子宫内膜异位症患者病灶组织和血清VEGF-A、CA125表达变化及其意义

陆月梅，卢红，刘娅，陈丽平

(1南通大学附属海安县人民医院，江苏南通226600；2南通大学第二附属医院226001)

子宫内膜异位症患者病灶组织和血清VEGF-A、CA125表达变化及其意义

陆月梅1，卢红1，刘娅1，陈丽平2

(1南通大学附属海安县人民医院，江苏南通226600；2南通大学第二附属医院226001)

目的 观察子宫内膜异位症(EMs)患者病灶组织和血清中血管内皮生长因子A(VEGF-A)、糖类抗原125(CA125)表达变化，并探讨其意义。方法 选择EMs患者40例为病例组，子宫内膜正常的子宫肌瘤患者20例为对照组，留取病例组的异位内膜组织、在位内膜组织，留取对照组的正常内膜组织。采用Western blotting检测病例组异位内膜组织、在位内膜组织及对照组正常内膜组织中的VEGF-A、CA125，采用ELISA法检测病例组术前、术后及对照组术前血清中的VEGF-A、CA125。分析VEGF-A、CA125联合检测诊断EMs的敏感度、特异度及准确率。结果 病例组异位内膜组织中VEGF-A、CA125相对表达量高于在位内膜组织及对照组(P均<0.05)。病例组术后血清VEGF-A、CA125表达水平低于术前，手术前后血清VEGF-A、CA125表达水平均高于对照组(P均<0.01)。病例组异位内膜组织中VEGF-A、CA125与术前血清中VEGF-A、CA125表达呈正相关关系(r分别为0.956、0.882，P均<0.01)；对照组正常内膜组织中VEGF-A、CA125与血清中VEGF-A、CA125表达呈正相关关系(r分别为0.851、0.876，P均<0.05)。血清VEGF-A、CA125联合检测诊断EMs的敏感度、特异度及准确率分别为92.50%、95.00%、93.33%。结论 EMs患者病灶组织及血清中VEGF-A、CA125表达水平升高；VEGF-A、CA125可能参与了EMs的发生、发展；血清VEGF-A、CA125联合检测可能有助于提高对EMs的诊断效能。

子宫内膜异位症；血管内皮生长因子A；糖类抗原125

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2014年1月～2016年3月在南通大学附属海安县人民医院妇科行手术治疗、术后病理诊断为EMs的40例患者为病例组，年龄20～46(35.0±4.6)岁；选择同期诊断为子宫肌瘤需手术治疗、术后病理证实为子宫肌瘤且子宫内膜正常的患者20例为对照组，年龄23～50(41.0±5.3)岁。所有患者入院前半年内均未服用激素类药物，且均排除内分泌疾病及其他内、外科疾病。收集两组术前、术中诊断性刮宫或术中、术后采集的组织标本，放置-80 ℃冰箱保存。

1.2 异位内膜组织及在位内膜组织中VEGF-A、CA125检测 采用Western blotting法检测病例组的异位内膜组织、在位内膜组织及对照组正常内膜组织中的VEGF-A、CA125。取标本组织，加入RIPA裂解液制成匀浆，蛋白定量后稀释成3 g/L，行SDS-PAGE电泳分离蛋白，经半干转印系统转膜，5%脱脂奶粉室温封闭2 h后用5%脱脂奶粉稀释的鼠抗VEGF-A或CA125单克隆抗体(1∶500)及小鼠抗β-actin单克隆抗体(1∶1 500)室温孵育1 h，4 ℃过夜。次日洗涤后加入用5%脱脂奶粉稀释的结合有HRP的羊抗鼠IgG(1∶2 000)和羊抗小鼠IgG(1∶2 000)，室温孵育2 h，洗涤后行ECL显色。以目的蛋白条带灰度值与β-actin内参条带灰度值的比值表示目的蛋白相对表达量。

1.3 血清中VEGF-A、CA125检测 两组患者入院后或术前采取静脉血，静置、离心后取其上清液，置于-80 ℃冰箱保存。病例组术后1个月复查，采集静脉血分离血清，置于-80 ℃冰箱保存。采用ELISA法检测两组血清中的VEGF-A、CA125。

1.4 血清VEGF-A、CA125联合检测对EMs的诊断效能分析 分析血清VEGF-A、CA125联合检测诊断EMs的敏感度、特异度及准确率。

2 结果

2.1 两组异位内膜组织及在位内膜组织中VEGF-A、CA125表达比较 病例组异位内膜组织中VEGF-A、CA125相对表达量分别为0.901 2±0.106 4、0.811 1±0.112 5，在位内膜组织中分别为0.125 3±0.042 5、0.096 4±0.037 8；对照组正常内膜组织中VEGF-A、CA125相对表达量分别为0.118 9±0.043 2、0.100 2±0.040 8。病例组异位内膜组织中VEGF-A、CA125相对表达量高于在位内膜组织及对照组(P均<0.05)。

