi Province,Fuzhou 344000,China)

Objective To observe the effect of two common drugs Dandelion and lightyellow sophora root bitter different doses of scutellaria baicalensis georgi extract of spleen and stomach cold on experimental rat model.Methods Preparation of spleen and stomach cold experimental model of rats,with two kinds of bitter cold drug decoction of different doses for the test drug,by detecting the rate of gastric emptying,gastric mass index and serum gastrin(GAS),motilin(MTL),prostaglandin E2(PGE2)indicators observe the effects of the two drugs on the bitter cold of spleen and stomach rats.Results Dandelion high dose group of gastric emptying,PGE2,GAS has a very significant difference,the stomach weight index,MTL had significant difference;Dandelion medium dose group of gastric emptying,GAS compared with model group,there was a very significant difference,the stomach weight index,PGE2, MTL had significant difference.Dandelion low dose group of gastric emptying rate,GAS,PGE2have significant difference,and there was no significant difference on other indicators.Bitter high and medium dose group of all indicators compared with model group,and there was no significant difference.Bitter low dose group of stomach weight index,GAS,MTL has significant difference,and other indicators had no significant difference.Conclusion Dandelion high,medium and low dose group of spleen and stomach cold experimental rat all have very good therapeutic effect.And the medium dose group effect is more noticeable.Bitter low dose group of spleen and stomach cold experimental rats has a certain therapeutic effect,and show a good effect.

Dandelion;lightyellow sophora root;deficient cold of spleen and stomach;animal experiment

10.3969/j.issn.1672-2779.2017.04.059

1672-2779(2017)-04-0133-03

:张文娟本文校对:王小平

2016-10-27)

江西省卫生厅中医药基金重点课题项目【No:2010Z04】

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