急性髓系白血病患者血清腺苷脱氨酶测定的意义

韩静颖，张之芬，鞠瑛，刘天璞，李祯，李元堂，张炳昌

(山东大学附属省立医院检验医学部，山东济南250021)

急性髓系白血病患者血清腺苷脱氨酶测定的意义

韩静颖，张之芬，鞠瑛，刘天璞，李祯，李元堂，张炳昌

(山东大学附属省立医院检验医学部，山东济南250021)

目的探讨血清腺苷脱氨酶(ADA)在急性髓系白血病(AML)的变化规律及其意义。方法收集山东省立医院2012年1月至2013年12月75例治疗前急性髓系白血病患者(其中63例AML患者进行自身治疗前后比较)和86例健康对照者外周血血清。采用PNP-XTO-POD偶联连续监测法测定血清腺苷脱氨酶(ADA)水平，采用速率法测定谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和谷氨酰转肽酶(GGT)水平。检测健康对照组与AML组血清ADA水平，比较AML治疗前后ADA水平变化，采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)确定ADA最佳截点，并将AML治疗前患者分为低ADA组(ADA＜13.50 U/L)和高ADA组(ADA≥13.50 U/L)，分析两组间年龄、性别、AST、ALT和GGT差异。结果AML组患者ADA水平[15.30(9.50，31.30)U/L]显著高于健康对照组[8.45(7.05，11.35)U/L]，差异有统计学意义(P＜0.001)；AML组治疗后ADA水平[10.70(8.10，14.90)U/L]显著低于AML治疗前[14.70(9.60，26.70)U/L]，差异有统计学意义(P＜0.001)；采用ROC曲线，将AML治疗前患者分为高ADA组(ADA≥13.50 U/L)和低ADA组(ADA＜13.50 U/L)，其中高ADA组中AST、ALT及GGT水平显著高于低ADA组(AST Z=-3.102，P= 0.002；ALT Z=-2.046，P=0.041；GGT Z=-2.794，P=0.005)。结论ADA检测可以作为AML患者的一项常规辅助检查，对AML的疾病诊断及评估病情的发展具有一定的价值。

急性髓系白血病；腺苷脱氨酶；谷草转氨酶；谷丙转氨酶；谷氨酰转肽酶

腺苷脱氨酶(adenosine deaminase，ADA)是参与嘌呤核苷酸代谢的重要酶，参与核酸分解代谢、催化腺苷和脱氧腺苷脱氨转变成次黄嘌呤核苷过程中的酶，是与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶类[1]，血液中ADA主要存在于血细胞中，如红细胞、淋巴细胞和粒细胞，其中T淋巴细胞比B细胞活性更高[2]。文献有关ADA报道多见于与肝病及结核病的研究[3-5]，但关于ADA在AML方面研究比较少见。

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)是常见的一种造血系统克隆性恶性疾病，是髓系祖细胞在发育过程中受阻于分化成熟的某一定阶段，因白血病细胞的自我更新增殖、增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等，在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积而停滞在细胞发育的早期阶段[6]。近年来，AML的高发病率越来越引起人们的重视，研究发现ADA水平与急性白血病存在密切相关性，已有文献报道动态监测ADA水平有助于对急性白血病患者的疗效和预后[7]。本文测定AML患者血清ADA水平及与其他指标的相关性，进而探讨ADA水平在AML疾病中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2012年1月至2013年12月在山东省立医院治疗的AML患者共75例为AML组，男性41例，女性34例，年龄3～83[36.00(21.50,57.50)]岁。所有病例均经血液、骨髓细胞学检查及急性白血病形态免疫细胞遗传学分型确诊为AML，均已排除心、肝、肾、重症联合免疫缺陷(SCID)、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、肿瘤、脑膜炎、其他肿瘤者。选择同期在山东省立医院体检中心的健康体检者86例，男性38例，女性48例，年龄6～72[38.50(28.00，52.25)]岁，为健康对照组。AML组和健康对照组年龄、性别差异无统计学意义(年龄Z=-0.264，P=0.791；性别χ2=1.761，P=0.185)。在75例AML患者中，有63例患者经相同方案治疗，男性37例，女性26例，年龄3～77岁[10 (10.00,50.00)]，设为AML治疗前组和AML治疗后组，进行自身治疗前后比较。

