新生儿化脓性脑膜炎病原菌构成及耐药性分析

杨梅，陈桥，孙正刚

(达州市中西医结合医院检验科四川达州635000)

新生儿化脓性脑膜炎病原菌构成及耐药性分析

杨梅，陈桥，孙正刚

(达州市中西医结合医院检验科四川达州635000)

目的分析新生儿化脓性脑膜炎病原菌构成情况及耐药性情况。方法选取达州市中西医结合医院2013年3月至2015年3月收治的142例化脓性脑膜炎新生儿的脑脊液培养结果进行研究，比较分析其病原菌构成和耐药性情况。结果142例化脓性脑膜炎新生儿脑脊液病原菌构成：双菌株2例，单菌株140例，其中革兰阴性细菌100株(68.97%)，革兰阳性细菌38株(26.21%)，真菌7株(4.83%)。革兰阳性细菌中腐生葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌以及屎肠球菌等菌种对复方新诺明、氨苄西林、红霉素以及头孢西丁等抗生素耐药，但未检出对万古霉素和替考拉宁耐药的菌种。革兰阴性细菌中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、黏质沙雷菌等菌种对所研究抗生素耐药性较高，其中大肠埃希菌对复方新诺明、氨苄西林等抗生素的耐药率甚至达到80%以上，而整个研究未发现对美罗培南耐药的菌种。结论新生儿化脓性脑膜炎病原菌检出率主要以革兰阴性菌为主，且致病菌的耐药性严重。

大肠埃希菌；化脓性脑膜炎；病原菌构成；耐药性

化脓性脑膜炎是一种较为严重的中枢神经系统感染性疾病，常见的感染有肺炎链球菌感染和脑膜炎球菌感染[1]。该病发病原因主要为化脓性细菌感染，主要临床表现为呕吐、发热、头痛、脑膜刺激征、精神改变以及脑脊液改变等[2]。临床研究发现，虽然化脓性脑膜炎发病年龄段较广，但主要集中于5岁以下儿童，其在足月新生儿中的发病率为0.5%左右[3]。而国外有研究则发现，化脓性脑膜炎患儿即使经治疗存活后发生后遗症的概率也高达45%左右[4]。同时，由于该病病原众多，且其在疾病病因学所占比重有所不同。因此，对于化脓性脑膜炎患儿血和脑脊液培养结果中病原菌构成的研究显得尤为重要。本研究就新生儿化脓性脑膜炎病原菌构成情况及耐药性情况进行分析，以探讨如何在治疗过程中根据耐药情况合理选择抗菌药物，报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料选取达州市中西医结合医院2013年3月至2015年3月收治的142例化脓性脑膜炎新生儿进行研究。其中男性84例，女性58例，年龄7～28 d，平均(14±1.5)d；发病日龄8～31d，平均(16± 2.5)d；出生体质量4～8 kg，平均(4±1.1)kg。纳入标准：①符合《实用新生儿学》[5]中相关诊断标准者；②出生日龄在28 d以内者；③脑脊液培养结果呈阳性。排除标准：①先天性脑畸形者；②颅内缺血或缺血缺氧性疾病者；③早期感染菌量大且呈现阳性者。所有患儿入院后均进行药敏试验以及耐药性分析。整个研究经患者和家属知情同意后签署书面同意书，并获得本院伦理委员会批准后实施。

1.2 方法所有患儿均在入院48 h内抽取脑脊液3 mL送检，将3 mL脑脊液于无菌细菌室内注入儿童专用培养瓶，然后放入培养箱内进行培养。划线分区平板上(平板分区划线实验法)，置于35℃培养箱中再培养24 h后分离菌株。其中药敏试验采用琼脂扩散法进行，结果采取临床实验室标准委员会(NCCLS)制定标准进行相关判断。采用BACTEC9120全自动血培养仪、DL-96细菌鉴定系统、使用配套鉴定及药敏分析卡进行检测，试验所用培养瓶和培养箱均购自美国BD公司。

1.3 统计学方法应用SPSS11.5软件包进行数据分析，计数资料以率(%)表示，采用χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 新生儿化脓性脑膜炎脑脊液病原菌分布142例新生儿全部检出脑脊液培养阳性标本，且一共分离出145株病原菌，除2例分离出两种菌株(一种为白色念球菌，一种为粪肠球菌)外，其余140例均分离单一病原菌。其中革兰阴性细菌100株(68.97%)，革兰阳性细菌38株(26.21%)，真菌7株(4.83%)，见表1。

2.2 脑脊液检出革兰阳性细菌耐药性通过分析发现，革兰阳性细菌中大部分菌种对复方新诺明、氨苄西林、红霉素以及头孢西丁等抗生素耐药，但未检出对万古霉素和替考拉宁耐药的菌种，见表2。

表1142 例新生儿化脓性脑膜炎脑脊液病原菌分布

2.3 脑脊液检出革兰阴性细菌耐药性通过分析发现，革兰阴性细菌中大部分菌种对所研究抗生素耐药性较高，其中大肠埃希菌对复方新诺明、氨苄西林等抗生素的耐药率甚至达到80%以上，而整个研究未发现对美罗培南耐药的菌种，见表3。

2.4 并发症与预后142例患儿共住院治疗28～84 d，其中治愈135例(95.07%)，死亡7例(4.93%)。患儿发生并发症共11例(7.75%)，其中脑软化3例，脑积水3例，听力障碍3例，脑室膜炎1例，硬膜下积液1例。

表2 脑脊液检出革兰阳性细菌耐药性[例(%)]

表3 脑脊液检出革兰阴性细菌耐药性[例(%)]