2.2 两组血清中VEGF-A、CA125表达比较 病例组术前血清VEGF-A、CA125表达水平分别为(721.35±95.61)pg/mL、(33.67±10.66)μg/mL，术后分别为(368.20±33.68)pg/mL、(20.88±9.92)μg/mL；对照组血清VEGF-A、CA125表达水平分别为(115.5±78.24)pg/mL、(15.30±6.01)μg/mL。病例组术后血清VEGF-A、CA125表达水平低于术前，手术前后血清VEGF-A、CA125表达水平均高于对照组(P均<0.01)。

2.3 内膜组织VEGF-A、CA125表达水平与术前血清VEGF-A、CA125表达水平的相关性 病例组异位内膜组织中VEGF-A、CA125与术前血清中VEGF-A、CA125表达呈正相关关系(r分别为0.956、0.882，P均<0.01)；对照组正常内膜组织中VEGF-A、CA125与血清中VEGF-A、CA125表达呈正相关关系(r分别为0.851、0.876，P均<0.05)。

2.4 血清VEGF-A、CA125联合检测对EMs的诊断效能 VEGF-A单项检测诊断EMs的敏感度、特异度及准确率分别为75.00%、95.00%、81.67%；CA125单项检测诊断EMs的敏感度、特异度及准确率分别为88.88%、95.00%、92.11%；VEGF-A、CA125联合检测诊断EMs的敏感度、特异度及准确率分别为92.50%、95.00%、93.33%。

3 讨论

目前EMs的诊断金标准为腹腔镜探查及病理检查，但均属于有创性检查[5]。血清CA125升高是EMs的诊断标准之一。除肿瘤以外，早孕、炎症反应及EMs人群血清CA125也会升高。CA125单项检测诊断EMs的敏感度、特异度和准确率均不理想[3]。寻找对EMs有较好诊断效能的检查方法已成为广大临床工作者关注的问题。关于EMs的发病机制有多种学说，目前被广泛接受的是经血逆流种植学说，但经血逆流现象普遍，而EMs发病率仅为10%左右[6～8]，这说明经血逆流只是诱因，关键与内膜的异位种植生长有关。经血中的子宫内膜能成功地异位种植生长，与局部毛细血管的新生密不可分[9～11]。因此，新生血管生成已成为EMs发病机制、治疗策略及诊断相关研究的热点。

VEGF是一种高度特异的血管内皮细胞有丝分裂素，能够提高微血管通透性，改变细胞外基质成分，以利于新生血管的生长[5]。很多学者[6,7]观察到EMs患者的异位病灶、血液、腹腔液中多种血管生成因子水平明显增高。VEGF可分为A、B、C、D、E五个亚型，其中VEGF-A是最常见的一型，主要与VEGF受体1、2结合发挥生物学效用[12]。目前国内外多项研究[13～15]报道了EMs患者血清和组织中VEGF的表达及其在EMs诊断、治疗中的价值，但对VEGF-A、CA125联合检测诊断EMs的效能报道较少。

本研究分别纳入EMs患者及子宫内膜正常的子宫肌瘤患者，观察EMs病灶组织及血清中VEGF-A、CA125的表达变化，结果显示病例组异位内膜组织中VEGF-A、CA125相对表达量高于在位内膜组织及对照组；病例组术后血清VEGF-A、CA125表达水平低于术前，手术前后血清VEGF-A、CA125表达水平均高于对照组。上述结果提示VEGF-A高表达可能与EMs的发病、进展有关，血清VEGF-A水平可能在EMs术后随访评估中有一定应用价值。另外，我们分析了病灶组织与血清中两项指标的相关性，发现病例组异位内膜组织中VEGF-A、CA125表达与术前血清中VEGF-A、CA125表达呈正相关关系，对照组正常子宫内膜组织中VEGF-A、CA125表达与血清中VEGF-A、CA125表达也呈正相关关系，由此说明EMs患者血清VEGF-A、CA125表达水平变化趋势与病灶组织中的一致。进一步分析得出，血清VEGF-A、CA125联合检测诊断EMs的敏感度、特异度及准确率分别为92.50%、95.00%、93.33%，高于CA125单独检测对EMS的诊断效能[16]，说明VEGF-A、CA125联合检测对EMs的诊断效能更好。

综上所述，EMs患者病灶组织和血清中VEGF-A、CA125表达水平升高，VEGF-A、CA125可能参与了EMs的发生、发展；血清VEGF-A、CA125联合检查有助于提高对EMs的诊断效能。然而，本研究样本量较少，上述结论仍有待于进一步证实。

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(收稿日期：2016-10-08)

南通市卫生局青年科研基金项目(WQZ2015016)。

陈丽平(E-mail: 1193136107@qq.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.03.026

R711.71

B

1002-266X(2017)03-0081-03

2016-06-28)

子宫内膜异位症(EMs)可引起患者痛经、月经紊乱、不孕及盆腔痛，严重影响中青年妇女的生活质量[1]。EMs虽为良性病变，但具有类似恶性肿瘤的局部种植、浸润生长及远处转移能力[2]。目前，血清糖类抗原125(CA125)升高是EMs的诊断标准之一，但CA125对EMs的诊断敏感度、特异度、准确率均不尽如人意[3]。血管形成在EMs的发生、发展过程中具有重要作用。近年来发现血管内皮生长因子(VEGF)参与了EMs的病理过程[4]。本研究观察了EMs患者病灶组织和血清中VEGF-A、CA125的表达变化，并探讨其意义。