1.2 方法

1.2.1 样本清晨空腹抽血，分离血清4 h内检测血清腺苷脱氨酶(ADA)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、谷氨酸转肽酶(GGT)，标本应避免溶血。

1.2.2 试剂贝克曼库尔特实验系统(苏州)有限公司AST、ALT、GGT试剂盒，按试剂盒说明书操作；浙江东瓯诊断产品有限公司ADA试剂盒，按试剂盒说明书操作。

1.2.3 仪器OLYMPUS-AU5400全自动生化分析仪。

1.2.4 方法在奥林巴斯AU5400全自动生化分析仪上采用酶法测定ADA，苹果酸脱氢酶(MDH)法测定AST，乳酸脱氢酶(LDH)法测定ALT，速率法测定GGT。

1.3 统计学方法采用SPSS13.0软件进行统计学分析，符合正态分布的计量资料采用均数±标准差(x-±s)表示，比较采用t检验，不符合正态分布的计量资料采用中位数P50(P25，P75)表示，组间比较采用秩和检验，计数资料比较采用χ2检验。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic curve，ROC曲线)评价ADA对ALL患者的诊断价值，以P＜0.05为差异有统计意义。

1.4 判断标准本实验室正常参考范围见表1。

表1 正常参考范围(U/L)

2 结果

2.1 AML患者的ADA水平与健康对照组比较AML组[15.30(9.50，31.30)U/L]与健康对照组[8.45(7.05，11.35)U/L]比较，ADA水平显著升高，差异有统计学意义(Z=5.922，P＜0.001)。

2.2 AML患者治疗前、后ADA水平比较AML组治疗后ADA水平[10.70(8.10，14.90)U/L]显著低于治疗前[14.70(9.60，26.70)U/L]，差异有统计学意义(Z=-3.590，P＜0.001)。

2.3 绘制ROC曲线根据健康对照组及AML组ADA水平绘制ROC曲线，ROC曲线下面积为0.771，95%可信区间为0.696～0.846，灵敏度为58.70%，特异性为87.20%，见图1。根据约登指数的最大值确定最佳截点为13.50 U/L，以此截点为界分为高ADA组(ADA≥13.50 U/L)和低ADA组(ADA＜13.50 U/L)。高ADA组患者44例，男性22例，女性22例，年龄6～77[36.00(19.00，51.00)]岁；低ADA组患者31例，男性19例，女性12例，年龄3～83[35.00 (25.85，61.25)]岁。高ADA组和低ADA组数据年龄、性别差异无统计学意义(年龄Z=-0.903，P=0.367；性别χ2=0.935，P=0.333)。

图1 AML患者ADA分布的ROC曲线

2.4 高ADA组与低ADA组AML患者的AST、ALT及GGT水平比较AML患者高ADA组中AST、ALT及GGT水平与低AML组比较显著升高(AST Z=-3.102，P=0.002；ALT Z=-2.046，P=0.041；GGT Z=-2.794，P=0.005)，差异均有统计学意义，见表2。

表2 高ADA组与低ADA组AML患者肝功指标比较[P50(P25，P75)]

3 讨论

ADA是一种核酸分解代谢酶类，广泛分布于人体各组织中[8]，而血液中红细胞、淋巴细胞和粒细胞ADA含量是血清的40～70倍[9]。近年来血清及体液中ADA活性的测定已在多种疾病[3-6]的诊断、鉴别诊断等研究中越来越受到重视。本研究检测了AML患者ADA水平，发现AML组患者外周血ADA水平显著高于正常对照组(P＜0.05)，与文献报道相符[10]。因此，该结论提示ADA水平的检测可为临床鉴别AML提供有效的参考。我们还分析AML治疗前组与AML治疗后组ADA水平，结果显示两组ADA水平有显著性差异，且治疗后ADA水平显著低于治疗前，表明ADA活性与治疗有关。

笔者根据AML患者和健康对照者ADA水平绘制ADA的ROC曲线。结果显示ADA的曲线下面积为0.771，95%可信区间为0.696～0.846。一般认为，AUC＞0.9表明筛检价值很高，＞0.7表明筛检价值中等[11]。我们的结果提示血清ADA对AML患者在临床诊断上有一定的价值。我们进一步根据ROC曲线分析确定筛检试验阳性结果的临界值，通过高于或低于某界值判断患者的患病概率。实验表明血清ADA水平辅助诊断AML价值根据Youden指数为最大值时，ADA的诊断界值为13.50 U/L，灵敏度为58.70%，特异性87.20%，该结果说明诊断准确性较高，具有较高的诊断价值。