3 讨论

新生儿在住院期间患病主要类型为感染性疾病，究其原因可能与新生儿免疫功能尚未发育成熟而缺乏抵抗病原的能力有关[6]。由于新生儿缺乏相关抵抗病原的能力，因此一旦患儿感染病原菌后，病原菌迅速向周围组织扩散，当病原菌扩散至脑组织后由于患儿血脑屏障功能不完善，将导致患儿发展成为化脓性脑膜炎[7]。若患儿不能及时有效诊断并接受针对性治疗，病情进展较快，可能引发较高的病死率[8]。有研究就指出，新生儿化脓性脑膜炎的病死率在我国约占50%。同时，患儿发病进行相应诊治后，也存在发生脑积水、失明、癫病以及感觉等功能障碍相关后遗症的可能[9]。此外，由于化脓性脑膜炎的临床症状多表现为呕吐、惊厥等，但其临床症状不具有一定特异性，在早期很难确诊。因此在早期确诊时就要应用脑脊液检查这一诊断金标准，不仅可以有效检测出患儿疾病病原菌构成，还可以有效指导抗生素应用，减少应用抗菌药物出现的耐药性。

近年来，随着我国生物医学的不断发展，抗生素在临床治疗中的应用也越来越多。但是随着抗生素的滥用和耐药菌的不断演变，像大肠埃希菌和革兰阴性菌发生感染的概率呈现逐年增高的趋势，不仅其耐药菌株数量逐渐上升，其耐药性也逐渐增强。大肠埃希菌是一种广泛分布于人类生活环境的细菌，常常寄居于人类肠道和生殖道中，产妇由于其特殊生理环境可能导致其生殖道内大量存在大肠埃希菌，因此在分娩过程中致使新生儿发生大肠埃希菌感染[10-11]。虽然产妇机体内的IgM能够杀死大肠埃希菌，但由于产妇胎盘具有一定屏障作用，因此IgM并不能有效进入胎儿体内提高其对大肠埃希菌的免疫力。有研究发现，大肠埃希菌是导致新生儿发生化脓性脑膜炎的主要病原菌[12]。而本次研究中，纳入研究的142例患儿经脑脊液培养结果明确大肠埃希菌感染者达55例，其比例达37.93%，证实了上述研究结果中大肠埃希菌是导致新生儿发生化脓性脑膜炎的主要病原菌这一结论。同时，142例化脓性脑膜炎新生儿脑脊液病中原菌中革兰阴性细菌有100株，占68.97%，革兰阳性细菌38株，占26.21%，真菌7株，占4.83%，而大肠埃希菌属于革兰阴性菌的一种，说明大肠埃希菌是导致新生儿发生化脓性脑膜炎的病原菌。

国内有研究显示，大部分大肠埃希菌还具有K1抗原，不仅可以抵抗抗生素的吞噬作用，还影响化脓性脑膜炎疾病的发生发展预后[13]。而在耐药性研究中也发现，革兰阴性细菌中大肠埃希菌对复方新诺明、氨苄西林、哌拉西林等抗生素的耐药率在80%以上，对四环素、头孢唑啉、头孢噻肟等抗生素的耐药率也在60%以上，进一步证实其对抗生素耐药性较高。而在革兰阳性细菌中，其常见致病菌对头孢西丁、氨苄西林、复方新诺明、红霉素等抗生素耐药性较高。两组耐药性研究同时证实多种致病菌在治疗过程中已经对某些抗生素出现较高的耐药性，因此在后续治疗中应该放弃应用相关抗生素，转而应用药效较强的抗生素，以达到较好的治疗效果。同时，在治疗过程中还应注意合理应用抗生素，避免滥用而增加耐药率。

总之，新生儿化脓性脑膜炎病原菌检出率主要以革兰阴性菌为主，且各种致病菌的耐药性情况较为严重，所以临床治疗应根据耐药情况选用具有较强敏感性的抗菌药物，严密监测并发症发生情况，提高患儿治愈情况，改善预后。

参考文献

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Pathogen composition and drug resistance in neonates with purulent meningitis.

YANG Mei,CHEN Qiao,SUN Zheng-gang.Department of Clinical Laboratory,Sichuan Dazhou Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine,Dazhou 635000,Sichuan,CHINA

ObjectiveTo analyze the pathogen composition and drug resistance of neonatal purulent meningitis. MethodsCerebrospinal fluid samples of 142 neonates with purulent meningitis of in our hospital from March 2013 to March 2015 were collected and cultured.The pathogen composition and drug resistance were compared.ResultsAmong the 142 cases,2 were infected by two pathogensand one was infected by one pathogen,with Gram-negative bacteria in 100 strains(68.97%),Gram-positive bacteria in 38 strains(26.21%),fungi in 7 strains(4.83%).Saprophytic staphylococcus,Staphylococcus epidermidis,Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium of Gram-positive bacteria were resistant to antibiotics such as cotrimoxazole,ampicillin,erythromycin and cefoxitin,but no strain showed resistance to vancomycin and teicoplanin.Escherichia coli,Klebsiella pneumonia,Serratia marcescens of Gram-negative bacteria were highly resistant to antibiotics detected,of which Escherichia coli showed a resistance rate of more than 80%to compound neopanamine and ampicillin,and no strain showed resistance to meropenem.ConclusionPathogens of neonatal purulent meningitis detected is mainly Gram-negative bacteria,and the drug resistance of the pathogenic bacteria is serious.

Escherichia coli;Purulent meningitis;Pathogen composition;Drug resistance

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.15.023

R722.1

A

1003—6350（2017）15—2486—04

2016-12-08)

四川省科技支撑计划(编号：2015SZ4576)

杨梅。E-mail：llmei1981@sina.com