ADA广泛存在于肝、肾、肌肉等组织中，正常情况下血清中ADA主要来源于肝脏[12]，报道显示无论何种原因造成肝细胞受损、坏死或膜通透性增加时，均能导致血清ADA水平增高[13-14]。AML是成人最常见的一类急性白血病，约占成人白血病发病率的70%[15]。因此研究AML患者ADA与AST、ALT、GGT的关系是具有临床价值的。根据ROC曲线所得出的ADA临界值为13.50，我们将AML患者ADA分为低高两组，并对其所对应的AST、ALT、GGT指标进行比较，结果显示AML患者低ADA组与高ADA组中AST、ALT及GGT比较差异有统计学意义(P＜0.05)，且高ADA组肝功能指标大于低ADA组，因此笔者可根据ADA临界值对AML患者进行初步诊断及评估病情。

综上所述，AML患者的ADA活性增高，ADA的分泌不仅来源于肝损伤，而且也来源于AML细胞。因此，ADA对AML患者具有辅助诊断价值，且本研究表明ADA水平在经过治疗后可明显降低。ADA检测可以作为AML患者的一项常规辅助检查，对AML的疾病诊断及评估病情的发展具有一定的价值。

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Determination of serum adenosine deaminase in patients with acute myeloid leukemia significance.

HAN Jing-ying,ZHANG Zhi-fen,JU Ying,LIU Tian-pu,LI Zhen,LI Yuan-tang,ZHANG Bin-chang.Department of Laboratory Medicine,Shandong Provincial Hospital Affiliated to Shandong University,Jinan 250021,Shandong,CHINA

ObjectiveTo explore the changes and its significance of serum adenosine deaminase(ADA)in patients with acute myeloid leukemia(AML).MethodsThe peripheral blood sera of 75 patients with AML(of which 62 had comparison before and after the treatment)and 86 healthy controls(control group)were collected in the Shandong Provincial Hospital from January 2012 to December 2013.Serum adenosine deaminase(ADA)was detected by using the PNP-XTO-POD coupling continuous monitoring method,and the alanine transaminase(ALT),glutamic oxaloacetic transaminase(AST)and gamma glutamyl transpeptidase(GGT)were detected using performance rate method.The serum ADA levels were detected between the control group and AML group.The change of ADA levels were compared in AML group before and after treatment.The receiver-operating characteristic curve(ROC curve)was used to determine the best cutoff point of ADA.Then AML patients before treatment were divided into low ADA group(ADA＜13.50 U/L) and high ADA group(ADA＞13.50 U/L)according to the cutoff point.The differences in age,sex,AST,ALT and GGT were analyzed between the two groups.ResultsThe ADA levels in the AML group[15.30(9.50,31.30)(U/L)]were significantly higher than[8.45(7.05,11.35)U/L]in the normal control group(Z=5.922,P＜0.001).Furthermore,the ADAlevels in the before treatment group[10.70(8.10,14.90)U/L]were significantly lower than[14.70(9.60,26.70)U/L] those after treatment group(Z=-3.590,P＜0.001).Using ROC curve,the before treatment group patients were divided into high ADA group(ADA≥13.50 U/L)and low ADA group(ADA＜13.50 U/L).The levels of AST,ALT and GGT in high ADA group were significantly higher than those in low ADA group(AST Z=-3.102,P=0.002;ALT Z=-2.046,P= 0.041;GGT Z=-2.794,P=0.005).ConclusionADA detection can be used as a routine examination in patients with AML,which has a certain value to the development of disease diagnosis and severity evaluation ofAML.

Acute myeloid leukemia(AML);Adenosine deaminase(ADA);Glutamic oxaloacetic transaminase (AST);Alanine transaminase(ALT);Gamma glutamyl transpeptidase(GGT)

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.15.021

R733.71

A

1003—6350（2017）15—2481—03

2016-12-22)

山东省自然科学基金(编号：ZR2011HM019)；山东省优秀中青年科学家奖励基金(编号：B2010YY045)

张炳昌。E-mail：zhangbingchangb@163.com